激光扫描共焦显微镜技术
l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文
显微共焦拉曼光谱仪的功能
显微共焦拉曼光谱仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2005年09月01日启用。 1技术指标 激光器波长:514nm,325nm,785nm拉曼位移范围:100~4000cm-1显微尺寸范围:≤1μm光谱范围:300~1000nm光谱分辨率:≤1cm-1带有微区装置,具有微探针功能,可以对微小
共焦延时成像揭示雄蕊发育的精细特征
近日,来自加拿大蒙特利尔大学的西尔维亚·西尔维拉、丹尼尔·基尔茨科夫斯基等人开发了一种共焦延时成像方法,对拟南芥的雄蕊的发育进行全面的定量描述,使对花的生殖器官发育的观察成为可能。相关成果以封面文章形式发表在近日出版的《植物生理学》上。 多细胞生物的发育是一个复杂的过程,涉及单个细胞之间精确的生
超分辨荧光显微镜和普通荧光显微镜的区别
两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下: 一、荧光显微镜 1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下: 一、荧光显微镜 1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光
激光扫描共聚焦显微镜在生命科学中的应用
实验目的与要求1. 掌握激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理及其在生命科学中的应用。一、激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理1.普通荧光显微镜的不足 使用荧光物质标记细胞中的特定成分或结构,不仅图像与对比度增强,而且由于许多荧光显微镜的光源使用短波长的紫外光,大大提高了分辩率(δ=0.61 λ/ N
青少年型青光眼的检查介绍
青少年型青光眼的检查方法:超声生物显微镜的应用青年:该项技术可在无干扰自然现任状态下,对活体人眼前段的解剖结构及生理功能致力进行动态和静态记录,并可作定量测量特别每天对睫状体的形态周边虹膜后房形态及生理病理变化进行知名实时记录为原发性闭角型青光眼,多例特别是原发性医学慢性闭角型青光眼的诊断严格慢
激光扫描共聚焦显微镜的实际使用简介
细胞间通讯的研究 动物和植物细胞中缝隙连接介导的胞间通信在细胞增殖和分化中起着重要作用。 激光扫描共聚焦显微镜可通过观察细胞缝隙连接分子的转移来测量传递细胞调控信息的一些离子、小分子物质。 该技术可以用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用,也可用于
科研人员成功研制激光扫描实时立体显微镜
日前,中国科学院西安光学精密机械研究所瞬态光学与光子技术国家重点实验室(简称:瞬态室)超分辨成像团队研制成功双光子激发激光扫描实时立体显微镜,首次把基于双目视觉的立体显微方法和高分辨率双光子激发激光扫描荧光显微技术结合在一起,实现了对三维荧光样品的高速立体成像,相关研究成果发表在2016年12月刊的
激光扫描共聚焦显微镜的应用功能简介
激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激光荧光探针,利用计算机进行图像处理,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、
激光扫描共聚焦显微镜克服图像模糊的缺点
激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明
激光扫描共聚焦显微镜在医学领域的应用
在大脑和神经科学中的应用 激光扫描共聚焦显微镜分层扫描发现神经轴突的内部结构连续性好。用激光扫描共聚焦显微镜能观察到脑干组织中神经轴突的正常走向,可排除在荧光显微镜下由此造成的一些病理假象。并且激光扫描共聚焦显微镜能观察神经轴突的三维结构,因此应用 CLSM 有可能观察到普通光镜下未能发现的神
激光扫描共聚焦荧光显微镜的历史发展
·1957年,Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理,获得了美国的ZL。 ·1967年,Egger和Petran成功地应用共聚焦显微镜产生了一个光学横断面。 ·1977年,Sheppard和Wilson首次描述了光与被照明物体的原子之间的非线性关系和激光扫描器的拉曼光
共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针
一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛,以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1.细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca
中科院成功研制激光扫描实时立体显微镜
花粉和荧光小球样品的红蓝立体图像(可佩戴红蓝眼镜观看) 据中国科学院网站消息,日前,中国科学院西安光学精密机械研究所瞬态光学与光子技术国家重点实验室(简称:瞬态室)超分辨成像团队研制成功双光子激发激光扫描实时立体显微镜,首次把基于双目视觉的立体显微方法和高分辨率双光子激发激光扫描荧光显微技术结
激光扫描共聚焦荧光显微镜的样品要求
1,样品经荧光探针标记; 2,固定的或活的组织; 3,固定的或活的贴壁培养细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上; 4,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片; 5,载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右 6,标本不能太厚,如太厚激发光大部
细胞研究用的显微镜分类和工作原理(二)
细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜(图2-2,3,4)就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。图2-3 落射式照明原理荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:1、照明方式通常为落射式,
共聚焦显微镜
一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细微结构的成像
激光扫描共聚焦荧光显微镜荧光显微镜系统简介
显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。显微镜光路以无限远光学系统可方便地在其中插人光学选件而不影响成像质量和测量精度。物镜应选取大数值孔径平场复消色差物镜,有利于荧光的采集和成像的清晰。物镜组的转换,滤色片组的选取,载物台的移动调节,焦平面的记忆锁定都应由计算机自动控制。 激光扫
原子力激光显微镜与扫描隧道显微镜有什么不同
原子力激光显微镜扫描隧道显微镜技术曾在1986年荣获诺贝尔物理学奖。这是物理学与计算机结合的产物。它是把电压加到样品和探针上,当探针接触样品时产生隧道电子,其隧道电子数将随样品到探针的间距而改变,目前其纵向和横向分辨率均可达埃(微微微米)级。在扫描隧道显微镜基础上,美国数字仪器公司又推出了原子力显微
荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的
原子力激光显微镜与扫描隧道显微镜有什么不同
原子力激光显微镜扫描隧道显微镜技术曾在1986年荣获诺贝尔物理学奖。这是物理学与计算机结合的产物。它是把电压加到样品和探针上,当探针接触样品时产生隧道电子,其隧道电子数将随样品到探针的间距而改变,目前其纵向和横向分辨率均可达埃(微微微米)级。在扫描隧道显微镜基础上,美国数字仪器公司又推出了原子力显微
激光共聚焦显微镜技术
激光共聚焦显微镜技术(Confocal Lasers Scanning Miccruscope CLSM)是将显微镜技术与激光技术有效的结合,对具有荧光标记的物的形态及功能,通过计算机控制可以对其单层面进行快速扫描,也可以对多个层面进行连续光片层扫描。逐层获得二维光学横断面图像,并可通过计算机三维重
激光共聚焦显微镜技术
激光共聚焦显微镜技术(Confocal Lasers Scanning Miccruscope CLSM)是将显微镜技术与激光技术有效的结合,对具有荧光标记的物的形态及功能,通过计算机控制可以对其单层面进行快速扫描,也可以对多个层面进行连续光片层扫描。逐层获得二维光学横断面图像,并可通过计算机三维重
激光共聚焦显微镜的工作原理
在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察 。 同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在 2um 以上时,其影响更为明显。激光扫描共聚焦显微镜光路图激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激
激光共聚焦显微镜原理
在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察。 同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在 2um 以上时,其影响更为明显。图2 激光扫描共聚焦显微镜光路图激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用
快速了解激光共聚焦成像
激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图象仪器。它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。 利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上
激光共聚焦显微镜的显微镜系统
显微镜系统 荧光显微镜是激光扫描共聚焦显微镜的一个重要组成部分。它配备两个光源:卤素灯光源和汞灯光源,主要是用于预览样品,其中卤素灯光源用于寻找样品焦平面、观察样品位置、形态和分布;汞灯用于观察和分辨样品中产生荧光物质的成分和位置。对于光敏(例如淬灭)的样品最好用卤素灯进行预览,以减少对样品的刺激
拉曼仪器操作和使用
一、开机关机步骤 下面以Renishaw公司的inVia型激光共焦拉曼光谱仪为例描述仪器的正常开、关机和操作过程。 RenishawinVia型激光共焦拉曼光谱仪操作规程 (1)开机顺序 ①打开主机电源; ②打开计算机电源; ③打开将使用的激光器电源 a.514nm:打开激光器后面
拉曼光谱仪操作和使用
一、开机关机步骤下面以Renishaw公司的inVia型激光共焦拉曼光谱仪为例描述仪器的正常开、关机和操作过程。RenishawinVia型激光共焦拉曼光谱仪操作规程(1)开机顺序①打开主机电源;②打开计算机电源;③打开将使用的激光器电源a.514nm:打开激光器后面的总电源开关然后打开激光器上的钥
共聚焦显微镜的组成
共聚焦显微镜主要由五部分组成:显微光学系统、扫描装置、光源、检测器和应用软件系统。整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。 (1)显微光学系统: 显微镜是共焦检测系统常用的组件,是系统成像质量的核心部分。显微镜光路一般采用无限远光学系统结构,可以方便地