激光扫描共焦显微镜技术
l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文
2016年激光共焦超高分辨显微学学术研讨会在京召开
分析测试百科网讯 2016年3月22日下午,北京市2016年度激光共焦及超高分辨率显微学学术研讨会在北京市北科大厦举行。会议由北京理化分析测试技术学会和北京市电镜学会共同举办,旨在推动北京市及周边省市激光共焦超高分辨显微学的进步和发展,提高广大相关工作者的学术及技术水平,促进
雷尼绍中标海关总署4台激光显微共聚焦拉曼光谱仪
分析测试百科网讯 近日,海关总署2019年激光显微共聚焦拉曼光谱重新招标采购项目评标工作已结束,此次采购共计4台,中标品牌:雷尼绍 规格型号:inVia Qontor,中标总金额:990.87 万元(人民币),用于矿产品、金属氧化物、废塑料、冶炼渣、矿灰、废催化剂、废皮革、废纺织原料、危险废物等
激光扫描共聚焦荧光显微镜的辅助设备
风冷、水冷冷却系统及稳压电源。 激光扫描共聚焦显微镜的基本工作原理是首先由激光器发射的一定波长的激发光,光线经放大后通过扫描器内的照明针孔光栏形成点光源,由物镜聚焦于样品的焦平面上,样品上相应的被照射点受激发而发射出的荧光,通过检测孔光栏后,到达检测器,并成像于计算机监视屏上。这样由焦平面上样
显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰
虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的
激光显微镜的技术特点
荧光标记的特异性及可定量性。共聚焦针孔的运用,有效的消除了焦平面上下散射光,提高轴向分辨率。点光源激光的应用,对荧光素能达到有效的激发,激发的特异性高,降低对荧光的淬灭,增强侧向分辨率。双光子的应用,相对较低平均功率的红外激发,大大减低对活细胞的损伤;荧光激发高度聚焦在焦点处,可避免了焦点以外的光漂
激光显微镜的技术优点
荧光标记的特异性及可定量性。共聚焦针孔的运用,有效的消除了焦平面上下散射光,提高轴向分辨率。点光源激光的应用,对荧光素能达到有效的激发,激发的特异性高,降低对荧光的淬灭,增强侧向分辨率。双光子的应用,相对较低平均功率的红外激发,大大减低对活细胞的损伤;荧光激发高度聚焦在焦点处,可避免了焦点以外的光漂
量子图像扫描显微镜-实现超小尺度显微显示
远场光学显微镜的分辨率受阿贝衍射极限的制约,其极限分辨率约为可见波长的一半,阻碍了远场光学显微镜在超小尺度的生命科学研究中的应用。随着探测技术的持续快速发展,利用量子超分辨率显微镜和图像扫描显微镜(ISM)来克服衍射极限,从而实现超小尺度显微,逐渐成为研究热点。量子光学原理超越了光学显微镜中灵敏
共聚焦扫描仪的原理
激光扫描共聚焦扫描仪的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下
共聚焦扫描仪的原理
激光扫描共聚焦扫描仪的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下
光学显微镜主要有哪几大类
一、普通光学显微镜普通光学显微镜主要由以下几个部分组成,分别是照明系统,其中涉及到了光源和聚光器;光学放大系统,它是由物镜和目镜组成的,是显微镜中最关键的部分,在设计时为了避免产生过大的球差和色差,所以目镜和物镜都由复杂的透镜组构成。二、激光共聚焦扫描显微镜激光共聚焦扫描显微镜听起来仿佛特别的高大上
共聚焦显微镜之转盘式扫描与单点扫描的区别
共焦显微镜从产生至今获得了巨大的发展,扫描方式从最初的狭缝扫描方式(扫描速度较快,图像分辨率不高),到阶梯式扫描技术(提高了图像分辨率,标本制备要求太高),再到驱动式光束扫描器(扫描速度较快,符合共聚焦原理)。至今又产生了新的类型,如针孔阵列盘式(简称转盘式)激光共聚焦显微镜。 转盘式激光共聚焦
共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值
pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S
激光扫描共聚焦荧光显微镜的缺点
标记染料的光漂白:为了获得足够的信噪比必须提高激光的强度;而高强度的激光会使染料在连续扫描过程中迅速褪色。 光毒作用:在激光照射下,许多荧光染料分子会产生单态氧或自由基等细胞毒素。限制扫描时间、激发光强度,以保持样品的活性。
激光共聚焦扫描显微镜基本组成、特点
一、激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦
激光扫描共聚焦显微镜光学成像原理
光学成像原理 LSCM 主要基于共轭焦点技术设计而成,即以激光作为光源,采集时使激光光源、被测样品和探测器处于彼此的共轭位置上。基本工作过程为:光源发射出的激光束经挡板上的照明针孔后形成一个点光源,其射出飞光线经双色反射镜发射后,通过显微物镜聚焦到样品上的一点,该点由光源照射激发出荧光,透
激光共聚扫描显微镜的应用领域简介
激光共聚焦显微镜系统应用领域: 涉及医学、动植物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。 应用范围: 细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网
共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值
pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S
激光共聚焦扫描显微镜基本组成、特点
一、激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦
激光扫描共聚焦荧光显微镜的优点
激光扫描共聚焦荧光显微镜相对普通荧光显微镜的优点 (1):LSCM的图象是以电信号的形式记录下来的,所以可以采用各种模拟的和数字的电子技术进行图象处理:(2)LSCM利用共聚焦系统有效的排除了焦点以外的光信号干扰,提高了分辨率,显著改善了视野的广度和深度,使无损伤的光学切片成为可能,达到了三维
激光扫描共聚焦荧光显微镜的缺点
标记染料的光漂白:为了获得足够的信噪比必须提高激光的强度;而高强度的激光会使染料在连续扫描过程中迅速褪色。 光毒作用:在激光照射下,许多荧光染料分子会产生单态氧或自由基等细胞毒素。限制扫描时间、激发光强度,以保持样品的活性。
共聚焦显微镜原理
从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。共焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(Beam
共聚焦显微镜(1)简介
共焦显微镜[ConfocalLaserScanningMicroscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(BeamSplitter),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(Pinhole)的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个光电倍增管(pho
双光子共聚焦显微镜
双光子共聚焦显微镜是为了解决生物检测中样品染料标记的光漂白现象而提出的,因为共焦孔径光阑必须足够小以获得高分辨率的图像,而孔径小又会挡掉很大部分从样品发出的荧光,包括从焦平面发出的荧光,这样就要求激发光必须足够强以获得足够的信噪比;而高强度的激光会使荧光染料在连续扫描过程中迅速褪色(即光漂白现象),
青少年型青光眼的检查介绍
青少年型青光眼的检查方法:超声生物显微镜的应用青年:该项技术可在无干扰自然现任状态下,对活体人眼前段的解剖结构及生理功能致力进行动态和静态记录,并可作定量测量特别每天对睫状体的形态周边虹膜后房形态及生理病理变化进行知名实时记录为原发性闭角型青光眼,多例特别是原发性医学慢性闭角型青光眼的诊断严格慢
显微共焦拉曼光谱仪的功能
显微共焦拉曼光谱仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2005年09月01日启用。 1技术指标 激光器波长:514nm,325nm,785nm拉曼位移范围:100~4000cm-1显微尺寸范围:≤1μm光谱范围:300~1000nm光谱分辨率:≤1cm-1带有微区装置,具有微探针功能,可以对微小
超分辨荧光显微镜和普通荧光显微镜的区别
两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下: 一、荧光显微镜 1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
两者在工作原理及应用方面存在不同。分述如下: 一、荧光显微镜 1、荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光
扫描探针显微镜的技术特点
SPM作为新型的显微工具与以往的各种显微镜和分析仪器相比有着其明显的优势:首先,SPM具有极高的分辨率。它可以轻易的“看到”原子,这是一般显微镜甚至电子显微镜所难以达到的。其次,SPM得到的是实时的、真实的样品表面的高分辨率图像。而不同于某些分析仪器是通过间接的或计算的方法来推算样品的表面结构。也就
扫描探针显微镜的技术特点
SPM作为新型的显微工具与以往的各种显微镜和分析仪器相比有着其明显的优势:首先,SPM具有极高的分辨率。它可以轻易的“看到”原子,这是一般显微镜甚至电子显微镜所难以达到的。其次,SPM得到的是实时的、真实的样品表面的高分辨率图像。而不同于某些分析仪器是通过间接的或计算的方法来推算样品的表面结构。也就
激光共聚焦扫描显微镜与传统光学显微镜的对比
共聚焦显微镜之所以能很好地克服传统的光学显微镜景深低的问题,主要是因为传统的光学显微镜使用面光源将光斑中的样品同时激发,当放大倍率增大,光学系统景深降低时,就会有很多未聚焦的信号被采集,导致无法在整个视野内得到清晰的图像。而共聚焦显微镜使光源前的针孔与检测器前的针孔形成共轭,因为只有靠近焦平面的信号