微生物检测过程中的问题及解答
1、金黄色葡萄菌检测第二法，从典型菌落中任选5个，是从一个平行样中选5个还是5个平行样加起来选5个？答案：从符合计数范围的稀释度三个平行样中任选五个做血浆凝固酶试验。 2、微生物回收采用涂布法时，试验组1ml含菌量不大于100cfu。涂布时取供试液0.2ml，含菌量会不会太少，不利于计数？答案：涂布法回收准备工作是取隔夜培养物0.2ml，进行梯度稀释，大概稀释到10的6次方可以达到100cfu/ml，然后分别取0.3，0.3，0.4ml进行涂布，也可以前后两个梯度均进行334涂布。3、哪些奶粉需要检测阪崎肠杆菌，依据的标准是什么？答案：一段婴幼儿奶粉都需要，企业为保证其质量，因此会制定内部质量控制标准或规定对其相关原辅料，包装材料以及直接接触面等进行检测，当然包括奶粉量勺等。具体依照GB 10765-2010。 4、在进行煮沸灭菌培养基配置过程中如何避免液体喷洒出来被烫伤的情况，有什么好的灭菌方法，......阅读全文
关于多肽纯化的问题解答
1. 多肽含量与多肽纯度有什么区别? 一条多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质，多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量，不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量，一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此一条多肽即使纯度达到99
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)10
UUU. 怎样才能把胶跑的非常漂亮，泳道和band都能很直，是不是上样的量很重要，罐胶有什么技巧吗？想跑漂亮，是不是应该先小电压，再高电压，总体上电压小些会跑的好些?还有前面有人说电泳液平玻璃板会使电泳条带漂亮些? 解答：影响跑胶跑的质量，有以下几个因素：1、电压，小的电压会使胶的分子筛效
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)2
四、主要步骤 生物秀为您搜集了现阶段几乎网上所有的Western Blot的中英文资料，仅供实验参考，可以根据自己实验的实际情况进行调整： Western Blot PROTOCOL： 点击查看所有相关文章 五、 实验常见的问题指南 根据问题的类型主要分成以下几类（以
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)6
YY. 加甲醇的目的是什么？解答：加甲醇起着一定的固定作用，因为小分子蛋白质容易转出去.(特别是在硝酸纤维素膜上，因为NC膜结合蛋白质的能力较弱)。ZZ. “转膜后的脱脂奶粉封闭液是5%的TBST脱脂奶粉”，其中TBST最后那个T是Tween吗，浓度多大？解答：是Tween，配方如下:Tris-Bu
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)4
HH. 跑电泳的时候配的胶总是“缩”是什么原因呢？是有的成分不对吗？ 解答：没什么问题，就是你胶里的水分被蒸发了。过夜时拿保鲜膜包起来，在里面加点水保持湿度就可以了。如果过夜，胶里的水分被蒸发，采用保鲜膜包上也可以；也可能母液（30%聚丙酰胺）有问题，你可以重新配制一份观察；能够替换的试剂，尽量
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)1
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、 分类i.放射自显影ii.底物化
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)5
NN. 用的是Roche molecular Biochemicals公司的由100kd，75kd，45kd，30kd，20kd，10kd组成的marker。开始做Western Blot时还能够看到marker，当然也仅能看见其中最多三条带。用80V进行SDS-PAGE电泳，用恒压10V4
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)8
EEE. 电泳用的是恒流，一块胶，20mA，100分钟左右。转膜也是恒流，38mA，100分钟。而且我用别人的细胞和一抗在我的整个反应体系下做出来了，当然彼此的目的蛋白不同。所以，我想问题应该出在抗原和一抗上，不知对不对。 解答：电泳的条件：样品的分子量决定了胶的浓度，一般使样品跑至胶的中部即可
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)7
CCC. Western Stripping Buffer的配方解答：METHOD11、stripping buffer: 62.5mmol/l Tris PH6.7；100mmol/l beta-mercaptoethanol；2%SDS二次发光protocol:1.stripping buffe
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)9
MMM. 磷酸化抗体的检测样本制备时是否一定要加NaF等？ 解答：NaF是一种广谱磷酸化酶的抑制剂，一般最好加。但是不加也可以，大部分时候是不用加的。我做的时候从未加过，都做出来了。 NNN. Western Blot中block的最短时间? 解答：每一步1小时足够了， 中间换抗体
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)11
11. 结果分析 CCCC. 条带有时清晰，有时很散，不知为何？ 解答：可能原因：样品可能存在降解；转膜不及时造成扩散；转移缓冲液甲醇浓度（ＮＣ膜可加到２０％，ＰＶＤＦ加到１５％）。 DDDD. 显色目的条带又细又浅，靶蛋白是27KD的bcl-xl和67KD 的c-myc
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)3
P. 有什么方法可以提高上样量？ 解答：可以浓缩样品；增大上样体积来增大上样量。 Q. 我要检测的目的蛋白是分子量大概为42kd的膜蛋白，膜蛋白提取可不可以不用到超速离心机，有没有直接用低温高速离心机就可以的提到膜蛋白的方法，42kd的蛋白分子量算不算大？ 解答：如是需要提取膜蛋白
微生物检测及实验室质量管理相关问题整理
微生物检测是运用微生物学的理论与方法，检验食品中微生物的种类、数量、性质及其对人的健康的影响，以判别食品是否符合质量标准的检测方法。 问：3M纸片法为何从标准中取消？ 答：1.3M有SN/T标准应用方法 2.SN/T前言，每一个aoac的3M有特定范围，而SN/T的范围扩大到“食品” 3
投加微生物絮凝剂的过程中要注意哪些问题？
在投加微生物絮凝剂的过程中，需要注意以下几个问题：投加前的搅拌：确保微生物絮凝剂在投加前充分搅拌均匀，避免出现浓度不均的情况。投加点的选择：选择合适的投加点，以保证微生物絮凝剂能够均匀地分散在处理体系中，充分与污染物接触。投加顺序：如果同时使用其他药剂，需要注意投加顺序，避免相互干扰。控制投加速度：
气质常见问题解答
包括常见的气质问题和MSD质谱通讯中断问题 气质常见问题解答
移液器常见问题与解答大全
移液器是实验室里面最长使用的实验仪器之一，基本上每一个实验室人员都曾经或现在使用过移液器，因而也会遇到移液器使用时的一些问题。笔者总结归纳了移液器使用时常见的问题与解答大全，希望对于大家有所帮助：移液器使用时常见的问题与解答大全：问题可能原因提议移液器渗漏多道移液器吸嘴里不均衡的液体水平·吸嘴与移液
液氮温度各项问题解答
液氮自身的温度就很低吗?还是只需汽化吸热时咱们才干感觉它温度低?有人说冰是否自身温度就很低，打个比方吧：把室温的水装在一个彻底*热的容器里不断加压，直到压成固体的冰。在这个过程中由于与外界没有热传递，只需做功，而一般来说对物体做功，物体的温度是上升的。你说那个冰还是*度吗?······对待新事物，人
浓缩仪常见问题与解答
1、样品浓缩仪与氮吹仪的区别？答：样品浓缩和氮吹仪都是用氮气来进行吹扫，只是各厂家的命名不一样。2、如何能让实验速度更快、效率更高？答：样品浓缩仪的原理是通过提高样品的温度，使样品的溶剂在无氧状态下进行挥发，从而快捷高效的达到浓缩的目的。影响实验速度的原因有两个：1）加热的温度。2）气体的流量及气体
SWATH技术常见问题与解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX（全球领先的生命科学分析技术公司）的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术，科学家有史以来首次可
细胞常见问题解答
1.原代细胞与细胞系有什么区别？ 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
SWATH技术常见问题与解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX（全球领先的生命科学分析技术公司）的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术，科学家有史以来首次
快速水份仪问题解答
题:在开启后显示保持黑屏。答:可能的原因有：无电压；未连接电源线；保险丝熔断；仪器损坏。 题:测量时间过长。答:可能是选择了的关闭模式不合适。请尝试更换一种合适的关闭模式。 题:仪器在开始测试后不能加热。答:可能干燥单元过热导致热过载保护功能启动。为了安全操作，仪器配备双重过热保护：干燥单元拥有热过
qPCR－常见问题解答
通常来讲，real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样，要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80～150 bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断 PC
电子天平问题解答
电子天平开启常见问题解答1.开启问题：开启后完全无显示：（1）电源插座上没有220V电流接通交流电座；（2）交流适配器出错，选择适合我国工作的220V~交流适配器（外接变压器）；AB-S/A8-1.4v~50/60HZ6VA；PB-S/A9.5-20VDC6W；AB/PB/GB9.5-14.5V50
抗体常见问题解答
常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验方法？
关于消泡剂选择问题解答
问：我的水性化产品，遇到泡沫问题了怎么办？答：请根据您的行业，选择适合消泡剂产品。问：消泡剂的种类有哪些？应用领域是什么？答：常见的消泡剂种类有：1、天然油脂（即豆油、玉米油、矿物油等）来源容易，价格低，使用简单；常用于乳液合成，低端胶黏剂，内外墙涂料，金属加工液等；2、炔二醇系列消泡剂分子型消泡剂
液氮温度各项问题解答
液氮自身的温度就很低吗?还是只需汽化吸热时咱们才干感觉它温度低?有人说冰是否自身温度就很低，打个比方吧：把室温的水装在一个彻底*热的容器里不断加压，直到压成固体的冰。在这个过程中由于与外界没有热传递，只需做功，而一般来说对物体做功，物体的温度是上升的。你说那个冰还是*度吗?······对待新事物，人
抗体常见问题解答
Q&A 常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验
金标法快速检测试剂常见问题解答
超过了判读时间结果还准确吗？结果不准确，应按照说明书规定的时间判读。如果到判读时间为止，结果为阴性，判读时间以后，出现淡淡的线条，可能是有色标记物持续释放造成的，但是这种结果是无效的。使用冰箱保存的标本和产品，应该注意什么？若标本、试剂、缓冲液冷藏后，检测前应把冷藏过包装完好的检测试剂、缓冲液放置空
金标法快速检测试剂常见问题解答
超过了判读时间结果还准确吗？结果不准确，应按照说明书规定的时间判读。如果到判读时间为止，结果为阴性，判读时间以后，出现淡淡的线条，可能是有色标记物持续释放造成的，但是这种结果是无效的。使用冰箱保存的标本和产品，应该注意什么？若标本、试剂、缓冲液冷藏后，检测前应把冷藏过包装完好的检测试剂、缓冲液放置空