时间分辨荧光技术原理
荧光和均相性分析理论上，荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此，很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振，淬灭，时间关联，荧光寿命改变以及荧光共振能量转移（ FRET）已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而，在这些应用中，一些技术条件严重受限，包括低的调整幅度，来自于分析环境组分的的信号干扰，迅变的荧光背景，以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中， FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定，能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对，距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性，可以将FRET作为一个光学标尺，来衡量生物大分子间的关系，这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文
荧光PCR原理
1．荧光染料荧光基团通常各自拥有单一的光吸收峰。在光的刺激下，荧光基团吸收光的能量后通常以三种方式释放出能量：1) 光能 许多荧光基团吸收光能后仍旧以光能形式释放能量，并且发射光的峰值大于吸收峰。比如荧光染料Fam的光吸收峰为490nm，而发射峰为530nm。 2) 热能 某些荧光基团吸收光能后，能
荧光硫测定仪/荧光测硫仪测量原理及技术指标
TEA-600S型荧光硫测定仪采用紫外荧光法测定原理。样品经高温氧化反应，其中的硫化物定量地转化为SO2。样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份，进入反应室。SO2经紫外线照射，通过测量其大小即可计算出相应样品的含硫量。 产生特定波长的光谱，由光电倍增管检测接收。发射的荧光强度和原样品中硫的含量
复钙时间测定原理
【原理】 在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆就发生凝固，这一过程所经历的时间即为复钙时间（recalcification time，RT）。 【方法学评价】通常有两种方法： ①表面玻璃皿法：本法比试管法敏感，但不如试管法简便。 ②试管法：仅用试管替代玻璃皿作试验。 RT测定
计算超分辨图像重建算法拓展荧光显微镜分辨率极限
自2014年诺贝尔化学奖授予了超分辨显微技术以来，超分辨成像技术取得了巨大的进步，成像的分辨率得到了进一步的提高。然而受限于荧光分子单位时间内发出的光子数，超分辨成像技术在时间分辨率和空间分辨率上难于获得同等提高。 近日，发表在《Nature Biotechnology》上的一项题为“Spar
计算超分辨图像重建算法拓展荧光显微镜分辨率极限
自2014年诺贝尔化学奖授予了超分辨显微技术以来，超分辨成像技术取得了巨大的进步，成像的分辨率得到了进一步的提高。然而受限于荧光分子单位时间内发出的光子数，超分辨成像技术在时间分辨率和空间分辨率上难于获得同等提高。 近日，发表在《Nature Biotechnology》上的一项题为“Spar
我国学者研制具有时间分辨率的活体蛋白质激活技术
2019年5月8日，生命中心、北京大学化学与分子工程学院、合成与功能生物分子中心陈鹏课题组与王初课题组在《自然》杂志在线发表题为“Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems”的研究论文，报道了两
时间分辨免疫技术/酶免/胶体金法/化学发光四种方法区别
1学发光免疫分析(CLIA)：是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。 2 时间分辨荧光免疫测定（TRFIA
紫外荧光定硫仪的技术参数及原理
紫外荧光定硫仪采用紫外荧光法测定原理。样品被引入到高温裂解炉后，样品发生裂解氧化反应。在1000℃左右的高温下，样品被wan全气化并发生氧化裂解，其中的硫化物定量地转化为二氧化硫。 反应气由载气携带，经过膜式干燥器脱去其中的水份，进入反应室。二氧化硫受到特定波长的紫外线照射，吸收这种射
X射线荧光分析技术应用的原理分析及误区
X射线荧光分析作为工业分析技术经历了几十年的发展历程，在水泥制造业已得到广泛应用。我国水泥工业中X射线荧光分析技术的应用和发展，基本上是在近25年中实现的。上个世纪七十年代末八十年代初，一方面随着大量新型干法水泥生产线的成套引进，大型X荧光光谱仪开始出现在我国水泥工业，另一方面，随着钙铁分析仪的研
多彩色荧光原位杂交技术的原理与应用
mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术，它不仅具有FISH的优点，而且克服了FISH的许多局限，其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因，分辨复杂的染色体易位和微小缺失，区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发
免疫荧光组织（细胞）化学技术基本原理
免疫荧光组织化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，荧光素受激发光的照射，由低能态进入高能态，而高能态的电子是不稳定的，以辐射光量子的形式释放能量后，
荧光原位杂交技术的定义、原理、背景及优势
荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。荧光原位杂交技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。 它的基本原理是：如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶D
DNA纤维荧光原位杂交技术的原理与应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度，如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化，再以此为载体进行FISH，使其分辨率显著提高，这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术，将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
荧光PCR原理与实时荧光PCR技术靶基因的确定及引物和探...
一、荧光PCR原理 1．荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRET。 2．荧光化学： 荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种：荧光探针和荧
高分辨飞行时间气质联用仪的主要特点
高分辨特点，使之具有分离同位素干扰与背景化学噪音的选择性； 灵敏度高，获取极低的检测范围； 宽线性动态范围，允许在一定的浓度范围内进行实验； 精确质量MS测量能力，可给出元素组成信息，用于鉴别被分析物；可同时获得分子离子与碎片离子的精确质量，从而简化谱图解释过程； 多种离子化选项，适合于
“化学脱笼”：实现蛋白质高时间分辨的原位激活
在活细胞等生理环境下开展蛋白质功能的原位研究具有重要的科学意义。北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组长期致力于发展蛋白质的原位激活技术，希望为活细胞内的每一个蛋白质安装“调控开关”。 近日这一研究组与王初课题组合作发表了题为“Time-resolved protein activation b
荧光光谱仪的光谱分辨率
光谱分辨率是指把光谱特征、谱带分解成为分离成分的能力。分析人员需要什么样的光谱分辨率取决于所面对的具体问题。一般，用于基本样品识别的常规分析只需要低/中光谱分辨率。对于样品峰位移动或受外在环境因素影响而引起峰位移动的表征则通常需要高分辨率，因为这些现象在荧光光谱上仅仅表现为非常细微的变化，在低分辨率
流式荧光技术
流式荧光技术又称液态芯片技术(Luminex xMAP技术)，其整和了荧光编码微球、激光分析、应用流体学及高速数字信号处理等多项最新科技，是美国Luminex公司于上世纪末开发出的新一代高通量发光检测技术。目前该技术已被广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别等领域，并得到各权威机构和
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibod
荧光抗体技术技术特点
本法较其他鉴定细菌的血清学方法速度快、操作简单、敏感性高，但在细菌实验诊断中，一般只能作为一种补充手段使用，而不能代替常规诊断。荧光抗体染色法对脑膜炎奈氏菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、布氏杆菌和炭疽杆菌等的实验诊断有较好效果。
发明计算超分辨图像重建算法拓展荧光显微镜分辨率极限
自2014年诺贝尔化学奖授予了超分辨显微技术以来，超分辨成像技术取得了巨大的进步，成像的分辨率得到了进一步的提高。然而受限于荧光分子单位时间内发出的光子数，超分辨成像技术在时间分辨率和空间分辨率上难于获得同等提高。 近日，发表在《Nature Biotechnology》上的一项题为“Spar
荧光定量pcr多长时间出结果
荧光定量我用罗氏的反应速度算是相当快的,在样本处理（提出核酸）后,放在荧光定量PCR仪器上一般需要30分钟~1小时左右.但是如果你的样本比如支原体的含量非常高,可能在没有运行结束已经可以看出结果了,但是如果说5分钟就出结果了,确实太快了点.,2,一次荧光定量pcr反应的时间与循环数,延伸时间,程序模
复钙时间测定原理|方法
［原理］ 在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆就发生凝固，这一过程所经历的时间即为复钙时间（recalcification time，RT）。 ［方法学评价］通常有两种方法：①表面玻璃皿法：本法比试管法敏感，但不如试管法简便。②试管法：仅用试管替代玻璃皿作试验。 RT测定方法也有改
复钙时间测定原理|方法
［原理］ 在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆就发生凝固，这一过程所经历的时间即为复钙时间（recalcification time，RT）。 ［方法学评价］通常有两种方法：①表面玻璃皿法：本法比试管法敏感，但不如试管法简便。②试管法：仅用试管替代玻璃皿作试验。 RT测定方法也有
荧光显微术原理
在一百年前，斯托克（STOKES）发现自然界有许多物质能在较短波长光线照射下，发出较长波长的光线，也即这些物质在被紫外光、紫光、兰光或绿光照射后，能激发出兰色、绿色、黄色或红色的荧光，叫做光致荧光，于是在1911 年奥地利科学家K.Reichert*次制成有实用价值的荧光显微镜，采用碳弧灯作激发光源
免疫荧光原理
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
免疫荧光原理
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 直接法 将
叶绿素荧光的原理
1）调制叶绿素荧光调制叶绿素荧光全称脉冲-振幅-调制（Pulse-Amplitude-Modulation,PAM）叶绿素荧光，我们国内一般简称调制叶绿素荧光，测量调制叶绿素荧光的仪器叫调制荧光仪，或叫PAM。调制叶绿素荧光（PAM）是研究光合作用的强大工具，与光合放氧、气体交换并称为光合作用测量的
荧光淬灭原理
荧光淬灭原理如下：①因荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量；②荧光物质的分子与熄灭剂分子作用生成了本身不发光的的配位化合物；③溶解氧的存在，使得荧光物质氧化，或是由于氧分子的顺磁性，促进了体系间跨越，使得激发单重态的荧光分子转变至三重态；④当荧光物质浓度过大时,会产生自淬灭现象.又称荧光熄灭或萃
荧光分析的原理
使激发光的波长和强度保持不变，而让荧光物质所发生的荧光通过发射单色器照射于检测器上,调节发射单色器至各种不同波长处,由检测器测出相应的荧光强度，然后以荧光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，即为荧光光谱，又称荧光发射光谱。让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光，而让荧光以固定的发射波长照射到检