细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。 二、取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定)，经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织与分化高相比之下，分化程度低的组织的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要......阅读全文
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。 二、取
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。 二、取材
细胞培养方法
1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。因路途耽搁等因素，细胞会有部分脱落。请在超净台中将培养瓶里的培养基吸出一部分，保留大约5-6ml左右在培养瓶里。将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以
细胞培养方法
细胞培养方法：1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;2.无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净,紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;3.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1、取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
细胞培养常规方法
. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞
细胞培养概念和方法
细胞培养（英语：cell culture）是一种现代生物学技术，是将真核生物或原核生物细胞培养在受控制的状态下，使其生长。这项技术的发展与方法，与组织培养或器官培养关系密切。细胞培养的例行步骤包括解冻细胞、换盘、分盘、换细胞培养液、结冻细胞等步骤。细胞培养分为两大类：贴壁培养（adherent cu
神经胶质细胞培养方法
神经细胞（神经元）不易培养，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子时，可出现一定程度的分化，长出突起等现象，但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养，不仅能获得生长的胶质细胞，也可形成能传代的二倍体细胞系。一
神经胶质细胞培养方法
神经细胞（神经元）不易培养，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子时，可出现一定程度的分化，长出突起等现象，但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养，不仅能获得生长的胶质细胞，也可形成能传代的二倍体细胞系。一
细胞培养基本方法
= 细胞培养基本方法 = (一)准备和安装过滤器 (二)合成培养基的配制 (三)小牛血清的处理 (四)生长培养基的配制(五)冻存细胞的复苏 (六)传代 (七)冻存 (八)注意事项 (一)准备和安装过滤器 清洗好过滤器，干燥，放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜，用布包装好，
动物细胞培养方法
体外培养的动物细胞可分为原代细胞与传代细胞。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞，进行传代培养后的细胞即称为传代细胞。 任何动物细胞的培养均需从原代细胞培养开始。动物很多组织的细胞，如幼年动物的肾、肺、卵巢、精巢、肌肉及肿瘤等组织的细胞较易培养，而神经细胞等则较难培养。原代细胞培养步骤如下：首先取
细胞培养基本方法
一)准备和安装过滤器 清洗好过滤器，干燥，放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜，用布包装好，15磅20 min进行高压灭菌处理。 在超净台内打开过滤器架好，胶管一端接入滤泵再插入待除菌的液体中，出口端胶管深入到已消毒好的瓶子中。用泵过滤，过滤后要检查滤膜是否完好无损。 (二)合成培养基的配制 1、根
细胞培养基础——处理方法
一、 贴壁细胞接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片， 显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的) 。严格无菌操作，打开细胞培养瓶。将细胞培养瓶内的培养基用吸管完
平滑肌细胞培养方法
贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM（美国Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），链霉素（100mg/ml），优质胎牛血清（原代培养浓度20%，传代培养浓度10%，美国Hyclone）。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶（Cost
细胞培养的基本方法（二）
第四节 细胞计数及活力测定一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分
原代细胞培养方法有哪些
你主要要原代培养那种细胞，不同的细胞方法肯定不同。如一般悬浮细胞，如血液细胞，就分离后，直接培养。培养组织中的细胞，就需要消化过后，进行培养。也有用组织块培养的
细胞培养的方法有哪些
轻轻吹打,可先离心（1000rpm. 2,如要高浓度或需更换新培养基,新鲜培养基重悬沉淀,置培养瓶内轻轻摇晃: 1,吸的越干净越好,(根据配制强度经验),镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后. 一,然后收集离心（1000rpm 5min左右）,50ml培养瓶加入消化液约0；也可复苏当时离心（1000rpm
固定细胞培养的技术方法
中文名称固定细胞培养英文名称fixed cell culture定 义将植物悬浮细胞包埋在多糖或多聚化合物（如聚乙烯）制成的网状支持物中进行无菌培养的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
巨噬细胞培养操作方法
巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2－3周，多用做原代培养，难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系，大多来自小鼠，如P331、 S774A.1、RAW309Cr.l
悬浮细胞培养方法求心得
悬浮细胞一般几天离心一次，觉得好难养啊！求心得？丁香园网友goingba认为：你养的是什么细胞，原代吗？我觉得悬浮细胞最好养了，不用消化，关于几天离一次心，要看你的细胞生长状态了，我养过血液肿瘤细胞，增值比较快，我一般是第二天半量换液（加等量培养基后一分二），第三天若长得比较满，就离心换液。若你不想
常用原代动物细胞培养：肝星状细胞培养材料和方法
材料 相差显微镜，荧光显微镜，手术器械，雄性SD大鼠，体重250-450 g，戊巴比妥钠，200目尼龙网，小牛血清（或胎牛血清，则更好），DMEM，胰酶消化液（以HBSS配），Nycodenz（以GBSS配），D- Hanks'（KCl 0.4 g/L，KH2PO4 0.06 g
干细胞培养传统方法受质疑
人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的，据认为，这可为细胞提供必需的营养物质，并有助于防止细胞分化。最近，一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。延伸阅读：更安全的干细胞培养新方法。 众所周知，干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样，它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的
干细胞培养器皿的清洗方法
干细胞离体条件下，有害物质可直接与细胞接触，细胞对任何有害甚至有益的物质十分敏感，极少量残留物就会对细胞产生毒性作用。因此，新的或重新使用的器皿都必须认真清洗，使其达到不含任何残留物的要求。因不同培养器皿的材料、结构、使用方法不同，清洗的方法也有区别．现分别介绍如下。1．玻璃器皿的清洗，玻璃器皿的清
细胞培养污染拯救及预防方法
（一）污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。1、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗菌素，也可能因为操作不慎而引起污染。-常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、
细胞生物基本方法：肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除（成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长，致难以纯化肿瘤组织）。有以下一些方法：1．机械刮除法2．反复帖壁法3．消化排除法4．胶原酶消化法 1） 机械刮除法1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入
细胞培养污染拯救及预防方法
概论§ 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§ 一开始就要十分重视，防止污染，否则会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。（一）污染的类型§ 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质
平滑肌细胞培养方法4
动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源，由于细胞并非直接获得，而是从组织块边缘长出，其中有一“突破过程”，且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖，故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将