噬菌体DNA在滤膜上的杂交实验

实验方法原理 通过用 32P 标记探针的原位杂交,可筛选携带有固定化 DNA 的滤膜,这些 DNA 来源于噬菌斑。该技术是强有力的、高度特异的和很灵敏的,能从数千个噬菌斑中鉴别出单一的重组子。 实验材料 噬菌体 DNA 放射性标记探针 试剂、试剂盒 氯仿 预杂交液 SM SSPE 仪器、耗材 煮沸的水浴 玻璃(Pyrex ) 烘烤平皿或其他杂交器......阅读全文

含尿嘧啶的单链噬菌体-M13-DNA-制备实验

试剂、试剂盒 缓冲液和溶液乙醇氯化钠苯酚醋酸钠TE琼脂糖凝胶原始的重组 M13 噬菌体单链 DNAYT 培养基仪器、耗材 Corex 离心机管巴斯德滴管柱层析树脂大肠杆菌菌株 CJ236大肠杆菌菌株 TG1JM109 或相当的菌株实验步骤 材料缓冲液和溶液各种贮存液,缓冲液和试剂成分请参阅附录 1。

含尿嘧啶的单链噬菌体-M13-DNA-制备实验

经典的 Kunfcel 寡核苷酸指导的诱变方法利用大肠杆菌中的尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (glycosylase) 特异地筛除去含尿嘧啶碱基的 DNA 的选择性作用(请参考寡核苷酸诱变信息栏)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓

借助于噬菌体ELISA的DNA/RNA结合活性的分析方法

A.噬菌体的制备 1.挑取含有源自文库筛选的噬菌体克隆的单菌落。用灭菌牙签挑取单菌落接种于灭菌圆底培养板的微孔内,其中加有150ul含15ug/ml的四环素的2×TY培养基。用一个微孔培养展示野生型DNA/RNA结合区域的噬菌体,作为阳性对照。以250r/min的速度小心振荡微孔板,30℃

λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验

实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成(由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成)的模板以

λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验

            实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成(由噬菌体 SP6、T3 和 T7

融合蛋白的免疫筛选实验——基本方案

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材硝酸纤维素滤膜实验步骤1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  将直径1

融合蛋白的免疫筛选实验

实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜实验步骤 1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  

融合蛋白的免疫筛选实验

基本方案 IPTG法             实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒

cDNA的筛选1

(一)λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1.用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基(Y1088用于噬菌斑杂交,Y1090用于免疫筛选),于37℃振荡培养过夜。2.将过夜培养物以3000×g离心5min。3.分别用2ml λ-dil(10 mmol/L tris-Cl,

λ噬菌体的局限性λ噬菌体

实验方法原理 本实验以含原λ噬菌体和缺陷噬菌体λdg的双重溶原菌gal+作为供体,经紫外线诱导后,获取能转导半乳糖发酵基因的高频转导噬菌体裂解液,然后让这些转导噬菌体将gal+基因转移到受体菌gal-中去。实验材料 供体菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (带有原噬菌

原位杂交菌落的裂解及DNA结合于硝酸纤维素滤膜

  菌落的裂解及DNA结合于硝酸纤维素滤膜  (1) 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。  (2) 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/L

使用合成核苷酸作探针实验——在绿化四甲胺中(TMAC)杂交

实验材料寡核苷酸试剂、试剂盒LBSDSEDTATMAC仪器、耗材水浴锅离心机培养箱尼龙膜实验步骤1.  按“在氯化钠/柠檬酸钠中杂交”介绍的方法处理已影印细菌菌落的滤膜。2.  按下列方法制备带扩增噬斑的滤膜(1)从文库中以渐减密度〔15 000~8 000噬斑 / 150 mm 平板)的方式将噬菌

经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验

实验方法原理 置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。实验材料 噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶λ

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

实验方法原理 如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。实验材料 噬菌体重组子大肠杆菌试剂、试剂盒 氯仿乙醇高盐缓冲液Tris-ClNaClEDT

经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验

置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理置换型载体

用-T7-噬菌体-DNA-聚合酶进行双脱氧测序反应

            试剂、试剂盒 去离子蒸馏水 二硫苏糖醇 dNTP 和 ddNTP 标记混合液和 ddNTP 延伸 终止混合液 甲酰胺上样缓冲液 测序酶稀释缓冲

经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验

            实验方法原理 置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 34、Charon 35 和 Charon 40 ) 含有一系列的限制位点,它们在中央填充片段的两端以相反方向排列(Frischaufet al. 1983)

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

            实验方法原理 如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。

微滤膜是什么

  微过滤是一种精密过滤技术,介于常规过滤和超过滤之间。过滤一般分深层过滤和筛网状过滤。常规过滤多属深层过滤,它所用的介质如纸、石棉、玻璃纤维、陶瓷、布、毡等,都是一些孔形极不整齐的多孔体,孔径分布范围较广,无法标明它的孔径大小,过滤时粒子是靠陷入介质内部曲折的通道而被截留。截留率则随压力的增加而下

微孔滤膜的应用

① 用作起泡点的测定:测定起泡点压力可以反映微孔滤膜的孔径大小,这与被滤过的药液质量密切相关,也是保证微孔滤膜质量的一种重要手段。使用的微孔滤膜应事先放在70℃左右的注射用水中浸泡1 h。将水倾出后再用温注射用水浸泡过夜备用。临用时取出,用注射用水淋洗干净,即可装入过滤器中使用,安装。时防止滤膜装歪

滤膜培养皿

滤膜培养皿             实验方法原理 将细胞接种入滤膜培养皿内,在多孔培养板中以过量的培养液进行培养。 实验材料

微滤膜的保养

1、 清洗液的要求      清洗药剂浓度要适当,避免对微滤膜产生化学损伤和腐蚀。清洗用水要求是无杂质的清水。不然,水中杂质会污染微滤膜,且难以清洗。2、 微滤膜的停运保存      微滤装置停止运行时,必须进行充分清洗,然后密封保存。如短期停用,对于处理白酒的微滤装置可用高度原酒浸泡保存。如长期停

滤膜培养皿

            实验方法原理 将细胞接种入滤膜培养皿内,在多孔培养板中以过量的培养液进行培养。 实验材料 每平方厘米滤膜约0.5×1000000个细胞

超滤膜清洗

 超滤设备产水量下降,超滤膜污堵严重,肿么办?重庆摩尔水处理设备有限公司告诉您!  超滤设备产水量下降,超滤膜严重污堵,已无法通过清洗恢复其应有产能时,就需要对超滤膜进  行更换,并加强超滤进水预处理,使其达到膜进水条件,来保障膜的使用寿命;  首先,应选择更换超滤膜产品,并确保适合该水质使用,进水

超滤膜污染

超滤膜污染 超滤膜的工业应用十分广泛,已成为新型化工单元操作之一。用于分离、浓缩、纯化生物制品、医药制品以及食品工业中;还用于血液处理、废水处理和超纯水制备中的终端处理装置。在我国已成功地利用超滤膜进行了中草药的浓缩提纯。超滤膜随着技术的进步,其筛选功能必将得到改进和加强,对人类社会的贡献也将越来越

微孔滤膜是什么

微孔滤膜微孔滤膜是利用高分子化学材料,致孔添加剂经特殊处理后涂抹在支撑层上制作而成。在膜分离技术应用中,微孔滤膜是应用范围最广的一种膜品种,使用简单、快捷、被广泛应用于科研、食品检测、化工、纳米技术、能源和环保等众多领域。微孔滤膜主要由精制硝化棉,加入适量醋酸纤维素、丙酮、正丁醇、乙醇、等制成,亲水

滤膜培养皿

实验方法原理 将细胞接种入滤膜培养皿内,在多孔培养板中以过量的培养液进行培养。实验材料 每平方厘米滤膜约0.5×1000000个细胞试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 滤膜培养皿多孔培养板弯镊滴管实验步骤 1. 将滤膜培养皿放入培养板或培养皿中。2. 加入培养液,将培养皿倾斜,使培养液充满滤膜下方的

滤膜培养皿

实验方法原理将细胞接种入滤膜培养皿内,在多孔培养板中以过量的培养液进行培养。实验材料每平方厘米滤膜约0.5×1000000个细胞试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材滤膜培养皿多孔培养板弯镊滴管实验步骤1. 将滤膜培养皿放入培养板或培养皿中。2. 加入培养液,将培养皿倾斜,使培养液充满滤膜下方的空间,尽量

卷式超滤膜与平板超滤膜的区别

卷式超滤膜与平板超滤膜的区别螺旋卷式超滤膜优势:膜的堆积密度大,结构紧凑,可使用好的平板膜,价格低廉。缺点:制作工艺和技术较为复杂,密封较困难。易堵塞、不容易清洗,不能在高压力作用下操作。使用状况:适用于处理液体量大的企业。板框式超滤膜优点:该膜组件结垢紧凑、简单、牢固、比其它膜组件更能承受高压。缺