H5N1病毒RTPCR检测法

⑴ 流感病毒RNA 提取:用 Qiagen RNA 提取试剂盒 ,参照使用说明步骤如下:1. 吸取560ul 含有载体RNA ( carrier RNA ) 的 Buffer AVL 到 一个干净的1.5ml Eppendorf 管。2. 吸取140 ul病毒尿囊液/或含有病毒的样品液到上述的Eppendorf 管里,间断混匀15 秒,在室温下静置10分钟后快速离心。3. 在上述的Eppendorf 管里加入560ul 无水乙醇,间断混匀15 秒后快速离心。4. 从上述Eppendorf 管里吸取630 ul 混合液到一个干净的QIAamp 离心柱,10000 转离心一分钟。5. 吸取剩余的630 ul 混合液到上述QIAamp 离心柱,10000 转离心一分钟。6. 加750 ul Buffer AW1 至QIAamp 离心柱,10000 转离心一分钟。7. 加750 ul Buffer AW2 至QIAamp 离心柱,100......阅读全文

H5N1病毒RTPCR-检测法

⑴ 流感病毒RNA 提取:用 Qiagen RNA 提取试剂盒 ,参照使用说明步骤如下:1. 吸取560ul 含有载体RNA ( carrier RNA ) 的 Buffer AVL 到 一个干净的1.5ml Eppendorf 管。2. 吸取140 ul病毒尿囊液/或含有病毒的样品液到上述的Epp

细胞免疫荧光法检测H5N1流感病毒抗体

1. 预先制备H5基因表达细胞片.2. 用PBS轻洗细胞一次.3. 用预冷(-20oC) 的甲醇固定细胞20分钟.4. 风干片子(此片可在低温长期保存待用).5. 用PBS浸泡细胞片20分钟.6. 吸去PBS, 加抗血清/抗体(稀释度可根据具体情况而定). 体积要足够盖过细胞表面.7. 37oC 温

RTPCR技术检测猪流感病毒

 根据猪流感病毒siv的M 基因的序列,设计合成了1对引物,建立了检测猪流感的RT-PCR方法。应用该方法对Hl、H3、H9亚型的猪流感病毒进行基因扩增,均获得了分子量为460bp的特异性目的片段,而对PRRSV、PCV2、PI 、CSFV进行同条件检测,结果均为阴性;SIV扩增产物测序结果与SIV

RTPCR检测汉坦病毒基因及分型

材料: (1)急性期病人血清、鼠肺、鼠血或分离的汉坦病毒(2)引物:引物序列(5’~3’)位置片段(bp)逆转录引物TAGTAGTAGACTCC1~14LMS通用外引物AAAGTAGGTGITAYATCYTIACAATGTGG1910~1939M(+)GTACAICCTGTRCCIACCCC2373

新加坡开发出新型H5N1病毒检测工具

新加坡淡马锡生命科学实验室研制的H5N1病毒诊断工具取得快速进展,仅用30分钟就可检测出细胞内是否有H5N1病毒。该检测工具现在已可以批量生产。 另外,该科研机构即将进行禽流感疫苗临床试验,以确保新加坡跟上全球在该科研领域发展的步伐。该项研究工作已经持续了2年半。

H5N1病毒可能的人际传播

由中国科学家进行的一项新研究发现一起H5N1禽流感病毒极有可能在人类之间传染的病例。他们的研究在线发表于4月8日出版的《柳叶刀》(The Lancet)杂志上,第一作者、同时也是中国疾病防治控制中心主任的王宇和他的同事在2007年12月对中国东部江苏省同一个家庭中出现的两例禽流感病例进行了分析。 2

关于甲型H5N1流感病毒的测定方法介绍

  世界动物卫生组织(OIE)规定,禽流感病毒的检测采用鸡胚病毒分离培养及致病力测定。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会联合发布了6项有关禽流感病毒检测的国家标准,其中针对H5N1亚型的有《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《H5亚型禽流感病毒NASBA检测方法

荷兰H5N1病毒研究裁决再起争议

  2011年12月,荷兰政府对病毒学家Ron Fouchier提出了一个闻所未闻的要求。当时,Fouchier通过研究证明了一些基因突变会使H5N1型禽流感病毒在白鼬之间更具有传染性。荷兰政府认为,该项技术具有双重性,既可以造福人类也可以为世界带来灾难,因此要严肃对待。   在Fo

牛感染H5N1病毒具有传播潜力

科学家发现,对美国牛群中传播的高致病性H5N1禽流感病毒的表征揭示了该病毒在哺乳动物中的感染和传播特征。该病毒能通过感染牛流感的奶牛的奶传给小鼠,并通过鼻内暴露传播给小鼠和雪貂,而且能进入受感染动物的乳腺。相关研究近日发表于《自然》。2024年春季在美国奶牛场发现的牛流感是首次报道高致病性H5N1禽

H5N1病毒研究重启:科学家为何制造致命病毒

  经历了为期一年的停滞之后,世界各国顶尖的病毒学家们决心重新打开他们手中的“潘多拉魔盒”。   他们的决定事关一种能导致全球一半人口死亡的病毒。2012年初,在荷兰科学家罗恩·富希耶的实验室中,高致病性禽流感H5N1病毒历经十个世代的变异,拥有了通过空气在人类之间传染的能力。类似的病毒也在美国威

H5N1病毒研究重启:科学家为何制造致命病毒

荷兰病毒学家富希耶在实验室中  经历了为期一年的停滞之后,世界各国顶尖的病毒学家们决心重新打开他们手中的“潘多拉魔盒”。  他们的决定事关一种能导致全球一半人口死亡的病毒。2012年初,在荷兰科学家罗恩·富希耶的实验室中,高致病性禽流感H5N1病毒历经十个世代的变异,拥有了通过空气在

植物病毒的电镜技术法检测

从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种

什么是RTPCR,RTPCR的定义与检测方法?

1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。 RNA扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火

H5N1病毒感染性强于估计

[北京] 对两名死于H5N1病毒的患者尸体病理解剖显示,这种病毒感染的人类器官比此前人们所认为的更多。这一研究9月28日发表于《柳叶刀》杂志上。 北京大学基础医学院院长顾江教授是这篇论文的第一作者,他和同事研究了一名男性和一名怀孕女性死后的组织器官,也检测了这名死于禽流感的怀孕女性的胎儿。 他们

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃低温退火,

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃ 低温退火,

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

            实验方法原理 多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合

酶联法检测人类免疫缺陷病毒

[测定方法] ELISA法 [方法学原理] 在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型十Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。 [标本准备] 静脉抽血2ml,不

植物病毒的生物学检测法

生物学检测法又叫指示植物检测法。JamesJohnson 早在1925 年就开始用指示植物鉴定植物病毒。指示植物检测法是借助于对某些病毒敏感的植物而进行的病毒鉴定方法。指示植物是指对某一种或某几种病毒及类病毒具有的敏感反应, 一旦被感染能很快表现出明显症状的植物。 指示植物可以分为草本指示植物和木本

电镜技术法检测植物病毒的介绍

  从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

PCR法检测乙肝病毒(HBV)主要用于对病毒性肝炎的诊断、疗效观察及预防研究工作。实验方法原理多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,

争议H5N1禽流感病毒研究将重启

  全球40名科学家23日分别在美国《科学》和英国《自然》杂志上发表公开信,宣布将重启暂停12个月的一项曾引起争议的有关H5N1型禽流感病毒的研究。但也有学者认为研究仍可能带来负面影响,不应重启。   《自然》杂志去年刊登一篇争议论文,描述了对尚未具备人际传播能力的H5N1型高致病性禽流感病毒开展

H5N1与甲流病毒结合或可人传人

  近日,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所陈化兰团队研究发现,H5N1病毒确有可能通过与人流感病毒的基因重配,获得在哺乳动物之间高效空气传播的能力,从而引起人间大流行。该研究从全新角度揭示了H5N1病毒对全球公共卫生构成的现实威胁,5月3日,《科学》在线发表了相关论文,并配发了摘报评论和专题报道。同时

甲型H5N1流感病毒的基本介绍

  甲型H5N1流感病毒,即A(H5N1)或H5N1,也称H5N1病毒、H5N1禽流感,是甲型流感病毒的一个高致病性亚型,具有血凝素(hemagglutinin)第5型,神经氨酸酶(neuraminidase)第1型。  甲型H5N1流感病毒,起源于家禽和野生鸟类,可传染给人类。 [1] 但此病毒有

实时荧光RTPCR方法检测新型冠状病毒核酸作业指导书

实时荧光 RT-PCR 方法检测新型冠状病毒核酸   (一)目的。 规范实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序,保证实验结果的正确可靠。 (二)范围。 copyright sysqy.com 适用于实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸。 (三)职责。

荧光RTPCR技术可快速检测H7N9禽流感病毒

  目前,在国内通用的确诊禽类中禽流感病毒H7N9亚型的检测技术中,除采用传统的鸡胚病毒分离方法外,通常采用核酸检测方法,如普通PCR方法和基于荧光RT-PCR的“二步法”,但还没有建立起采用荧光RT-PCR技术“一步法”检测禽流感病毒H7N9亚型的方法。  据该项目组负责人、北京局检验检疫技术中心

miR92a检测试剂盒(荧光RTPCR法)获批上市

  近日,国家食品药品监督管理总局经审查,批准了深圳市晋百慧生物有限公司生产的创新产品 “miR-92a检测试剂盒(荧光RT-PCR法)”的注册。  该产品采用RNA提取试剂盒提取粪便中的RNA,进行RT-PCR反应。miR-92a对于大肠癌的辅助检测是一个新的标志物,且得到了较为广泛的认可,产品样

miR92a检测试剂盒(荧光RTPCR法)获批上市

  近日,国家食品药品监督管理总局经审查,批准了深圳市晋百慧生物有限公司生产的创新产品 “miR-92a检测试剂盒(荧光RT-PCR法)”的注册。  该产品采用RNA提取试剂盒提取粪便中的RNA,进行RT-PCR反应。miR-92a对于大肠癌的辅助检测是一个新的标志物,且得到了较为广泛的认可,产品样

RTPCR的定义与检测方法

1.定义:是以RNA为模板,联合逆转录反应(reverse transcription,RT)与PCR,可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。 RNA扩增包括两个步骤: 在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补cDNA;加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火