病毒的超低温保存法
大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围最广的微生物保存法。需要复杂营养的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力( 如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。超低温的冷冻保护剂不同于冻干法所用的冷冻剂。ATCC 常用一种由甘油(10%)、二甲亚砜(5%)和培养液制成的混合剂保存多数的细胞株。这些化学试剂进入细胞内可避免内膜的冷冻损伤。贮存在低温容器内的细胞复苏时必须小心操作。当小管被加热时,所形成的冰晶会将细胞杀死,正确操作就可避免这种事故。只要迅速将样品解冻就能减少活力的丢失,做法是:将封口的小管迅速放入37℃的水中,直至所有的冰融化,然后打开管口,将内容物移入培养基。超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常......阅读全文
细胞融合技术仙台病毒法融合法
①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0一8.2;③细胞膜连接部穿通,周边连接部修复,此时需Ca2+和ATP;④融合成巨大细胞,仍需ATP。
昆明植物所种质资源库在植物超低温保存机理研究方面获进展
原文地址:http://www.cas.cn/syky/202104/t20210406_4783734.shtml 超低温保存是在液氮(-196℃)中保存细胞、组织和器官的技术,广泛应用于动物、植物和微生物种质资源的长期保存。植物超低温保存通常与离体培养技术相结合,可以实现花粉、愈伤组织、
聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验
实验方法原理 这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物,相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒,其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒,而且对病毒的结构和抗原性有
超低温冰箱冰柜的5大问题
大家都知道,任何一个生产商生产的任何产品,在外销出库前,一定会经过多道工序的检测直至没有任何问题才会出库;超低温保存箱也是如此,一般超低温保存箱在出厂之前都是要经过12小时以上的调试才可以发货的,那么超低温保存箱在使用过程中又需要注意些什么问题呢?下面就一起来看看吧!一、运输、存放注意事项1.从车上
病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养
实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合
关于登革病毒的微生物学检查法
大多数登革热病例可以根据发热、出血、肝大、休克或血小板减少等症状进行临床诊断。病毒分离、血清学诊断及病毒核酸检查是确切的诊断方法。 病毒分离 可用蚊细胞培养上进行病毒分离。一般采集患者发病初期血清接种白纹伊蚊C6/36株细胞分离病毒,亦可经胸内接种巨蚊的成蚊、或脑内接种巨蚊的幼虫进行分离。病
聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验_超过滤法
实验方法原理超过滤法是利用超滤膜将水、盐及小分子滤过,将一定大小的大分子或病毒等颗粒截住从而使后者得到浓缩的一种方法。超过滤法是浓缩大容量的病毒样品的一种非常有效的方法,浓缩的同时可达到部分纯化。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒PBS仪器、耗材超滤膜实验步骤该法通常将孔径比病毒颗粒小的硝酸纤维素滤膜
大豆育种新突破:花粉低温保存打破亲本时空障碍
科技日报记者 李丽云 大豆育种如何突破父母本花期不遇瓶颈?如何实现异地品种杂交?6月30日,国家大豆产业技术体系首席科学家、中国农业科学院作物科学研究所研究员韩天富与国家大豆产业技术体系岗位科学家、黑龙江省农业科学院黑河分院鹿文成研究员牵头的联合研究团队,在国际刊物《植物科学前沿》在线发表了题为
FDA批准首个巨细胞病毒(CMV)基因检测法
2012年7月5日,美国食品与药物管理局(FDA)批准了首个巨细胞病毒(CMV)DNA检测法,用于评估实质器官移植患者的抗病毒治疗是否有效。在患者正在接受抗巨细胞病毒治疗期间,医师可以借助该方法评估治疗过程中患者血清样本中CMV载量变化情况。如果两次检测期间病毒载量显著降低则说明治疗有效,反之则应该
H5N1病毒RTPCR-检测法
⑴ 流感病毒RNA 提取:用 Qiagen RNA 提取试剂盒 ,参照使用说明步骤如下:1. 吸取560ul 含有载体RNA ( carrier RNA ) 的 Buffer AVL 到 一个干净的1.5ml Eppendorf 管。2. 吸取140 ul病毒尿囊液/或含有病毒的样品液到上述的Epp
聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验1
聚乙二醇 (PEG) 浓缩法实验方法原理这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物,相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒,其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒,而且对病
打破大豆育种瓶颈,这项技术成了关键
大豆育种如何突破父母本花期不遇瓶颈?如何实现异地品种杂交?我科学家对大豆花粉超低温保存关键技术进行优化,实现了大豆花粉异季和异地应用,打破大豆花粉应用时空障碍,为实现规模化、工程化育种提供了技术支撑。6月30日,该成果论文以“改进大豆花粉超低温保存技术,实现异季异地杂交利用”为题,在线发表于国际刊物
化学发光法和ELISA法检测乙肝病毒五项指标结果比较
郑黎明(贵航平坝医院检验科 平坝 561100)[摘要]目的:比较化学发光免疫测定(CL)与酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测乙肝病毒标志物的优缺点。方法:用上述两种方法对乙型肝炎病毒五项标志物分别进行检测,然后进行结果分析。结果:化学发光法检测乙型肝炎表面抗原和核心抗体,与ELIS
“脱酶”法有望“缩小”艾滋病病毒储存库
HIV在长期与人类对抗中成功的关键,是其将自己潜伏于人体内的小把戏。当HIV感染某个细胞后,就会强迫宿主细胞表面的细胞膜形成小囊膜,作为自己的藏身之所。囊膜会经历一个被称为“出芽繁殖”的过程,从中间断开后到处飘移,感染更多细胞。 复旦大学卢洪洲教授课题组,通过对127例已经接受抗病毒治疗的艾滋
胶体金法试纸检测艾滋病毒准确吗
一般试纸的准确率都在99%以上,所以是可以检测的,对于是否可以排除,要看是在什么时间做的艾滋病检测的,建议在高危后的6周做艾滋病检测,是阴就可以排除99.9%。如果不放心可以等到三个月复查就可以完全排除。关爱自己
反转录病毒原液检测实验——反转录酶分析法
实验材料病毒试剂、试剂盒SSC乙醇仪器、耗材滴定板滤纸离心机实验步骤1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒上淸,盖上平板,置于37℃培养箱中温育1~2 h。2. 将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或
生物安全柜有哪些隐患......
生物安全柜是一种对操作人员、样品和环境提供安全保护的安全设备,也是实验室生物安全一级防护屏障中基本的安全防护设备。但是即便是安全柜,也可能不安全。隐患1:目前市场上鱼龙混杂,发生的一些实验室生物安全事件大部分是因为设备长时间使用,又无任何保养措施,导致过滤器堵塞,风速降低,致使形成保护人员的风幕墙出
《中国药典》三部鼠源性病毒检查法拟增订荧光定量PCR法
关于《中国药典》三部鼠源性病毒检查法(荧光定量PCR法)国家药品标准草案的公示 国家药典委员会拟制定鼠源性病毒检测法增订荧光定量PCR(Q-PCR)检测法国家药品标准,为确保标准的科学性、合理性和适用性,现公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期为三个月。请相关单位认真研核,若有异议,请及时来函提
FDA批准一项新的用于检查JC病毒抗体的血液检测法
JC病毒抗体检测法的上市将改变多发性硬化(MS)患者临床治疗实践。2012年1月,FDA发出警告:正在使用那他珠单抗治疗的多发性硬化(MS)或克罗恩病患者,如果已经有JC病毒暴露,他们患进行性多灶性脑白质病(PML) 的风险增加。FDA还宣布批准一项新的用于检查JC病毒抗体的血液检测法。FDA认为,
筛检试验法筛查艾滋病毒的相关内容
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。 颗粒
朊病毒、病毒和类病毒的主要区别
病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA或RNA)型,必须在活细内寄生并复制的非细胞型微生物。“virus”一词源于拉丁文,原指一种动物来源的毒素。病毒能增殖、遗传和演化,因而具有生命最基本的特征,但至今对它还没有公认的定义。最初用来识别病毒的性状,如个体微小、一般在光学显微镜下不能看
新验血法能快速分清细菌病毒:可少吃消炎药
据国外媒体报道,一种新的血液检测方法能够帮助医生们在两小时内搞清楚病人的感染是由细菌还是病毒导致的,这项研究发表在Plos One杂志上。 科学家们认为,这项研究成果能够避免病人在不必要的时候使用抗生素。 该研究目前仍处于实验室研究阶段,但这个团队的科学家已经开始在研究便
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法
实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感染单位
组织培养的应用前景
1.快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物 依靠自然条件在较短时间内繁殖稀有植物和经济价值较高的植物,受到地理环境和季节的限制,很难达到快速、高效的目的;特别对于在短时期内需要达到一定数量,才能创造应有价值的植物,时间就是效益,只有通过组织培养的方法才能满足这一要求。用组织培养法繁殖植物,这是组
我国大豆育种花粉低温保存关键技术取得新突破
日从黑龙江省农业科学院黑河分院了解到,中国农业科学院作物科学研究所与黑龙江省农业科学院黑河分院合作,对我国大豆花粉低温保存的关键技术进行研究,取得了新突破。这一研究成果实现了大豆花粉异季和异地应用,打破了大豆花粉应用的时空障碍,为实现大豆规模化、工程化育种提供技术支撑。 据黑龙江省农业科学院黑河
A型流感病毒的病毒特性
1、易感性 对于流感病毒,人群普遍易感,感染或接种疫苗后1周出现抗体,2~3周达高峰,1~2个月后开始下降,1年左右降至较低水平,流感病毒3个型别之间无交叉免疫。 2、季节性 同许多其它的呼吸系统病毒性疾病相似,流感也是一种季节性疾病,它在夏季的发病率较低,冬季的发病率较高,但在某些地方这
类病毒与RNA病毒的区别
相同点:1. 都侵入宿主细胞。2. 借助宿主细胞增殖机制完成自身增殖。不同点:1. 类病毒没有蛋白质衣壳包裹,是一类小分子RNA。2. 被类病毒感染的组织并不会包含病毒颗粒。3. 类病毒自身不编码任何蛋白质。4. 在感染的宿主细胞中直接复制,更不经过逆转录步骤整合到宿主细胞的染色体上。
RNA病毒与类病毒的区别
相同点:1. 都侵入宿主细胞。2. 借助宿主细胞增殖机制完成自身增殖。不同点:1. 类病毒没有蛋白质衣壳包裹,是一类小分子RNA。2. 被类病毒感染的组织并不会包含病毒颗粒。3. 类病毒自身不编码任何蛋白质。4. 在感染的宿主细胞中直接复制,更不经过逆转录步骤整合到宿主细胞的染色体上。
腺病毒的病毒分离与鉴定
1、分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。 2、病毒鉴定 用荧光标记的
评论:让属于病毒的-归病毒
今天上午,中国宣布已经研制出特异并且灵敏的快速诊断猪流感的方法,马上就可以装备全国的疾病预防控制中心。同时,国家主席胡锦涛、国务院总理温家宝分别对防控工作提出要求、作出部署。至此,中国已动用自己最有效率的手段——政治的和行政的方式,堵截始发于墨西哥的流感病毒。 这时,全球因猪流感死亡的病例