时间分辨荧光技术原理
荧光和均相性分析理论上,荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移( FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而,在这些应用中,一些技术条件严重受限,包括低的调整幅度,来自于分析环境组分的的信号干扰,迅变的荧光背景,以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中, FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定,能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对,距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性,可以将FRET作为一个光学标尺,来衡量生物大分子间的关系,这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文
简述X荧光光谱仪技术原理
X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品。受激发的样品中的每一种元素会放射出二次X射线,并且不同的元素所放射出的二次X射线具有特定的能量特性或波长特性。探测系统测量这些放射出来的二次X射线的能量及数量。然后,仪器软件将探测系统所
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用1
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ- PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及
X荧光光谱仪的技术原理
X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品,产生X荧光(二次X射线),探测器对X荧光进行检测。 X荧光光谱仪的技术原理: 元素的原子受到高能辐射激发而引起内层电子的跃迁,同时发射出具有一定特殊性波长的X射线,根据莫斯莱定律,荧光X
荧光光谱检测技术的原理和特点
荧光光谱技术是一种重要的光电检测技术,特别是在物质种类检测中有着重要的应用。它是对辐射能激发出的辐射强度进行定量分析的发射光谱分析方法。物体经过叫短波长的光照射后辐射出较长波长的光,这种光就是荧光,常见的日光灯的发光原理就是物质吸收较短波长的光(紫外光)能量辐射出较长波长的光(可将光)的现象。
荧光显微镜技术原理和方法
)训练目的 学习荧光显微镜的使用;了解荧光显微镜技术原理和方法。2)实验材料 生物素标记的一dUTP(Biotin-dUTP)或地高辛标记的duUTP(Digoxingening—11一dullP)1 nmol/μL,TdT酶(25 U/μL),反应缓冲液,洗涤缓冲液,异硫氰酸荧光素(F
荧光定量PCR技术的基本原理
PCR反应过程产生 DNA拷贝数,随反应循环数增加,以呈指数方式增加逐渐转入平台期。在传统PCR中,用终点法对PCR产物定量有不足之处;而RQ––PCR对整个PCR反应扩增过程进行实时检测,并连续分析与扩增相关荧光信号,随反应进行检测到荧光信号变化可绘成一条曲线。因此可在PCR反应处于指数期某一点检
流式荧光液芯技术的原理及其应用
曾经在2000年前后经历过辉煌发展的传统生物芯片,经过10年左右的应用,科学家们终于有了些更客观和更清醒的认识,同时产业界也衍生出了更专业更具特点的新型生物芯片。传统基于玻璃片、硅片、膜片的所谓“固态芯片”是生命科学研究领域中非常优秀的科研工具,它们的共同特点是在固态基材上极小的面积里合成或固
Inscopix在动物的时间分辨行为任务观察的应用
众所周知,海马作为记忆形成的一部分处理时间信息。虽然在海马和内侧内嗅皮层观察到了时间细胞,但许多使用的行为任务呈现出潜在的混淆,可能会由于动物的移动而对时间细胞的观测造成一些影响。在此,我们报道了一种新的基于探鼻实验的时间分辨的任务,该任务被设计使用Inscopix在体超微显微成像,用于分析自由活动
电喷雾飞行时间高分辨率质谱仪
电喷雾飞行时间高分辨率质谱仪是一种用于化学、材料科学领域的分析仪器,于2014年6月30日启用。 技术指标 真空:3/0,3/3*10-4/5*10-7hPa;质量范围:50–20,000m/z;质量精度:内标法2ppm,外标法5ppm;灵敏度:HPLC进样,10pg利血平(m/z609);
超分辨荧光蛋白开发研究获进展
绿色荧光蛋白(GFP)的发明因其能够提供对于活细胞和活体动物的靶向基因修饰标记而获得2008年诺贝尔化学奖。进一步,由基因改造的光激活荧光蛋白(PA-FP)能够提供单分子特性,而实现了超分辨显微,使得这一技术获得2014年诺贝尔化学奖。随后,超分辨的发展向着活细胞动态超高时空分辨率显微迈进。其中
计算超分辨图像重建算法拓展荧光显微镜分辨率极限
自2014年诺贝尔化学奖授予了超分辨显微技术以来,超分辨成像技术取得了巨大的进步,成像的分辨率得到了进一步的提高。然而受限于荧光分子单位时间内发出的光子数,超分辨成像技术在时间分辨率和空间分辨率上难于获得同等提高。 近日,发表在《Nature Biotechnology》上的一项题为“Spar
计算超分辨图像重建算法拓展荧光显微镜分辨率极限
自2014年诺贝尔化学奖授予了超分辨显微技术以来,超分辨成像技术取得了巨大的进步,成像的分辨率得到了进一步的提高。然而受限于荧光分子单位时间内发出的光子数,超分辨成像技术在时间分辨率和空间分辨率上难于获得同等提高。 近日,发表在《Nature Biotechnology》上的一项题为“Spar
我国学者研制具有时间分辨率的活体蛋白质激活技术
2019年5月8日,生命中心、北京大学化学与分子工程学院、合成与功能生物分子中心陈鹏课题组与王初课题组在《自然》杂志在线发表题为“Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems”的研究论文,报道了两
时间分辨免疫技术/酶免/胶体金法/化学发光四种方法区别
1学发光免疫分析(CLIA):是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。 2 时间分辨荧光免疫测定(TRFIA
荧光显微镜的技术和拉曼光谱技术原理
环境水中石油类污染物的含量是反映水质的指标之一,本文采用三波长定量测试水中油含量,样品测试方便,数据准确。环境中水中的石油类来自工业废水和生活污水的污染。油类物质在水面形成油膜,影响了空气和水的气体交换;分散于水中以及吸附于颗粒上或以乳化状态存在于水中的油,被微生物分解时,将消耗水中溶氧,容易使
X荧光光谱仪技术原理和用途
X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品,产生X荧光(二次X射线),探测器对X荧光进行检测。技术原理受激发的样品中的每一种元素会放射出二次X射线,并且不同的元素所放射出的二次X射线具有特定的能量特性或波长特性。探测系统测量这些放射出
X射线荧光光谱仪的技术原理
X射线荧光光谱仪是利用初级X射线光子或其他微观离子激发待测物质中的原子,使之产生荧光(次级X射线)而进行物质成分分析和化学态研究的方法。按激发、色散和探测方法的不同,分为X射线光谱法(波长色散)和X射线能谱法(能量色散)。具有重现性好,测量速度快,灵敏度高的特点。能分析F(9)~U(92)之间所有元
荧光显微镜的原理和技术特点
在萤光显微镜上,必须在标本的照明光中,选择出特定波长的激发光,以产生荧光,然后必须在激发光和荧光混合的光线中,单把荧光分离出来以供观察。因此,在选择特定波长中,滤光镜系统,成为极其重要的角色。荧光显微镜原理:(A) 光源:光源辐射出各种波长的光(以紫外至红外)。(B) 激励滤光源:透过能使标本产生萤
实时荧光定量PCR技术的基本原理
在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光基团,这些荧光物质有其特定的波长。仪器可以自动检出,利用荧光信号积累,实时监测整个PCR进程,在PCR循环中,测量的信号将作为荧光阈值的坐标。并且引入一个——Ct值(Threshold cycle)概念,Ct值是指产生可被检测到得荧光信号所需的最小循环数,是
X荧光分析仪的应用及技术原理
X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品,产生X荧光(二次X射线),探测器对X荧光进行检测。 一、XRF在物质成分分析上的应用 XRF应用主要取决于仪器技术和理论方法的发展。X射线荧光分析仪器有三种主要类型:实验室用
免疫荧光技术应用食品检测的原理
将抗体球蛋白稀释成2mg/mL,和2%绵羊红细胞1∶1混合(混合后血球成1%),再加依文斯兰2滴(0.1%)。这样的悬液里和血球表面带有沙门氏菌的抗体,加上增菌液,在湿的环境下使抗原和抗体结合,其余的杂质和非特异的物质不与抗体结合,不易固定在玻片上,易被水冲击。因此,有特异性的抗原就能滞留在玻璃片上
X射线荧光测厚仪的原理和技术指标
原理 当原子受到原级X射线或其他微观粒子的激发使原子内层电子电离而出现空位,原子内层电子重新配位,较外层的电子跃迁到内层空位,并同时放出次级X射线,即X射线荧光。X射线荧光的波长对不同元素是特征的,因此可以根据元素X射线荧光特征波长对元素做定性分析,根据元素释放出来的荧光强度,来进行定量分析如
关于免疫荧光技术的方法原理的简介
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 直接法 将
叶绿素荧光技术发展历程及测量原理(二)
饱和脉冲技术工作原理 所谓饱和脉冲技术,就是打开一个持续时间很短(一般小于1 s)的强光关闭所有的电子门(光合作用被暂时抑制),从而使叶绿素荧光达到最大。饱和脉冲(Saturation Pulse, SP)可被看作是光化光的一个特例。光化光越强,PS II释放的电子越多,PQ处累积的电子
叶绿素荧光技术发展历程及测量原理(一)
叶绿素荧光,作为光合作用研究的探针,得到了广泛的研究和应用。叶绿素荧光不仅能反映光能吸收、激发能传递和光化学反应等光合作用的原初反应过程,而且与电子传递、质子梯度的建立及ATP合成和CO2固定等过程有关。几乎所有光合作用过程的变化均可通过叶绿素荧光反映出来,而荧光测定技术不需破碎细胞,不伤害生物体,
解离增强镧系元素荧光免疫分析技术的原理
解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复
详细解析实时荧光定量PCR探针法技术原理
目前主流的实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)方法分为染料法和探针法,染料法以SYBR Green法为代表,SYBR Green染料游离时荧光微弱,但但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强,反应管中的荧光强度与反应管中双链DNA的数量成正比例关系,因此荧光定量
高分辨飞行时间气质联用仪的主要特点
高分辨特点,使之具有分离同位素干扰与背景化学噪音的选择性; 灵敏度高,获取极低的检测范围; 宽线性动态范围,允许在一定的浓度范围内进行实验; 精确质量MS测量能力,可给出元素组成信息,用于鉴别被分析物;可同时获得分子离子与碎片离子的精确质量,从而简化谱图解释过程; 多种离子化选项,适合于
“化学脱笼”:实现蛋白质高时间分辨的原位激活
在活细胞等生理环境下开展蛋白质功能的原位研究具有重要的科学意义。北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组长期致力于发展蛋白质的原位激活技术,希望为活细胞内的每一个蛋白质安装“调控开关”。 近日这一研究组与王初课题组合作发表了题为“Time-resolved protein activation b
荧光硫测定仪/荧光测硫仪测量原理及技术指标
TEA-600S型荧光硫测定仪采用紫外荧光法测定原理。样品经高温氧化反应,其中的硫化物定量地转化为SO2。样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份,进入反应室。SO2经紫外线照射,通过测量其大小即可计算出相应样品的含硫量。 产生特定波长的光谱,由光电倍增管检测接收。发射的荧光强度和原样品中硫的含量