抗体或蛋白质中硫基的引入实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 抗体或蛋白质溶液 试剂、试剂盒 AMSA 溶液 磷酸二氢钾 氮气 羟胺 EDTA 仪器、耗材 交联葡聚糖 G-25 色谱柱 实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」在氮气条......阅读全文
抗体或蛋白质中硫基的引入实验
实验材料抗体或蛋白质溶液试剂、试剂盒AMSA 溶液磷酸二氢钾氮气羟胺EDTA仪器、耗材交联葡聚糖 G-25 色谱柱实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」在氮气条件下，每 1 ml 抗体或蛋白质溶液加入 0.1 ml AMSA 溶液，密封试管并在室温下缓缓搅拌 0.5 h。为移除乙酰基并暴露硫醇基团，
抗体或蛋白质中硫基的引入实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 抗体或蛋白质溶液
抗体或蛋白质中硫基的引入实验
抗体或其他蛋白质必须具有自由硫醇集团才能获得固定酶活性。这种基团可以由特定试剂引入，在此介绍与 S-乙酰疏基丁二酸酐的反应。实验材料抗体或蛋白质溶液试剂、试剂盒AMSA 溶液磷酸二氢钾氮气羟胺EDTA仪器、耗材交联葡聚糖 G-25 色谱柱实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」在氮气条件下，每 1 m
抗体或蛋白质中硫基的引入实验
实验方法原理 实验材料 抗体或蛋白质溶液试剂、试剂盒 AMSA 溶液磷酸二氢钾氮气羟胺EDTA仪器、耗材 交联葡聚糖 G-25 色谱柱实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」在氮气条件下，每 1 ml 抗体或蛋白质溶液加入 0.1 ml AMSA 溶液，密封试管并在室温下缓缓搅拌 0.5 h。为
硫激酶的基－本信息
中文名称硫激酶英文名称thiokinase定 义在ATP存在的条件下，催化脂肪酸的羧基与辅酶A的巯基连接而形成脂肪酰辅酶A，从而使脂肪酸活化进入β氧化途径的酶。此酶至少有三种：短链脂肪酸硫激酶(编号：EC 6.2.1.1)，激活乙酸、丙酸；中链脂肪酸硫激酶(编号：EC 6.2.1.2)，激活4～1
煤炭开发或将引入电气自动化
随着我国煤炭业的兴起，在开发过程中，对于煤炭资源的设备要求也是非常的而严格的。所以电气自动化的介入无疑是给煤炭开发行业一个非常大的发展方向，只有设备达到了先进的水平，那么煤炭开发的力度也会加大。 有产业意识才能够有所发展，在我国已经开始有一些煤炭企业开始了运营的工作试点，将电气自动化引入到
让实验中的抗体乖乖听话
加州大学圣地亚哥分校的细胞生物学家Stephan Lange的论文手稿基本上都准备好了，这时他打算再检查核对一下他的抗体：Lange对缺失G蛋白偶联受体的小鼠样品进行染色，按道理说抗体不会出现信号。然而结果却是它显色了，Lange只好把他论文中基于抗体的这部分删去，而剩下的一部分却不足以吸引人了
蛋白质中的二硫键是如何形成的
又称S－S键。是2个SH基被氧化而形成的—S—S—形式的硫原子间的键。在生物化学的领域中，通常系指在肽和蛋白质分子中的半胱氨酸残基中的键。此键在蛋白质分子的立体结构形成上起着一定的重要作用。为了确定蛋白质的一级结构，首先必须将二硫键打开，使成为线状多肽链。为此，需要在2-巯-乙醇、二硫苏糖类、巯基乙
凝胶中蛋白质的洗脱实验
一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表，但当用于微量的蛋白质时，这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。这一领域较多的早期方法已经发表（HagerandBurgess,1980)，但却需要重新讨论 (butbear
凝胶中蛋白质的洗脱实验
实验步骤 一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质 将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表，但当用于微量的蛋白质时，这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。 这一领域较多的早期方法已经发
凝胶中蛋白质的洗脱实验
SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希望可以利用凝胶的高分辨率特性来获得小量的纯净蛋白质。实验步骤一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由
理化所发现有机合成中的甲硫基化反应
中国科学院理化技术研究所研究员王乃兴课题组近年来开展了大宗化学品的高值转化反应研究，该课题组最近发现，在无任何金属催化剂的条件下，大宗化学品环己酮在I2/DMSO作用下，一锅法得到了甲硫基化的邻苯二酚（图1）。 该一锅反应“一石三鸟”，由反应物环己酮一步得到三官能团化的产物，特色是在甲硫基化的
液体培养基中细菌培养实验
仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 一、过夜培养1. 将5 ml预热的液体培养基移入一无菌的16 mm或18 mm管中。2. 用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min速度，于37°C培养至饱和（1
液体培养基中细菌培养实验
仪器、耗材玻璃瓶烧瓶实验步骤一、过夜培养1. 将5 ml预热的液体培养基移入一无菌的16 mm或18 mm管中。2. 用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min速度，于37°C培养至饱和（1X1
实验过程中抗体选择指导
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素： （1） 分析或应用的类型 （2）样本蛋白的结构性质 （3）样本的种属 （4）抗体宿主的种类 （5）抗体的标记和检测 1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，
食药监或引入警察制度：出现食品违法可直接出警
北京市西城区宣武门26号院近来有点“挤”。 这里是成立不足三个月的国家食品药品监督管理总局(下称“食药监总局”)的办公地点。知情人士告诉《第一财经日报》记者，由于涉及与质检总局等部门的一些职能的合并，人员的增加让办公区域变得紧俏起来。比如不少官员开始与人合用办公室，部分司办也不得不搬到其他
薄荷味使人安心－引入课堂或助学生专心
如何能让小学生专心听讲一直是令老师们头疼的事情。英国一所小学正把薄荷味和自然界的声音引入课堂，观察这种方法能否提高学生注意力。 薄荷安心 英国格林多大学研究人员在利物浦一所小学开展实验：每天下午上课时，研
高效的微波辅助氮硫酰基化和硫酯交换制备硫酯化修饰..
通过高效的微波辅助氮-硫酰基化和硫酯交换制备硫酯化修饰的糖肽Efficient Microwave-Assisted Tandem N- to S-Acyl Transfer and Thioester Exchange for the Preparation of a Glycosylat
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L N
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭试剂 抗体 LB 顶层琼脂糖 LB 平板琼脂培养基 仪器、耗材
盘基网柄菌的培养方法实验——无菌培养基中的培养
实验材料细胞仪器、耗材培养基倒置显微镜Erlenmeyer 瓶实验步骤一、在塑料培养皿上的培养1. 向 1 个 10 cm 的塑料培养皿中加入所选的培养基 10 ml，接种细胞或接种孢子头。每天用倒置显微镜检查平板，以监测细胞的生长和纯度。2. 每三天换培养液一次。将旧培养液吸走，从培养皿的边上加入
蛋白质的二硫键在哪种细胞器中形成
在真核生物细胞中,二硫键一般是在粗面内质网内生成,而非原生质.这是因内质网的氧化环境及原生质的还原环境（参考谷胱甘肽）.所以二硫键多会在分泌的蛋白质、溶酶蛋白质及膜蛋白质的外浆区域中找到.但是亦有例外的情况.在原生质的蛋白质附近出现的半胱氨酸残基会成为氧化感应器,当细胞的还原潜能转弱时,它们氧化及触
分子克隆实验引入寄主细胞的常用方法
常用两种方法：①转化或转染，方法是将重组质粒DNA或噬菌体DNA(M13)与氯化钙处理过的宿主细胞混合置于冰上，待DNA被吸收后铺在平板培养基上，再根据实验设计使用选择性培养基筛选重组子，通常重组分子的转化效率比非重组DNA低，原因是连接效率不高，有许多DNA分子无转化能力，而且重组后的DNA分子比
血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题
1、问：我用的是Gibco胎牛血清澳洲，56℃30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀，是不是污染？还能不能再用？血清的生产日期是2006年7月(现在是2007年6月11日)。 答：应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中，37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的
液体硫乙醇酸盐培养基(FT)
成分 胰酶消化酪蛋白胨 15g L－胱氨酸 0.5g 葡萄糖 5g 酵母膏 5g 氯化钠 2.5g 硫乙醇酸钠 0.5g 刃天青(Resazurin) 0.0
拟南芥中应对硫胁迫的硫的逆向过程
长期以来，植物中的主要（次要）代谢途径一直被认为是将主要代谢产物的前体转化为具有生物活性终产物的一种途径。然而，在环境刺激（如括营养胁迫条件）下，植物组织会出现内源性的终产物降解现象。因此，是否可以将专门的代谢物特别是富含氮和硫的代谢物重新整合到初级代谢中以回收投入其中的资源，对植物来说具有普遍
酶标记抗体或抗原的制备
标记方法应符合：技术方法简单、产率高，且重复性好；标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性；酶标志物稳定，应避免酶、抗体（抗原）以及酶标志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交联法：同源双功能交联剂（1）一步法：连接AP。 ①优点：操作简便、有效，重复性好。②缺点：交联时分子间比例不严格，大小不一，影响效果。（
酶标记抗体或抗原的制备
标记方法应符合：技术方法简单、产率高，且重复性好；标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性；酶标志物稳定，应避免酶、抗体（抗原）以及酶标志物各自形成聚合物等。 1.戊二醛交联法：同源双功能交联剂 （1）一步法：连接AP。 ①优点：操作简便、有效，重复性好。 ②缺点：交联时分子间比例不严格，大小
不要让实验中的抗体成为绊脚石
加州大学圣地亚哥分校的细胞生物学家Stephan Lange的论文手稿基本上都准备好了，这时他打算再检查核对一下他的抗体：Lange对缺失G蛋白偶联受体的小鼠样品进行染色，按道理说抗体不会出现信号。然而结果却是它显色了，Lange只好把他论文中基于抗体的这部分删去，而剩下的一部分却不足以吸引人了