几种标记实验的特点

RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。SSR 真核生物的基因组中散布着大量的串联重复序列,其中, 2-4 个 bp 的微卫星序列 (Microsatellite 或叫简单序列重复 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多态性。 微卫星在结构上的最大特点是两端序列较保守, SSR 引物根据与微卫星重复序两端的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身,从而揭示微卫星的多态性。 SSR 是检测多态性的一种有效方法。微卫星( SSR )是广泛分布于真核生物基因组中的短串联重复序列( 1 - 7bp ), SSR 实验一般检测到的是一个单一的多等位基因位点;是共显性遗传,可鉴......阅读全文

实验动物标记实验

实验材料兔子 小鼠试剂、试剂盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)。标记的原则是

实验动物标记实验

实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)

ULS标记实验

基本方案             实验方法原理 Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV

ULS标记实验

实验方法原理 Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV)是用铂染色络合物与鸟嘌呤核苷的N7残基反应进行标记的方法。反应使核酸与铂荧光基团之间形成稳定的化学键。依据反应条件,ULS化合物在较低的程度上也与腺嘌呤形成络合物。该

ULS标记实验

实验方法原理Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV)是用铂染色络合物与鸟嘌呤核苷的N7残基反应进行标记的方法。反应使核酸与铂荧光基团之间形成稳定的化学键。依据反应条件,ULS化合物在较低的程度上也与腺嘌呤形成络合物。该方法已用于

AFLP分子标记实验

其基本原理是:以PCR(聚合酶链式反应)为基础,结合了RFLP、RAPD的分子标记技术。把DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”,用与接头互补的但3-端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增,只有那些与3-端严格配对的片

实验动物编号标记方法

动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的要求。 常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。 (一)颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。使用的颜料一般有3-5%苦味酸溶

SSR标记实验步骤

SSR简单序列重复标记可以用于:用微卫星区域特定顺序设计成对引物,通过PCR技术,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可显示SSR位点在不同个体间的多态性。实验方法原理与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以

标记裂解培养细胞实验

基本方案  温和去垢剂裂解法(对贴壁细胞)基本方案  温和去垢剂裂解法(对非贴壁细胞)SDS煮沸法裂解细胞实验方法原理实验材料待标记的培养细胞                                                          试剂、试剂盒37℃标记培养液      

SSR标记实验步骤

            实验方法原理 与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以 孟德尔方式遗传,呈共显性;(4)每个位点由设计的引物顺序决定,便于不同的实

SSR标记实验步骤

一、简介:SSR简单序列重复标记(Simple sequence repeat, 简称SSR标记),也叫微卫星序列重复,是由一类由几个核苷酸(1-5个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列,长度较短,广泛分布在染色体上。由于重复单位的次数的不同或重复程度的不完全相同,造成了SSR长度的高度变异

核酸探针标记的实验过程

实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将

核酸探针标记的实验过程

 实验原理分子生物研究中,zui常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可

核酸探针标记的实验过程

实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将

DNA探针的标记实验

探针标记法             实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一

几种标记实验的特点

RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。SSR 真核生物的

DNA探针的标记实验

核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀

微卫星标记的实验步骤

1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。3. 合成荧光标记引物。4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。

DNA探针的标记实验

实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。

非标记抗体免疫电镜实验

实验方法原理 标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组

实验动物常用的标记法

常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。二)烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。(三)针刺法用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠

用[32P]磷酸标记细胞实验_标记单层培养细胞

实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒FCS磷酸盐仪器、耗材无磷酸培养基实验步骤1. 在含 10% FCS 的培养基中单层培养 HeLa 细胞至铺满 50% 左右。2. 倒掉完全培养基,加入新鲜的无磷酸培养基,培养 3~4 小时以耗尽胞内的磷酸储备。3. 换新鲜的无磷酸培养基,并加 32P 磷酸盐至 2

抗原标记蛋白复合体纯化实验——条件性表达FLAG标记

实验方法原理有时导入的 FLAG 标记蛋白编码序列在逆转录病毒介导的转基因和药物筛选建立的克隆化细胞系中不表达。这可能是由于外源基因产物没有被调控的或组成型表达所造成的细胞毒性。为了克服这个问题,基于四环素的使用,一个可诱导的哺乳动物表达系统可以用来“打开”或“关闭” FLAG 标记蛋白的表达。在建

抗原标记蛋白复合体纯化实验——组成型表达FLAG标记

实验方法原理首先通过逆转录病毒介导的转基因(用于组成型表达)或四环素调控的系统(用于可诱导表达)建立表达抗原决定簇标记的蛋白复合体亚基的稳定细胞系。然后用抗原决定簇特异的单克隆抗体偶联的小珠进行免疫亲和纯化,以沉降抗原决定簇标记的多亚基蛋白复合体。最后在中性 pH 或生理条件下洗脱回收,即可用于功能

非标记抗体免疫电镜实验技术

(一) 原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织

非标记抗体免疫电镜实验技术

实验概要本文介绍了非标记抗体免疫电镜实验技术的具体操作方法。实验原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的

氨基酸代谢标记实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏氨基酸代谢标记实验标签:氨基酸 代谢 标记精编分子生物学实验指南第五版 第十章代谢标记技术用于研究蛋白质的生物合成、加工、细胞内运输、分泌、降解和物理化学特性。内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》                       

氨基酸代谢标记实验

实验方法原理 在含有放射性标记氨基酸的培养基中,短期培养细胞(800 Ci/mmol)/[35S]标记蛋白质水解产物试剂、试剂盒 PBS(冷冻)37℃ 脉冲标记培养基仪器、耗材 配有液体同位素垃圾阀门的真空吸气器实验步骤 1. 室温融化 [35S] 标记甲硫氨酸,并用预热的(37℃)脉冲标记培养基制

32-P-标记裂解培养细胞实验

基本方案  温和去垢剂裂解法(对贴壁细胞) 基本方案  温和去垢剂裂解法(对非贴壁细胞) SDS煮沸法裂解细胞             实验方法原理

RNA抽提和标记实验

            实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞 在组织培养中的细胞 冻存的整个组织