微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验 实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。5. 加入50μl荧光（FITC或PE）标记的第二抗体，室温下避光染色30min。6. 上流式细胞仪检测。 ......阅读全文
荧光染色显示Y染色质法
实验方法原理在间期细胞核中，女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个，在间期时的染色质呈异固缩（Heteropyconosis），呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面，呈三角形或半月形小体，易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
免疫荧光染色技术
抗原物质固定剂固定条件（min）蛋白质抗原95%～100%乙醇室温3～10酶、激素丙 酮4℃ 30免疫球蛋白四氯化碳病 毒丙酮、四氯化碳、无水乙醇室温5～10或4℃ 30～60多糖、细菌等微火加热，甲醇、10%甲醛、丙酮室温5～10或4℃ 30～60类 脂 （异嗜性抗原）10%甲醛，10%佛茂尔（F
骨组织的荧光染色
Fluorescent Label in BoneSome fluorescent compounds, which are fixed in newly formed calcified tissue, are used to label bone deposition. Such labels
组织免疫荧光染色
概述： 织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片，因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构，故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存，防止荧光淬灭。常用的荧光素有：异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发
SYPRO－Ruby－荧光染色实验
实验方法原理到目前为止，在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中，SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了，它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是，如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见，需要一个荧光扫描仪检测（SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是
吖啶橙荧光染色
【临床意义】 红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光，比红细胞系统还要深一些。 淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。 各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸（RNA），所以均发红色荧光
LSCM免疫荧光染色
免疫荧光染色 使用预冷的 PBS 缓冲溶液洗涤细胞，去除残留的培养液。立即加入 4% 多聚甲醛(PFA)固定液。在室温固定15 min。用 PBS 洗涤残留的固定液后，用 0. 5% Triton X-100 处理细胞 5 min，这样可以通透细胞膜，使抗体等大分子能通过细胞膜，进到固定细胞的内部。
细胞免疫荧光染色
实验概要细胞免疫荧光染色实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1
SYPRO－Orange－荧光染色实验
实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器
荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤
免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等，可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample
什么是荧光染色法
用各种可以发荧光的物质来染色微生物样品,如利用荧光染色剂将人的染色体染色,可以通过染色不同,看到显微镜下染色体上的基因
DNA荧光染色的样品制备
试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
荧光抗体染色与结果判断
荧光抗体与抗原反应，一般在25～37℃，30分钟，不耐热抗原的检测则以4℃过夜为宜。(一)直接法：用特异荧光抗体直接滴加于标本上。本法操作简便，特异性高，非特异荧光染色因素少；缺点是敏感度偏低，需制备特异性的荧光抗体。(二)间接法：可用于检测抗原和抗体，普通一抗+荧光二抗。灵敏度高，仅需一种荧光抗体
免疫荧光染色（间接法）
1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的湿度，37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次，10min，用吸水吸去或吹干余留的液体。 2、再滴加间接荧光抗体（如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等），同上步骤，染色30min，37℃，缓冲盐水
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
角膜荧光素染色的概述
角膜荧光素染色法，是一种了解角膜上皮有无缺损及角膜混浊是否为溃疡等的检查方法，可用1%～ 2%荧光素钠滴于下穹窿结膜囊内，1～2分钟后观察，角膜上皮缺损的部位有黄绿着色。 亦作泪膜破裂时间 (BUT) 的测定。
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加入提取
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒 提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材 双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤 3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。原理：免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
荧光抗体染色三大方法
1.直接染色法将标记的特异荧光抗体直接加在抗原标本上，经一定温度和时间的染色，洗去未参加反应的多余荧光抗体，在荧光显微镜下便可见到被检抗原与荧光抗体形成的特异性结合物而发出的荧光。直接染色法的优点是：特异性高，操作简便，比较快速。缺点是：一种标记抗体只能检查一种抗原，敏感性较差。直接法应设阴、阳性标
免疫荧光细胞化学染色方法
一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30
荧光染色观察药物诱导细胞凋亡
【原理】 Hoechst 33258 为特异性 DNA 染料，与 A-T 键结合，这种染料对死细胞或经 70% 冷乙醇固定的细胞可立即染色。而活细胞的着色是渐进性的，在 10min 内可达饱和。在荧光显微镜下，活细胞核呈弥散均匀荧光，出现细胞凋亡时，细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。原理：免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个
免疫荧光细胞化学染色方法
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体
什么是免疫荧光染色诊断
免疫荧光染色诊断:用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体。 用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。原理：免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤