双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒 提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材 双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤 3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加入提取液，在 -20℃ 放置至少 30 min ( 见注释 7) 。( 4 ) 42000 g 离心以除去不溶物，用洗涤液（见注释 8 ) 清洗 3 次 （见注释 8)。( 5 ) 将管子放置在空气中使其干燥。( 6 ) 在溶解液中振荡沉淀 2 h 溶解蛋白（见注释 9) 。( 7 ) 根据 Bradford 法 [ 3，4] 测定蛋白浓度，使用等份样品和血清白蛋白作标准曲线 ( 等份样品是指相同比例的溶液）。3.2 双向凝胶电泳( 1 ) 直接用第一向电泳溶液相匹配的 100 μg 蛋白质溶液水化 IPG 胶条（......阅读全文
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒 提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材 双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤 3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒提取液洗涤液溶解液第一向电泳缓冲液还原溶液烷基化溶液琼脂糖溶液丙烯酰胺凝胶溶液仪器、耗材双向凝胶电泳光扫描仪或密度计实验步骤3.1 可溶性总蛋白的提取方法（三氯乙酸/丙酮法）( 1 ) 从拟南芥细胞悬浮培养液中收集细胞。( 2 ) 液氮中研磨细胞。( 3 ) 向研磨好的细胞粉末中加入提取
双向凝胶荧光染色与成像实验
试剂、试剂盒：提取液 洗涤液 溶解液
双向蛋白电泳仪和凝胶成像系统的区别
双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。 先进行等电聚焦电泳（按照蛋白等电点pI分离）：在胶中加入双性电解质溶液，加上电场后建立稳定PH梯度，蛋白质溶液加入后建立电场，蛋白以不同PI分离开来。 2.然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小）：将上一步的胶加上横向电场，同一PI中聚集
双向琼脂糖凝胶电泳实验
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题.【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构.双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的.双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类：中性/
双向凝胶电泳
双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的，原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小，在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处；第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白
荧光成像与高光成像区别
荧光成像与高光成像区别如下：1、原理：荧光成像是利用荧光标记的分子在激发后发出特定波长的光来成像，而高光成像是基于样本的反射或透射光强度的差异来成像。2、样本处理：荧光成像需要在样本中引入荧光标记物，通常是通过染色或基因工程技术来实现，而高光成像则不需要对样本进行特殊处理，直接观察样本的自然反射或透
荧光化学发光凝胶成像系统可做什么实验
荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光（通常是紫外线或X射线）照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光（通常波长在可见光波段）；而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。在日常生活中，
双向凝胶电泳实验常见问题分析
(1)低拷贝蛋白的鉴定。人体的微量蛋白往往还是重要的调节蛋白。除增加双向凝胶电泳灵敏度的方法外，最有希望的还是把介质辅助的激光解吸/离子化质谱用到PVDF膜上，但当前的技术还不足以检出拷贝数低于1000的蛋白质。(2)极酸或极碱蛋白的分离。(3)极大（>200kD）或极小（
凝胶成像系统组成与部件
那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下嘉鹏凝胶成像系统组成与部件:凝胶成像系统组成构件与核心部件：凝胶成像系统包括成像系统和分析凝胶图片的软件系统。（1）成像系统成像系统包括：相机，暗室，透射仪，UV和白光照明、琥珀色滤光玻片和UV防护罩等小配件。CCD是凝胶图像系统的核心部件。它是电荷耦合
电泳后的凝胶染色实验
实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法，包括：标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇
InstaStain－Blue－凝胶纸染色实验
实验材料经单向凝胶电泳分离后的蛋白质样品仪器、耗材滤纸玻璃板玻璃棒InstaStain Blue Gel Stain Paper微波炉塑料容器实验步骤1.电泳结束后，在一塑料容器中倒入足够浸没凝胶的水，例如，一块典型的 mini 胶（8 cmXl0 cm 或 8 cmX8 cm) 需要 IOOml
定量SDS凝胶染色与扫描
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝（CBB) 染色液脱色液仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置凝胶扫描装置实验步骤 设备SDS-PAGE 电泳装置凝胶扫描装置试剂考马斯亮蓝（CBB) 染色液脱色液(配方，见“试剂的配制”，PP.184~189)操作程序1) 小心地在 SDS 凝胶泳道上加一组按量递增为序的蛋
定量SDS凝胶染色与扫描
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝（CBB) 染色液 脱色液 仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 凝胶扫
定量SDS凝胶染色与扫描
大多数蛋白质虽然每毫克能结合大致相同量的染料，但不同蛋白质之间结合染料的能力仍有 10% 或更大的差异。因此，本法所得的数值不是非常准确的，除非你能用相同的蛋白质作标准来测定蛋白浓度。不过，一般说来，CBB 染色要比银染准确得多。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒考马斯
SYPRO－Ruby－荧光染色实验
实验方法原理到目前为止，在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中，SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了，它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是，如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见，需要一个荧光扫描仪检测（SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是
SYPRO－Orange－荧光染色实验
实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器
凝胶成像仪凝胶成像定义
图像分析程序，适用于ID胶、斑点/狭缝印迹、平板、菌落、放射自显影、多排胶、蛋白胶、GFP、PCR、考马斯亮蓝及银染的胶及ZYMA胶；可进行凝胶图像分析、克隆计数分析、手动条带定量和斑点分析。
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
方案4 双向凝胶电泳脑脊液蛋白样品的制备实验实验方法原理可用乙醇沉淀人类脑脊液以浓缩其中的蛋白质和除去盐分，否则这些物质会干扰第一向 IEF。实验材料人类脑脊液试剂、试剂盒乙醇NaOH增溶溶液β-巯基乙醇仪器、耗材离心管冷冻离心机超声波仪实验步骤1.在室温下解冻脑脊液样品。当样品解冻后，旋紧试管盖，
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
实验方法原理 肝与其他动物组织一样，可制备用作双向电泳的材料。离心之后，溶于合适的溶液中即可。不需要浓缩蛋白质或去除干扰物质等额外步骤。所用抽提溶液包括脲、硫脲和酰胺烷基硫代甜采碱去垢剂ASB-14，它们配合使用可最大量地溶解蛋白质。实验材料 鼠肝试剂、试剂盒 二硫苏糖醇（DTT)抽提溶液苯甲基硫酰
固相化－pH－梯度双向凝胶电泳实验
方案1 双向凝胶电泳鼠肝蛋白质提取物的制备实验 方案2 双向凝胶电泳真核生物细胞裂解物的制备实验 方案3 双向凝胶电泳大肠杆菌裂解液的制备实验 方案4 双向凝胶电泳脑脊液蛋白样品的制备实验 方案5 第一向：蛋白质的等电聚焦电泳实验
双向凝胶电泳原理
1、根据蛋白质的等电点（第一向）和分子量（第二向）的不同进行分离。2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色，然后用相关软件对电泳图象进行分析。
选择凝胶成像让实验更简单
随着科学技术的不断进步，我们能够通过凝胶成像系统解决很多以前科学当中不能够解决的相关实验，所以凝胶成像系统的出现，让我们能够解决很多以往的一些问题。这也就让我们的实验更加的简便。凝胶成像系统的出现，让我们在解决部分疑难问题的时候，可以有一个新的解决办法，所以如果想要好好的利用凝胶成像系统，那么我们就
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
凝胶成像仪的凝胶成像种类
（1）UV凝胶成像分析系统：可以对蛋白电泳凝胶，DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析，样品包括：EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、
免疫荧光实验TIRF成像
Kindlin-2和talin共同作用于桩蛋白激活整合素的表达 整合素是一种跨膜蛋白，在介导细胞黏附到细胞外基质（ECM）过程中发挥重要的作用。整合素在和配位体结合并发挥作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血细胞中介入激活整合素这一过程的原理并不十分清晰。美国的科研人员发现
活体成像中荧光染料的选择与成像
Cy5.5（Ex/Em：678/701 nm）和Cy7（Ex/Em：749/776 nm）是对分子标记的最优选择之一；DiD（Ex/Em：644/663 nm）、DiR（Ex/Em：748/780）染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。 一、Cy5.5 、Cy7 Cy5.5 、Cy7避开了可见
荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤
免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等，可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec
细胞免疫荧光染色实验
实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec