USE诱变实验
实验材料 带 mutS 表型(例如 BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态 带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态 试剂、试剂盒 退火缓冲液 贮存液 合成缓冲液 噬菌体 T4DNA 连接酶 噬菌体 T4DNA 聚合酶或测序酶 单一位点的限制性内切核酸酶 琼脂糖凝胶 诱变引物 选择引物 质粒 DNA 仪器、耗材 7......阅读全文
Use-an-IgG-antiIgM...
实验概要This method involves coupling an IgG anti-IgM antibody to protein A or G beads (see method below). These beads can then be used in the normal
CREATION-AND-USE-OF-YOUR-INFECTIOUS-VECTOR
实验概要CREATION AND USE OF YOUR INFECTIOUS VECTOR实验步骤Day 1 1. Plate 5 x 105 293T cells in 6 cm2 dishes containing 5 mL of media. (This can be scal
嫦娥五号搭载实验草种开展空间诱变实验
2020年11月24日凌晨,随着嫦娥五号探测器顺利升空,探测器搭载的中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所(以下简称兰州牧药所)紫花苜蓿和燕麦种子,开启了空间诱变实验之旅。在国防科工局探月与航天工程中心和探测器系统的支持下,航天育种产业创新联盟获得了极其珍贵的空间诱变载荷资源。作为航天育种产业创新联
重叠延伸产生特异位点诱变实验
试剂、试剂盒 扩增缓冲液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 模板 DNA
寡核苷酸介导的诱变实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中,60℃温育5 min,以杀灭细菌细胞,剧烈振荡以释放琼脂中的噬菌体,
寡核苷酸介导的诱变实验
基本方案 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
重叠延伸产生特异位点诱变实验
试剂、试剂盒 扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模板 DNA仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头微型离心管酶可调式移液器可按所需扩增条件设定程序的热循环仪实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液的成分及所需试剂请见附录 1。将贮存液稀释释到适当的浓度。10x 扩
寡核苷酸介导的诱变实验
用突变的寡核苷酸引导模板的合成,从而改变DNA序列,突变效率可达50~80%。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材水浴锅电泳仪培养箱实验步骤1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中
重叠延伸产生特异位点诱变实验
重叠延伸法进行特异位点诱变需要四种引物(请见图 13-4)(Higuchi et al.1988, Hetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模
枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育实验——紫外线诱变法
紫外线对微生物有诱变作用,主要引起是DNA的分子结构发生改变(同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体),从而引起菌体遗传性变异。将细胞计数后的平板,分别向菌落数在5-6个左右的平板内加碘液数滴,在菌落周围将出现透明圈。分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值(HC值),并与对照平板进行比
HOW-TO-USE-THE-COULTER-COUNTER-TO-COUNT-CELLS
1) Turn on the counter by pulling out the on/off button. You need to do this at least 10 min before use to obtain sufficient vacuum.Usually put 0.2 ml
Guidelines-for-the-Use-of-Analgesics-and-Tranquilizers-in-Laboratory-Animal
What is Anesthesia? Anesthesia is a state of unconsciousness induced in an animal. The three components of anesthesia are analgesia (pain relief), amn
用插入诱变法分离突变体实验
实验材料酵母菌株BY4741试剂、试剂盒T4 DNA连接酶缓冲液Taq DNA 聚合酶仪器、耗材YPD平板锥形瓶SC-leu平板RNase A实验步骤展
定点诱变实验——利用PCR引物点突变
实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶klenow限制性内切酶仪器、耗材水浴锅离心机培养箱实验步骤1. 制备模板(见基本方案,步骤1和2) 2. 合成和纯化寡核苷酸引物并对5‘端磷酸化。 3. 扩增模板DNA(基本方案,步骤4和5),在最后一次延伸结束后,加5 U 的klenow酶,30℃保温
酵母菌基因组转座子诱变实验—mTn诱变基因产物表位标记
实验材料mTn诱变酵母菌株试剂、试剂盒pGAL-cre含有2% (W V)棉籽糖的-Leu-Ura Raff CM缺失成分培养基平板和培养基含有2% {m V)半乳糖的-Leu Gal CM缺失成分培养基含有2% (m V)葡萄糖的-Leu Glc CM缺失成分培养基5-FOA培养基平板(5-FOA
基因突变的诱变机制定向诱变
利用重组DNA技术使DNA分子在指定位置上发生特定的变化,从而收到定向的诱变效果。例如将DNA分子用某一种限制性核酸内切酶处理,再用分解DNA单链的核酸酶S1处理,以去除两个粘性末端的单链部分,然后用噬菌体T4连接酶将两个平头末端连接起来,这样就可得到缺失了相应于这一限制性内切酶的识别位点的几个核苷
Setup-and-use-of-a-twolaser-multiphoton-microscope
Setup and use of a two-laser multiphoton microscope for multichannel intravital fluorescence imagingDavid Entenberg,1 Jeffrey Wyckoff,1 Bojana Gligori
Basic-Theory-and-Use-of-GCMS(二)
For ionisation to take place at all, chemical reaction between the sample and the reagent gas must be exothermic. The grater the heat of the reaction,
Use-of-the-Bradford-Protein-Assay-in-a-Microtiter-Plate-Format
Introduction The Bradford protein assay is a simple procedure for determination of protein concentrations in solutions that depends upon the change in
Basic-Theory-and-Use-of-GCMS(一)
BASIC THEORY AND USE OF GC-MSbyDr. Eugenia SobolevaContent1. Introduction.2. GC-MS systems and components.3. Vacuum system3.1. Rotary pump3.2. Di
General-Laboratory-Procedures,-Equipment-Use,-and-Safety-Considerations
A. Storage .The following properties of reagents and conditions are important considerations in processing and storing DNA and RNA. Heavy metals promo
关于基因诱变的γ射线诱变剂的介绍
γ-射线属于电离辐射,是电磁波.一般具有很高的能量,能产生电离作用,因而能直接或间接地改变DNA结构.其直接效应是,脱氧核糖的碱基发生氧化,或脱氧核糖的化学键和糖-磷酸相连接的化学键断裂,使得DNA的单链或双链键断裂.其间接效应是电离辐射使水或有机分子产生自由基,这些自由基与细胞中的溶质分子起作
关于基因诱变的激光诱变剂的介绍
激光在微生物诱变育种方面的研究与开发应用比较晚。激光诱变育种技术研究始于20世纪60年代,经过世界各国40多年的开发应用研究,不仅证明激光和普通光在本质上都是电磁波,它们发光的微观机制都与组成发光物质的原子、分子能量状态和变化密切相关。激光是一种与自然光不同的辐射光,它具有能量高度集中、颜色单一
定点诱变与盒式诱变的比较介绍
构建一个位点导向的文库涉及使用含有一个或多个简并密码子的合成DNA片段替代一个基因片段。这可以通过双链盒式诱变或单链寡核苷酸定向诱变来实现。我们相对倾向于寡核苷酸定向诱变,因为不同于盒式诱变,它不需要在目的区域附近有独特的限制性酶切位点,并且构建一个文库只需要一个寡核苷酸片段。因此,这个方法相当
关于基因诱变的微波诱变剂的介绍
微波辐射属于一种低能电磁辐射,具有较强生物效应的频率范围在300MHz~300GHz,对生物体具有热效应和非热效应。其热效应是指它能引起生物体局部温度上升,从而引起生理生化反应;非热效应指在微波作用下,生物体会产生非温度关联的各种生理生化反应。在这两种效应的综合作用下,生物体会产生一系列突变效应
Use-of-the-B.D.-FACS-or-Calibur-Flow-Cytometers
Reservations:Schedule time on a cytometer (FACS or Calibur) by filling in the calendar at the flow lab. Don't grossly overbook since we have to pa
How-to-use-Basic-Local-Alignment-Search-Tool-(BLAST)
DescriptionThe BLAST algorithm was developed as a way to perform DNA and protein sequence similarity searches by an algorithm that is faster than FAST
Use-of-SemiThin-Cryosections-for-Light-Microscopy.
Use of Semi-Thin Cryosections for Light Microscopy.Semi-thin sections can be obtained from frozen blocks of cryoprotected biological material by secti
Use-of-Nonaqueous-Fractionation-and-Metabolomics-to-Study-Chloroplast-...
Use of Non-aqueous Fractionation and Metabolomics to Study Chloroplast Function in ArabidopsisChloroplasts are the chemical factories of plant cells b
辐射对植物染色体的诱变作用实验
实验方法原理:物理射 线的电离辐射,具有非常短的波长以及相应的较大频率,其穿透力很大,在空气中γ-射线,射程可达几百米,速度为30万公里/秒。因此,对植物给予一定剂量的照射,很容易引起基因突变和染色体畸变,常见的有染色体粘着,着丝点区域断裂,破坏纺锤丝形成,染色体或染色单体的断裂等细胞学现象。可