RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

RAPD分析技术 实验方法原理 RAPD作为单引物的PCR扩增产物,其产生机理是引物首先结合到模板链,沿模板5'端方向延伸而产生不同长度的DNA片段,然后以这些片段为模板继续大量扩增。由于RAPD反应中,在3'端没有相应引物和模板互补,这样必然存在一个由引物沿模板DNA 5'端方向延伸后再在3'端形成同一引物互补序列的过程。 有人提出,在RAPD反应过程中,扩增可能存在一些这样的分子模式: (1)5'端带有引物的单链DNA分子在3'端发生折转、自身结合和延伸,并在3’端形成同一引物的互补序列,变性展开后即可成为单引物PCR扩增的模板分子。 (2)通过两......阅读全文

pcr技术扩增dna需要的条件

①PCR技术需要目的基因作为模板,①正确;②PCR技术中需要一对引物,②正确;③PCR技术中需要四种脱氧核苷酸作为原料,③正确;④PCR技术是体外扩增DNA的,不需要mRNA,④错误;⑤PCR技术需要热稳定DNA聚合酶等,⑤正确;⑥PCR技术是体外扩增DNA的技术,不需要核糖体,⑥错误.

RFLP技术和RAPD技术3

一个较为详细的遗传连锁图谱不仅对该物种的遗传学基础研究有重要意义,同时对该物种的育种研究也很有帮助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技术进行斑马鱼遗传连锁图谱的制作。Liu把RAPD技术应用到鲶鱼基因图谱研究中。孙效文等建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱有RAPD分子标记56个,

RFLP和RAPD技术

RFLP和RAPD技术概 述   DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基

分子实验方法7:-RFLP和RAPD技术

第七章 RFLP和RAPD技术第一节 概 述  DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同

真菌检验生物学技术临床检验

真菌检验生物学技术:(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病。针对真菌的共同序列而设计的‘全能引物’(pan-primer)而扩增580bp的产物,为真菌所共有

真菌检验的生物学技术

(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病。针对真菌的共同序列而设计的‘全能引物’(pan-primer)而扩增580bp的产物,为真菌所共有。检测血液标本即可明

真菌生物学检验技术

(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病。针对真菌的共同序列而设计的‘全能引物’(pan-primer)而扩增580bp的产物,为真菌所共有。检测血液标本即可明

医学检验真菌检验生物学技术

(一)、用PCR等技术字标本中扩增真菌DNA.国内应用PCR与反向斑点杂交快速检测及鉴定念珠菌主要种别。国外可以用PCR-DEIA技术从血清中扩增出白色念珠菌的DNA来诊断念珠菌病医|学教育网搜集整理。针对真菌的共同序列而设计的‘全能引物’(pan-primer)而扩增580bp的产物,为真菌所共有

DNA的PCR扩增及Southem-blot分析

    DNA存在于细胞核和线粒体内.携带遗传信息,决定着细胞和个体的遗传性状。细胞DNA的检测有助于了解DNA的特征,如复制、表达以及变异情况等,从而在分子水平研究细胞的生物学特征,细胞的DNA检测主要包括DNA的提取及检测。检测方法有多种,如PCR、限制性片段长度多态性(restriction

PCR扩增样本DNA的HLA基因片段

一、PCR扩增体系1. 1.0uM 引物2. 300ng待测样本基因组DNA3. 2.0U Taq多聚酶4. 200uM 各种dNTP5. 用1 X PCR缓冲液(10mM Tris-HCl,pH8.3,50mM KCl,1.5mM MgCl2,0.01%明胶)调至总体积100ul,并用50ul矿物

基因多态性的检测方法概述

多态性(polymorphism)是指处于随机婚配的群体中,同一基因位点可存在2种以上的基因型。在人群中,个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因(DNA)的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类,即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性

基因多态性的检测方法

多态性(polymorphism)是指处于随机婚配的群体中,同一基因位点可存在2种以上的基因型。在人群中,个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因(DNA)的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类,即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性

PCR技术(八):扩增较大片段DNA的PCR方法

一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性:  通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶,具有完整的3'外切酶校读活性(3'-editing-exonuclease),可以将每个循环中碱基

分子生物学常用实验技术(十)

第二节RFLP 技术一、材料   基因组DNA(大于50kb,分别来自不同的材料)。二、设备  电泳仪及电泳槽, 照相用塑料盆5 只,玻璃或塑料板(比胶块略大) 4 块,吸水纸若干,尼龙膜(依胶大小而定),滤纸,eppendorf 管(0.5ml)若干。三、试剂:1、限制性内切酶(BamHⅠ, Ec

RFLP技术和RAPD技术1

第一节 概 述DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切

DNA分子标记技术研究进展(一)

遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用,随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起,遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映,它具有

基因组DNA提取与PCR扩增技术

一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。实验原理 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等,破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。 DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶

如何分析DNA经PCR扩增后的图谱

首先得需要确定你的目的扩增片段的大小,然后根据marker指示位置确认

pcr技术扩增dna需要的条件是什么

Pcr 技术扩增DNA 需要的条件是:DNA模板链,脱氧核苷酸原料, TaqDNA的聚合酶,引物等。

pcr技术扩增dna需要的条件是什么

Pcr 技术扩增DNA 需要的条件是:DNA模板链,脱氧核苷酸原料, TaqDNA的聚合酶,引物等。

基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

常用的几种分子标记

RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。 SSR 真核生物

几种标记实验的特点

RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。SSR 真核生物的

分子生物学常用实验技术(九)

第三节从动物组织提取基因组DNA一、材料  哺乳动物新鲜组织。二、设备  移液管、高速冷冻离心机、台式离心机、水浴锅。三、试剂1、分离缓冲液:10mmol/L Tris?Cl pH7.4, 10mmol/L NaCl, 25mmol/L EDTA。2、其它试剂:10% SDS,蛋白酶K (20mg/

特异引物的PCR标记的相关介绍

  特异引物的PCR标记所用引物是针对已知序列的 DNA 区段而设计的,具有特定核苷酸序列(通常为 18—24 bp),可在常规PCR复性温度下进行扩增,对基因组 DNA 的特定区域进行多态性分析。  ①序列标志位点  (Sequence Tagged Sites,STS)  STS是对以特定对引物

分析体内DNA复制和体外PCR扩增DNA有何异同点

相同点: 都是半保留复制,都会经历DNA双链的解开(变性),寡聚核酸与单链DNA的结合(退火),以及DNA聚合酶开始合成DNA(延伸)的三个过程。不同点:1、连续性不同体内DNA复制半不连续复制,体外PCR连续复制,不会产生冈崎片断。2、酶不同PCR技术形成DNA时用耐热DNA聚合酶,而DNA复制用

分析体内DNA复制和体外PCR扩增DNA有何异同点

一、相同点1、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都是DNA的复制过程。2、体内DNA复制和体外PCR扩增DNA都需要酶促合合成过程。二、不同点1、条件不同体内DNA复制:以DNA双链、细胞分裂环境为条件。体外PCR扩增DNA:以模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件。2、过程不同体内DNA复制

DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验

原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。实验材料样品试剂、试剂盒双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪

DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验

实验材料 样品试剂、试剂盒 双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪器、耗材 加湿盒热循环仪实验步骤 1.  将载有固定样品的载玻片置105℃加热块上5~120 s。 2.  载玻片放入含0.3%H2O2中,于37℃或室温温育过夜,以灭活内源性过氧化物酶活性,然后以

AFLP分子标记实验

其基本原理是:以PCR(聚合酶链式反应)为基础,结合了RFLP、RAPD的分子标记技术。把DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”,用与接头互补的但3-端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增,只有那些与3-端严格配对的片