Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文
DNA的提取方法
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，
质粒DNA提取实验
碱解法SDS碱裂解法（试剂盒提取）实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。实验材料大肠杆菌
DNA的提取实验
实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，位于水相与有机相的界画，从而达到纯化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚层中含有10－15%的水,从而溶解一部分poly－（A）RNA。将酚与氯仿联合使用
索氏提取法
索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法，是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法，用于粗脂肪含量的测定。
腐植酸钾的提取
煤经人工氧化(如用空气、臭氧或硝酸处理)可形成再生腐植酸，如煤用硝酸轻度氧化所得的产物称为硝基腐植酸。提取的方法是先用酸处理，脱去部分矿物质，再用稀碱溶液萃取，萃取液加酸酸化，即可得到腐植酸沉淀。根据腐植酸在溶剂中的溶解度，可分为三个组分：①溶于丙酮或乙醇的部分称为棕腐酸；②不溶于丙酮部分称为黑
细菌DNA提取方案
细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法. 一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18－24小时.2、刮取1～2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟.3、12000转/分钟离心10分钟
索氏提取法
索氏提取法，又名连续提取法、索氏抽提法，是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法，用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经
核蛋白提取实验
实验材料 水稻悬浮细胞试剂、试剂盒 匀浆液裂解缓冲液SDS 样品缓冲液磷酸缓冲液实验步骤 ( 1 ) 按照 Morre 和 Anderson 的方法从水稻悬浮细胞中分离细胞核，本文对方法进行了一些改动。所有分离细胞核的步骤都在冰上或 4°C 进行。( 2 ) 3000 g 离心 5 min 收集约
总RNA提取实验
实验方法原理 一些公司推出的总RNA 提取试剂盒，可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RNA 酶抑制剂，异硫氰酸弧(GTC)和β-巯基乙醇，加上整个操作都在冰浴下进行，这样就能显著降低RNA 的
质粒DNA提取实验
实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。
质粒DNA的提取
实验概要 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA
mRNA提取、分离纯化
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
真菌RNA提取实验
真菌RNA的提取可以：（1）用于真菌RNA干扰机制研究；（2）用于cDNA文库构建等研究；（3）用于真菌分子生物学相应研究。实验方法原理液氮研磨可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成
索氏提取举例
⒈萃取法回流提取用滤纸制作圆柱状滤纸筒，称取10g茶叶，用研钵捣成茶叶末，装入滤纸筒中，将开口端折叠封住，放入提取筒中.将150 mL圆底烧瓶安装于电热套上，放入2粒沸石，量取95%乙醇100mL，从提取筒中倒入烧瓶，安装好索氏提取装置，见图4-21.1，打开电源，加热回流2小时.实验时能够观察到，
提取植物rna方法
提到RNA的提取，是不是充满了心酸和无奈呀，抽提过程中已十分小心谨慎了，但是有时候还是会出现RNA污染、降解的悲剧。别怕，今天小编给您介绍一种新的RNA提取方法，比以前的方法更快、更有效和更可靠，让您从此不用再担心的RNA的抽提了。 众所周知：获得纯净、完整的RNA样品，是对一种植物的活性基因
植物DNA提取实验
机械法 实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨，以机械力破碎细胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液，使细胞膜破
李子提取多糖方法
溶剂提取法、酶提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、高压脉冲提取法、超临界流体萃取法。具体操作步骤如下：1、溶剂提取法：(1)水提法：以水为溶剂，可采用热水浸提或冷水浸提（植物多糖多采用热水浸提，可直接或离心去除杂质），由于多糖不溶于乙醇，可通过沉淀将多糖提纯出来。水提法的确缺点在于温度高、耗时
DNA－提取小技巧
很多人都有上面这样的想法吧？其实我当初也这样的，结果呢？怎么也提不好，一提提了好几个月呢。DNA 提取还真是说起来容易、做起来难。首先大家得明确一点，DNA 是遗传信息的载体，获得高分子量、高纯度的 DNA 是你开展后续测序、杂交等实验的前提。所以，注意了，要高分子量、高纯度哦。我相信肯定有很多人一
中药提取分离方法
为提高中药质量、改变传统中药剂型“大、黑、粗”的状态、让中药步入国际市场,一些现代高新工程技术正在不断地被借鉴到中药生产中来,一方面使中药生产加符合传统的中医药理论,确保用药的质量要求,另一方面也提高了现有中草药资源的利用率。笔者拟对几种研究和应用较多且发展前景广阔的中药提取分离技术作一综述。1 中
真菌DNA的提取
1.实验试剂 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(pH8.0):氯仿:异戊醇(25:
TRIzol－RNA提取方法
实验方法原理 Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构
全血RNA提取
摘要： RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了，但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法，或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来，加白细胞分离液、离心等步骤，比较繁琐，如果能进行全血的提取，那就再好不过。RNA提取
如何提取细胞线粒体
提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案：心肌组织切碎后在4 ℃介质（0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4，0-4℃）中制备心肌组织匀浆。匀浆经750g、离心10 min后留上清，以9000 g离心20 min 后留沉淀，重新悬浮后以9000 g再离心20 min，弃
核酸提取仪原理
磁珠法核酸提取仪一般分为抽吸法和磁棒法两种 1. 抽吸法，也叫移液法，是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取，一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:1) 裂解：在样品中加入裂解液，通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应，细胞裂解，释放核酸。2) 吸附：在样品裂解液中加入磁珠，
如何提取黄芩素？
提取黄芩素的方法有多种，以下是其中一种常用的方法： 将黄芩粉末与乙醇按一定比例混合，通常为1:10。 将混合物加热回流提取，通常需要2-3小时。 提取完成后，将混合物过滤，得到含有黄芩素的乙醇溶液。 将乙醇溶液浓缩至一定浓度，然后冷却结晶，即可得到黄芩素的粗品。 将粗品用适量的水洗涤，
血液DNA的提取
Part A: Purifying nuclear pellets.1) Add 50-60μl fresh, packed red blood cells (RBC) to 700μl PBS. Mix by inversion.2) Add 700-800μl Lysis buffer. Clo
茶多酚的提取步骤
茶多酚提取：在茶叶中提取茶多酚的工艺主要有以下的几种方法：1. 传统工艺：以水或乙醇为溶剂，采用水浴加热至80℃ 保温提取多次。合并提取液后用等体积的氯仿萃取，分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取，将乙酸乙酯大部回收后浓缩近干，冷冻干燥后用去离子水反复重结晶即得精品。但该法的缺点是操作费时麻烦、溶剂消耗
黏粒的定义组成和功能
黏粒英文cosmid，指带有黏端位点(cos)的质粒。黏粒是由人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。黏粒的组成包括质粒复制起点（ColE1）、氨苄青霉素抗性标记、cos位点。
核酸提取在发现丙型肝炎病毒研究与提取的应用
10月5日，在瑞典首都斯德哥尔摩卡罗琳医学院，诺贝尔奖委员会总秘书长托马斯·佩尔曼宣布，2020年诺贝尔生理学或医学奖授予Harvey J. Alter, Michael Houghton和Charles M. Rice，以表彰他们在“发现丙型肝炎病毒”方面作出的贡献。丙肝病毒的发现过程充满了曲
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
磁珠法核酸提取过程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。2、结合 将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管