激光扫描共焦显微镜技术

l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文

共聚焦显微镜的功能和用途

从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。激光扫描共聚焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dich

共聚焦显微镜的功能特点

从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。激光扫描共聚焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dich

共聚焦显微镜介绍

  一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展   科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细

激光共聚焦扫描显微镜在覆铜板行业检测应用

目前覆铜板检测标准以IPC-TM-650为主,检测内容分为:外观、尺寸、电性能、物理性能、化学性能、环境性能六大类。其中外观检测中要求对金属箔面凹坑、划痕、褶皱、针孔、气泡、树脂点等进行检测分析。OLYMPUS LEXT OLS系列激光共聚焦扫描显微镜常用于材料加工表面轮廓与形状的全面三维表征的微米

激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项

激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically prod

激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项

  激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically pr

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。1、极限分

使用激光扫描共聚焦显微镜细胞间通讯的研究

动物和植物细胞中缝隙连接介导的胞间通信在细胞增殖和分化中起着重要作用。 激光扫描共聚焦显微镜可通过观察细胞缝隙连接分子的转移来测量传递细胞调控信息的一些离子、小分子物质。 该技术可以用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用,也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别   激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。  

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别

 激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。   1、极限分辨率不同(放大信号源不同

激光扫描共聚焦显微镜应用细胞间通讯的研究

动物和植物细胞中缝隙连接介导的胞间通信在细胞增殖和分化中起着重要作用。 激光扫描共聚焦显微镜可通过观察细胞缝隙连接分子的转移来测量传递细胞调控信息的一些离子、小分子物质。 该技术可以用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用,也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。1、极限分

激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项

 (1)开启仪器电源及光源:一般先开启显微镜和激光器,再启动计算机,然后启动操作软件,设置荧光样品的激发光波长,选择相应的滤光镜组块。以便光电倍增管(photomultipliertube,PMT)检测器能得到足够的信号结果。使用汞灯的注意事项同普通荧光显微镜。    (2)设置相应的扫描方式:在目

激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项

激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically p

从微区拉曼到现代的激光共聚焦显微拉曼

  拉曼微区探针(微区拉曼)是把显微镜和拉曼光谱联系起来,测得的拉曼光谱具有较高的精确性,可以用来进行表面光谱学研究,发现与组分化学性质有关的表面均一性。  拉曼微区探针的概念最早是由Tomas Hirshfled在1969年提出的。图1给出了第一台成功的拉曼显微镜示意图。它把常规显微镜和配有高灵敏

采用激光共聚焦显微镜可以获取媲美SEM的显微图像

激光共聚焦显微镜可用来观察样品表面亚微米级别的三维轮廓形貌, 也可以测量多种微几何尺寸, 像晶粒度、体积、膜深、膜厚、深度、长宽、线粗糙度、面粗糙度等。激光共聚焦相比于其他测量手段有其独特的优势, 它提高了图片的清晰度, 有很好的景深, 提高了分辨率, 可以进行无接触的三维轮廓测试。在金属材料研发方

采用激光共聚焦显微镜可以获取媲美SEM的显微图像

激光共聚焦显微镜可用来观察样品表面亚微米级别的三维轮廓形貌, 也可以测量多种微几何尺寸, 像晶粒度、体积、膜深、膜厚、深度、长宽、线粗糙度、面粗糙度等。激光共聚焦相比于其他测量手段有其独特的优势, 它提高了图片的清晰度, 有很好的景深, 提高了分辨率, 可以进行无接触的三维轮廓测试。在金属材料研发方

激光共聚焦显微镜原理

在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察 。 同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在 2um 以上时,其影响更为明显。激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照明针孔

激光共聚焦显微镜的原理

  在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察 。 同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在 2um 以上时,其影响更为明显。  激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式采用激光束作光源,激光束经照

激光共聚焦显微镜原理

  在普通宽视野光学显微镜中,整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察。 同时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤其是标本的厚度在 2um 以上时,其影响更为明显。  激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照

激光共聚焦荧光显微镜原理是什么

  激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。  原理: 

LSM光学原理

      LSCM 主要基于共轭焦点技术设计而成,即以激光作为光源,采集时使激光光源、被测样品和探测器处于彼此的共轭位置上。基本工作过程为:光源发射出的激光束经挡板上的照明针孔后形成一个点光源,其射出飞光线经双色反射镜发射后,通过显微物镜聚焦到样品上的一点,该点由光源照射激发出荧光,透过显微物镜和

眼底检查是指什么

  眼底检查主要是检查眼底组织,包括视盘、黄斑、视网膜及脉络膜。常用的眼底检查分为直接检眼镜检查和间接检眼镜检查,或者在裂隙灯显微镜下配置前置镜或者三面镜检查。另外,还可以通过眼底荧光血管造影,吲哚青绿血管造影,共焦激光扫描检验镜检查,光学相干断层成像,视网膜厚度分析仪,共角图像血管造影等检查眼底组

北京市2016年度激光共焦超高分辨显微学学术研讨会

  为推动北京市及周边省市激光共焦超高分辨显微学的进步和发展,提高广大相关工作者的学术及技术水平,促进上述学科在生命科学等领域中的应用和发展,北京理化分析测试技术学会和北京市电镜学会共同决定在2016年3月22日下午13:00-18:00(星期二),在北京市北科大厦举办

北京市2023年激光共焦及超高分辨显微学学术研讨会召开

  2023年4月15日,北京市 2023 年度激光共焦及超高分辨显微学学术研讨会在北京四川龙爪树宾馆成功举办。本次会议由北京理化分析测试技术学会电子显微学专业委员会主办,旨在推动激光共焦超高分辨显微学的进步和发展,提高广大相关工作者的学术及技术水平,促进激光共焦超高分辨显微学在生命科学等领域中的应

共聚焦显微镜的基本原理

传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形

激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning Confocal Microscopy ,简称LSCM)是近代生物医学图像仪器的最重要发展之一,它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,以及在亚

材料分析及外观检查金相显微镜都可以实现吗?

作为一种微观形态学工具,光学显微镜在工业测试方面的应用,目前主要大家比较熟悉的主要是以下方面:首先,单独作为形态学工具,进行材料组织分析和外观缺陷检查,其典型的产品是金相显微镜和立体显微镜。第二、光栅量测结合,进行部件的精密尺寸测量,其典型的产品是工具显微镜,测量显微镜。近年来,随着计算机软件技术的

Renishaw拉曼光谱仪各结构的特点介绍

  1、CCD探测器  使用标准(532nm)和红外增强(785nm)CCD探测器,采用半导体制冷型一英寸CCD,1024*256像素,制冷温度-70°C,像元尺寸≤26*26μm,光谱范围200-1050nm,量子效率峰值≥92%。计算机控制激光衰减片,共16级,从0.000005到100%,以方

激光共聚焦显微镜的优势是什么

  激光扫描共聚焦显微镜与传统宽场显微镜相比,具有高清晰度、高分辨率、高灵敏度等特点,在生物医学领域应用广泛,成为了该领域重要的成像工具。为什么共聚焦能得到如此多的宠爱,它又有哪些优势呢?本文列举了三方面来论述共聚焦的优势。  只收集焦平面上的信号,使图像由模糊变清晰   图一是花粉颗粒的自发荧光图