痘苗病毒系统基因表达实验
重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞 实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始,然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3(可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒)感染的细胞。收获后,基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分析鉴定。 实验材料 脂质体悬液 vTF7-3 痘苗病毒储液 生长至汇片的 CV-1 细胞 重组质粒 ......阅读全文
什么是基因表达调控
分为转录水平上的基因表达调控和翻译水平上的基因表达调控。1.转录水平的调控:包括DNA转录成RNA时的是否转录及转录频率的调控,DNA的序列决定了DNA的空间构型,DNA的空间构型决定了转录因子是否可以顺利的结合到DNA的调控序列上,比如结合到TATA等序列上。2.翻译水平的调控:翻译水平的调控又可
基因超表达的定义
超表达是指目的基因的全长序列与高活性组成型启动子或组织特异性启动子融合,通过转化,获得该基因产物大量积累的植株。
基因表达调控主要表现
基因表达调控主要表现在以下几个方面:①转录水平上的调控;②mRNA加工、成熟水平上的调控;③翻译水平上的调控;
基因的翻译表达1
1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术,该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立,并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段,还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研究大多是提取mRNA然后通过网织红细胞或麦胚系
基因表达的机制原理
转录转录过程由RNA聚合酶(RNAP)进行,以DNA为模板,产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动,留下新合成的RNA链。基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成,每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”(产生RNA转录物的模板)和“编码链”(含有转录本序列的DN
甲醇酵母基因表达系统
1 甲醇酵母表达系统的特点 1.1 宿主 七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白(SCP),有很好的发酵基础,菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长,其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径
基因表达系列分析简介
1995年Velculescu等提出了基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression,SAGE)技术,能同时对上千个转录本进行研究。 SAGE是一种快速分析基因表达信息的技术,它通过快速和详细分析成千上万个表达序列标签(Expressed Sequenc
什么是基因表达调控
意义:1.适应环境、维持生长和增殖:生物体赖以生存的外环境是在不断变化的,为了生存,所有活细胞都必须对外环境变化作出适当反应,调节代谢,以适应环境变化。生物体适应环境、调节代谢的能力与蛋白质分子的生物学功能有关。而蛋白质的水平又受基因表达的调控。2.维持个体发育与分化:多细胞生物调节基因的表达除为适
基因的翻译表达2
方法 1:重组载体构建同前面实验 2:诱导表达:提取带重组片断的质粒DNA转化BL21(DE3)受体菌37℃活化过夜,转入新鲜培养基摇菌至对数生长期(约2-3小时),加入IPTG至终浓度0.4mM,继续培养6小时 3:表达产物提取及鉴定见实验十九
基因表达组件的概念
中文名称表达组件英文名称expression cassette定 义与基因表达有关的一系列序列元件的组合。常包括启动子、编码序列、终止子、增强子等。完整的表达组件是能够表达出目的物的成套基因元件。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
欧洲学者:基因表达尚“表达”不了死者死亡时间
最近,英国《自然·通讯》杂志发表文章称,欧洲科学家根据生物库的数据分析表明,死亡引起的不同组织的基因表达变化,将可用于估计死者的死亡时间。该消息引发公众广泛关注。图片来源于网络 在刑侦领域,死亡时间的确定是破案最重要的线索之一,围绕它展开的相关研究一直没有停止。但是,现实没有我们想得那么乐观。
Nature揭开基因表达的秘密
你的DNA不止控制了你的眼睛是什么颜色,是否可以卷起你的舌头。你的基因中包含了生成所有蛋白质的指令,细胞时时需要蛋白质来维持你的生存。然而直到现在,这一过程在分子水平上运作的一些关键方面仍然是难解的谜。 利用低温电子显微镜(cryo-EM),劳伦斯伯克利国家实验室的科学家Eva Nogales
Cell:基因表达分析的反思
在最新一期(10月26日)的《细胞》(Cell)杂志上,来自怀特黑德研究所的研究人员报告称在生成和注释来自全基因表达(global gene expression)分析的数据时所采用的一种常用假设可以造成当前广泛的生物学研究中关于基因活性与细胞行为的结论出现严重错误。 怀特黑德研究所成员Richa
痘苗病毒系统基因表达实验
重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞 实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质
个体基因表达度的概念
中文名称表达度英文名称expressivity定 义个体基因表达的变化程度。同一基因型的不同个体在性状或疾病的表现程度上的差异。可以因环境因子的差异、其他基因的影响或者个体遗传背景的不同等引起。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)
基因表达的系列分析实验
SAGE(Velculescuetal.1995) 是基于 PCR 技术的一种高灵敏度研究基因表达的方法,可得到 mRNA 文库的定性及定量信息。自 1995 年此技术产生以来,发表了大量的相关文章,表明 SAGE 可同时检测大量基因的表达水平的变化。实验材料玻璃及塑料器皿试剂、试剂盒溶液与缓冲液引
研究称环境影响基因表达
随环境改变“脾气”的小蜜蜂 几年前,美国伊利诺斯大学阿巴纳香槟分校昆虫学系的吉恩·E·鲁滨逊教授,请墨西哥南部的伙伴帮他捕获了1000只新生的小蜜蜂——500只性情温和的意大利蜜蜂和500只生性凶猛的非洲蜜蜂。这两个蜜蜂亚种在基因上相似得几乎难以分辨,但后者却在领地防御上厉害很多。 鲁滨逊
基因表达系列分析实验(SAGE)
实验材料感兴趣的细胞或组织试剂、试剂盒糖原EDTA缓冲液SDSBSATween 20连接子T4 DNA 连接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸钠乙醇DMSOPCR引物乙酸铵DNA ladder聚丙烯酰胺 TBE凝胶DNA参照pZErO-1 质粒TE缓冲SOC培养液Tris · Cl仪器、耗材微量离心
表达谱基因芯片实验
表达谱基因芯片可应用于:(1)疾病诊断;(2)新药开发;(3)环境保护。实验方法原理按照预定位置固定在固相载体上很小面积内的千万个核酸分子所组成的微点阵阵列。在一定条件下,载体上的核酸分子可以与来自样品的序列互补的核酸片段杂交。如果把样品中的核酸片段进行标记,在专用的芯片阅读仪上就可以检测到杂交信号
基因表达的过程和步骤
基因表达可以通过对其中的几个步骤,包括转录,RNA剪接,翻译和翻译后修饰,进行调控来实现对基因表达的调控。基因调控赋予细胞对结构和功能的控制,基因调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。基因调控也可以作为进化改变的底物,因为控制基因表达的时间、位置和量可以对基因在细胞或多细胞生
同种异形基因表达的定义
中文名称同种异形基因表达英文名称allotopic gene expression定 义同一种属生物的不同个体间基因表达的差异,这是等位基因变异造成的,结果使同一蛋白质产物在不同个体间有所差异。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)
关于基因表达的概念简介
基因表达(gene expression)是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质,所有已知的生命,都利用基因表达来合成生命的大分子。 基因表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码基因如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)基因的表达产物是功能性RNA
TLP基因的表达模式分析
实验概要本实验对水稻、拟南芥及杨树的TLP基因表达模式进行了分析,为进一步研明植物中TLP基因的功能奠定基础。实验步骤1. 水稻TLP基因的RT-PCR分析 1) 植物材料选取水稻的根、茎、叶、花和种子的新鲜组织用于RNA的提取。水稻材料采集后,用液氮速冻,以保证RNA不被降解,然后冻存于-70
基因表达-RTPCR之我见
本文讨论的范围包括RNA酶保护分析,northernblot,原位杂交,半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不谈具体protocol,是因为各种书籍和kit说明书上都有,主要说一些原则,而且大部分是失败和成功的经验,还有小组讨论结果以及各种书里七零八落看的内容,希望对大家有用。基因表达的定义
基因表达的转录机制介绍
转录过程由RNA聚合酶(RNAP)进行,以DNA为模板,产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动,留下新合成的RNA链。 基因组DNA由两条反向平行和反向互补链组成,每条链具有5'和3'末端。这两条链分别称为“模板链”(产生RNA转录物的模板)和“编码链”(含有转录本序列的
同种异形基因表达的定义
中文名称同种异形基因表达英文名称allotopic gene expression定 义同一种属生物的不同个体间基因表达的差异,这是等位基因变异造成的,结果使同一蛋白质产物在不同个体间有所差异。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)
什么是基因的渗漏表达
在诱导之前就会有插入基因的表达的现象叫基因的渗漏表达。产生的原因很有可能是因为培养基中存在部分乳糖导。如果重组蛋白没有毒性,那么问题不大。但是如果目的蛋白有毒,就会造成你的菌提前死亡。解决方法可以在培养基中加入一定量的葡萄糖,细菌在有葡萄糖存在的时候不会启动乳糖诱导机制。但是葡萄糖的量需要根据菌量以
痘苗病毒系统基因表达实验
实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始,然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3(可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒)感染的细胞。收获后,基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分
调节基因表达与否的开关
研究学者发现一种特殊的分子结构,这种分子结构起着开关的作用,可以调节基因的表达和关闭。这一发现发表在10月份第21期“Cell”杂志上。 近年来,分子生物学中的一个重要发现,即基因表达的开放或激活、关闭或抑制是如何被调节的。这一机制与人类的疾病(如调节细胞生长基因的不适当激活或抑制是癌症
基因表达差异分析方法进展
高等真核生物的基因组一般具有80 000~100 000个基因,而每一个细胞大约只表达其中的15%[1]。基因在不同细胞间及不同生长阶段的选择性表达决定了生命活动的多样性,如发育与分化、衰老与死亡、内环境稳定、细胞周期调控等。比较细胞间基因表达的差异为我们揭示生命活动的规律提供了依据。