PC12细胞培养方法步骤
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规则。这两种细胞没有很大的区别,但我在实验中发现,未分化型的PC12细胞对药物的敏感性较之分化型的要差一些。2. 由于PC12细胞是一种肿瘤细胞,在传代次数较多后,它的形状和性状会发生改变。这些改变尤见于未分化型PC12细胞。主要是细胞形状变得更加不规则,对药物的敏感性愈加下降。因此,建议长期用PC12细胞作实验的战友最好严格控制细胞的传代次数。3.在复苏细胞时动作一定要迅速,放入温水中1~2min后要马上加入培养液中,培养12~24小时后更换一次培养液,这样不仅可以把DMSO吸掉,而且可以将死亡的细胞也吸掉。细胞一天一看即可,经常......阅读全文
PC12细胞培养
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规
PC12细胞培养方法步骤
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形
PC12细胞培养所用血清问题
问:我正准备购买上海细胞所的未分化的PC12细胞,需要灭活的马血清,可现在买血清很困难,好像是海关有封锁,代理商这么说的,我原定购买的Gibco的horse surum,现在无法买到了,好容易找到一个目前可以进血清的公司Hyclone,有一种Donor Equine serum是马血清吗?答:H
PC12-Cell-Culture-and-Fusion
Cell CultureMaterials1. Falcon Primaria culture dishes.2. Culture medium: DME (or F12K) with glutamine, supplemented with 7% heat-deactivated horse se
45Ca2+-uptake-study-in-PC12-cells
45Ca2+ uptake study in PC12 cells 1. Plate the cells on to the poly-D-Lysine-coated six well plates 2 days prior to study. 2. Rinse the cells with 1 m
黄芩苷可有效抑制硫酸粘杆菌素的神经毒性
100 μg/mL黄芩苷预处理显著减少硫酸粘杆菌素诱导的细胞核固缩和DNA片段化现象 从干燥的黄芩根中提取的黄芩苷具有抗氧化、清除氧自由基等的药理作用,研究显示其对β淀粉样蛋白诱导神经元损伤也有保护作用,但硫酸粘杆菌素作为一种抗生素在临床应用中存在神经毒性问题。东北农业大学蒋红博士所在团队想通
抑郁症的体外模型
抑郁等精神疾患的发生可能与过量GC对海马的选择性损伤有关,但机理不明,Heuser和Cosi等报道可能是由于高浓度GC导致神经营养因子表达水平降低造成的,而抗抑郁剂不仅使GC受体上调,HPA轴反馈恢复正常,而且使神经营养因子表达升高,达到治疗目的.PC12细胞株为大鼠嗜铬细胞克隆化细胞株,分化的PC
二十碳五烯酸对大鼠海马体突触可塑性、不饱和脂肪酸...
二十碳五烯酸对大鼠海马体突触可塑性、不饱和脂肪酸综合表现和磷酸肌醇3-激酶信号表达及对PC12细胞分化之影响安慰剂对照临床研究表明, n-3多不饱和脂肪酸 (n-3 polyunsaturated fatty acids)能改善神经系统疾病 - 如阿尔茨海默氏病,亨廷顿氏症和精神分裂症等。为了评
苏州大学最新文章探寻碳纳米管与蛋白质相互作用
由于碳纳米管本身具有诸多优异的物理化学性质, 已经在生物学和医学领域展现出潜在的应用前景。 从纳米科技的长期发展而言, 碳纳米管的安全应用及其潜在的毒理学评价显得非常重要。 众所周知, 碳纳米管用于载药、诊断或成像等生物医学领域时, 会与生物体内的各种蛋白质产生相互作用, 进而会改变碳纳米管自身
五味子属植物或可治疗神经系统疾病
近日,中科院昆明植物研究所罗怀容和孙汉董研究组合作发现,五味子属三萜类化合物的神经药理活性,可促进脑源性神经营养因子的表达,为该化合物的生物活性研究提供了新思路。研究成果在线发表于《民族药理学》杂志。 五味子属植物除含有丰富的木脂素类化合物外,还含有结构多样的三萜类化合物,如尼哥纳乐酸等,
铁中毒可致糖尿病周围神经细胞病变
有研究表明,铁螯合疗法对糖尿病周围神经病变有显著疗效。为探讨铁超负荷对糖尿病周围神经病变影响的机制,中国武汉市中心医院赵湜教授领导的团队进行了一项研究。将PC12细胞暴露于高浓度葡萄糖作为糖尿病周围神经病变的体外细胞模型,培养时加入枸橼酸铁铵来创建铁超负荷,加入去铁胺来降低铁含量。高浓度葡萄糖下
细胞株的传代与培养
培养细胞株传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长细胞如COS-7、CHO等用消化法传代;部分贴壁生长的细胞如PC12用直接吹打即可传代。 一、用品 (1) 0.25%胰蛋白酶,全培养液 (2) 滴管,离心管,培养瓶(皿),培养瓶盖,注射器,计数6 二、步骤 (1) 贴壁细胞的消化法
体外荧光法检测核内体早期动力学4
Top of pageProcedureOverviewSteps 1 - 8 Preparation of rat brain cytosolSteps 9 - 10 Culture of PC12 cellsSteps 11 - 30 Preparation of postnuclear sup
为什么有的细胞消化以后容易相互聚集
个人认为是消化程度的问题。如果胰酶处理过度,细胞就会吹不散,形成絮状。原因是胰酶作用于细胞膜蛋白,过度处理引起细胞膜破裂,破裂细胞的DNA粘连在一起。---------最近培养PC12的时候也遇到细胞聚集的问题,我查了一些资料,有些细胞就是这样的,容易聚集成团,消化之后一定要吹匀。消化时用低浓度的胰
针对特定细胞选择更有效的实验步骤
GenJet Ver.II,LipoD293及PolyJet针对哺乳动物细胞的DNA体外转染试剂,均为您提供两种不同的转染步骤——一般步骤及高级步骤,这两种步骤分别针对不同的哺乳动物细胞。高级步骤主要针对难转的哺乳动物细胞,例如:MDCK,MDA-MB231,Caco-2等细胞。使用一般的转染步
假人参的药理作用
抗氧化作用 张健经对假人参叶和根中抗氧化成分的含量和活性的研究分析,并分别对维生素C、可溶性糖、POD、CAT、GSH一PX等含量进行了量化分析,得出其根部的总抗氧化能力较高。SOD活性较高,总抗氧化能力较强,具有一定的开发利用价值。[5] 神经营养 冉靓通过诱导大鼠嗜路神经瘤PC12细胞
常用细胞凋亡检测方法(图)3
过氧化物酶标记测定法原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色
我国科学家在人源蛋白质三维结构研究中获得新突破
(A) 人源LanCL1三维结构的主链飘带示意图. 外围螺旋和内层螺旋分别显示红色和黄色. (B) 人源LanCL1的表面电势图. 球棍模型表示结合的谷胱甘肽. (C) 显示经过空pBI/eGFP vector或LanCL1野生型或各种突变体转染的PC12细胞用50 ng/
无血清培养基基本配方
1、基本适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞 葡萄糖 0.6% 谷氨酰胺 2mM NaHCO3 3mM Hepes 5mM 胰岛素 2.5mg/ml 转铁蛋白 100ng/ml 孕 酮
无血清培养基一些基本配方
PriCells-无血清培养基一些基本配方 1、基本适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞 葡萄糖 0.6% 谷氨酰胺 2mM NaHCO3 3mM Hepes 5mM 胰岛素 2.5mg/ml 转铁蛋白
吖啶橙的基本信息介绍
简称:AO AO能与无机酸形成盐,具有绿色荧光。如果再稀释的话,便水解成游离的AO,而呈现紫色荧光。 吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB): (1)细胞爬片:在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片,接种细
BTG-family-proteins-and-cell-cycle-regulation
BTG2 is found to be one of the immediate early genes up-regulated by neural growth factor (NGF) and epidermal growth factor (EGF). Its transcriptional
Aβ相关乙醇脱氢酶阻断肽可减轻神经细胞的氧化应激损伤
倒置相差显微镜观察发现rAAV/ABAD-DP-6His能明显改善过氧化氢损伤的PC12细胞的形态 在阿尔茨海默病中,Aβ与Aβ相关乙醇脱氢酶结合损伤了线粒体功能,因此阻断Aβ与Aβ相关乙醇脱氢酶结合至关重要。来自中国吉林大学第一医院吴江博士所带领的团队构建了能够持续分泌表达Aβ相关乙醇脱
Aβ损伤模型
取出生1-2d的乳鼠,用麻醉剂处死。在D-hanks液中取大脑并分离海马组织,胰蛋白酶消化,获得细胞悬液,胎盘蓝染色进行死活细胞记数,将细胞以5×105/ml的密度接种于预先经L-多聚赖氨酸处理的96孔和24孔培养板,其中24孔板中预先放置有盖玻片。细胞维持在培养液中,置入5%CO2,饱和湿度的培养
细胞培养多长时间时加药再提蛋白最好
每个细胞都不一样,一般是细胞长到80%的时候可以铺板你可以先做个生长曲线,确定最佳的铺板密度和生长时间,比如PC12就加药6小时就行,而Sao-2需要48小时,一般你可以试试培养12小时你是一次性把细胞接种到6孔板或12孔板中吧做药物时间实验, 一般采取"倒叙法". 假设要检测0到72小时药物处理的
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中科大施蕴渝院士JBC发表新成果
6月15日,国际学术期刊《Journal of Biological Chemistry》在线刊登了中国科技大学的一项研究成果,题为“Structural Basis for the Specific Recognition of RhoA by the Dual GTPase-activati
用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(二)
评价化合物对心机细胞毒性的作用评价心肌细胞毒性影响,使用各种不同的心肌细胞毒性化合物处理 24 小时,然后活细胞通过 Hoechst 核染料分子标记后,MitoTracker Orange 染料标记和 AF-488 连接的鬼笔环肽染料来检测细胞骨架的完整性。利用 ImageXpress Pi
胚胎干细胞培养技术大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN
如何寻找外泌体中可评估mTBI患者神经退行性病变和细...
如何寻找外泌体中可评估mTBI患者神经退行性病变和细胞毒性的标志物创伤性脑损伤(TBI)是全球性的公共卫生问题。由于缺乏良好的诊断工具和干预手段,TBI患者数量被严重低估,尤其是在体育运动员和军人群体中。目前TBI的诊断方式只有昂贵的神经影像技术和脑脊液(CSF)检测。轻度创伤性脑损伤(mTBI)更