制备肌动蛋白实验
从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白 由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白 将肌动蛋白纯化成纯品 实验材料 肌球蛋白 试剂、试剂盒 肌球蛋白抽提溶液 仪器、耗材 离心机 实验步骤 1. 抽提肌球蛋白时得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物体积的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分钟。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1......阅读全文
肌动蛋白的结构和功能特点
它的氨基酸序列也是最高度保守的蛋白质之一,因为它在进化过程中几乎没有变化 ,在藻类和人类等多种物种中的差异不超过20%。它有两个显着特征:它是一种缓慢水解 ATP的酶 ,是生物过程的“通用能量货币”。 但是,ATP是必需的,以保持其结构完整性。其高效的结构由几乎独特的折叠过程形成。此外,它能够比任何
细胞肌动蛋白的功能和位置
肌动蛋白形成细丝('F-肌动蛋白'或微丝),其是真核细胞骨架的必需元件,能够经历非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对于细胞中的许多关键功能是必不可少的:各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运输途径以
细胞肌动蛋白的具体形式
细胞肌动蛋白有两种形式:称为G-肌动蛋白的单体小球和称为F-肌动蛋白的聚合物长丝(即,由许多G-肌动蛋白单体组成的长丝)。 F-肌动蛋白也可以描述为微丝。两条平行的F-肌动蛋白链必须旋转166度才能正确地位于彼此的顶部。这产生了在细胞骨架中发现的微丝的双螺旋结构。 微丝的直径约为7nm ,螺旋每37
肌动蛋白的功能和位置介绍
肌动蛋白形成细丝('F-肌动蛋白'或微丝),其是真核细胞骨架的必需元件,能够经历非常快速的聚合和解聚动力学。在大多数细胞中,肌动蛋白丝形成更大规模的网络,这对于细胞中的许多关键功能是必不可少的: 各种类型的肌动蛋白网络(由肌动蛋白丝制成)为细胞提供机械支持,并提供通过细胞质的运
关于肌动蛋白丝的功能简介
微丝除参与形成肌原纤维外还具有以下功能: 形成应力纤维 非肌细胞中的应力纤维(stress fiber)与肌原纤维有很多类似之处:都包含肌球蛋白II、原肌球蛋白、细丝蛋白和α-辅肌动蛋白。培养的成纤维细胞中具有丰富的应力纤维,并通过粘着斑固定在基质上。在体内应力纤维使细胞具有抗剪切力。 小
肌动蛋白丝的化学结成介绍
肌动蛋白单体(又被称为G-Actin,全称为球状肌动蛋白,Globular Actin,下文简称G肌动蛋白)为球形,其表面上有一ATP结合位点。肌动蛋白单体一个接一个连成一串肌动蛋白链,两串这样的肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝。这种肌动蛋白多聚体又被称为纤维形肌动蛋白(F-Actin,Fibr
肌动蛋白丝的微观结构简介
微丝是双股肌动蛋白丝以螺旋的形式组成的纤维,直径为7纳米,螺距为36纳米,两股肌动蛋白丝是同方向的。肌动蛋白纤维也是一种极性分子,具有两个不同的末端,一个是正端,另一个是负端。 微丝与它的结合蛋白(binding protein)以及肌球蛋白(myosin)三者构成化学机械系统,利用化学能产生
肌动蛋白(Actin)动力学调节机制
细胞骨架的定义分为狭义和广义两种,前者是微丝,微管和中间纤维的总称,它们存在于细胞质内,又被称为“胞质骨架”。后者还包括细胞外基质(extracellular matrix)、核骨架(nucleoskeleton)和核纤层(nuclear lamina)。细胞骨架是细胞内运动,细胞器固定,细胞外型维
肌动蛋白动力学信号通路研究背景
细胞外信号通过G蛋白偶联受体(GPCR)、整合素和受体酪氨酸激酶(RTK)调节肌动蛋白动力学。GPCR构成了一个受体的大蛋白家族,它感知细胞外的分子并激活细胞内的信号转导途径,最终激活细胞反应。整合素是跨膜受体,是细胞间和细胞外基质相互作用的桥梁。当被触发时,整合素反过来触发通向内部的化学途径(信号
小鼠β肌动蛋白(βactin)酶联免疫分析(ELISA)
小鼠β-肌动蛋白(β-actin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中β-肌动蛋白(β-actin)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠β-肌动蛋白(β-actin)水平。用纯化的小鼠
肌动蛋白丝的组装过程简介
微丝能被组装和去组装。当单体上结合的是ATP时,就会有较高的相互亲和力,单体趋向于聚合成多聚体,就是组装。而当ATP水解成ADP后,单体亲和力就会下降,多聚体趋向解聚,即是去组装。高ATP浓度有利于微丝的组装。所以当将细胞质放入富含ATP的溶液时,细胞质会因为微丝的大量组装迅速凝固成胶。而微丝的
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验
肌球蛋白的纯化 DEAE纯化肌肉肌球蛋白 实验材料 冷冻肌肉 试
ACTG2肌动蛋白的结构特点及作用
肌动蛋白是高度保守的蛋白质,参与各种类型的细胞运动和维持细胞骨架。脊椎动物中有三种肌动蛋白,α,β和γ。α-肌动蛋白存在于肌肉组织中,是收缩装置的主要组成部分β和γ-肌动蛋白在大多数细胞类型中共存,作为细胞骨架的组成部分,并作为细胞内运动的调节剂。这个基因编码肌动蛋白γ2;在肠组织中发现的一种平滑肌
ACTL6A肌动蛋白的结构特点及作用
该基因编码肌动蛋白相关蛋白(arps)的一个家族成员,与传统肌动蛋白具有显著的氨基酸序列同源性。肌动蛋白和ARPs都有肌动蛋白折叠,这是ATP结合裂缝,是一个共同的特征ARPs参与多种细胞过程,包括囊泡转运、纺锤体定向、核迁移和染色质重塑该基因编码哺乳动物BAF(BRG1/brm相关因子)复合物的5
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验
实验材料 冷冻肌肉试剂、试剂盒 肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材 玻璃器皿实验步骤 1. 准备下面的贮存液(都冷却到 4℃)。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水(dH2O)4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验
肌球蛋白的纯化DEAE纯化肌肉肌球蛋白实验材料冷冻肌肉 试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液
肌动蛋白7a突变导致先天性失聪失明
上海光源用户发现肌动蛋白7a突变如何导致先天性失聪失明 上海光源用户香港科技大学(科大)生命科学部讲座教授张明杰及他的研究团队2月11日在《科学》(Science 2011, 331, 757)杂志上发表了题为 Structure of MyTH4-FERM Domains in
技术和方案13-已固定细胞的肌动蛋白染色
试剂、试剂盒PBS固定液实验步骤鬼笔环肽专一性地结合 F 肌动蛋白,荧光标记的鬼笔环肽染细胞与肌动蛋白抗体的染色模式类似。1.在 500 ml 三角瓶中振荡培养 25 ml 酵母菌至密度为 2X107 个/ml。2.添加 17 ml 10% 甲醛(EM 电子显微级)到培养基中至终浓度 4%,在酵母菌
肌动蛋白丝的组装和去组装的调节
微丝的组装和去组装受到细胞质内多种蛋白的调节,这些蛋白能结合到微丝上,影响其组装去组装速度,被称之为微丝结合蛋白(association protein)。 微丝的组装先需要“核化”(nucleation),即几个单体首先聚合,其它单体再与之结合成更大的多聚体。Arp复合体(Actin rel
α肌动蛋白(αActin)ELISA检测试剂盒使用说明
使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本α肌动蛋白(αActin)含量。试验原理:αActin试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知αActin浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将αActin和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP
酵母遗传学方法10:固定化细胞的肌动蛋白染色
固定化细胞的肌动蛋白染色1.培养细胞到对数生长期(约107细胞/ml)。2.直接取0.1ml甲醛加到含有1ml培养物的离心管中固定细胞(甲醛浓度为3.7%;标准母液是37%)。3.在甲醛中培养细胞30分钟或稍长时间。4.用PBS洗两次,离心5分钟收集细胞。5.用50μl的PBS悬浮细胞,加5个单位的
科学家首次发现促进肌动蛋白成熟的蛋白酶
肌动蛋白参与肌肉收缩、细胞分裂和细胞运动等重要生理过程,但是肌动蛋白如何从非活性的前体被加工成为活性状态尚待揭示。荷兰癌症研究所的科研人员发现了一种调控肌动蛋白成熟的蛋白酶。相关成果在《Science》发表,论文的标题为:Actin maturation requires the ACTMAP/
Science:揭示CLIP170微管加快肌动蛋白丝延长机制
在一项新的研究中,来自美国布兰迪斯大学的一个研究小组证实在细胞中发现的CLIP-170微管(即结合着CLIP-170蛋白的微管)紧密地结合到蛋白formin上,从而加快肌动蛋白丝延长。该小组将一种荧光蛋白加入到这种微管中以便更好地理解蛋白CLIP-170在肌动蛋白丝组装中的作用。相关研究结果发表
人血清、血浆相关液体样本中α平滑肌肌动蛋白(αSMA)检测
实验概要本实验采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶
YIJI细胞骨架(肌动蛋白单体;GACTIN)红色荧光染色试...
YIJI细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒使用说明主要用途 YIJI细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂是一种旨在使用德克萨斯红标记的DNA酶I,探寻细胞骨架的肌动蛋白单体的分布和局部定向变化状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。
α横纹肌肌动蛋白(αSCA)ELISA检测试剂盒使用说明
使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)含量。试验原理:α-SCA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知α-SCA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将α-SCA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白
实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH
肌动蛋白基因为什么可以作为荧光定量pcr的内参基因
肌动蛋白基因可以作为荧光定量pcr的内参基因的原因是:内参基因相当于一个标尺,具有校正作用,避免待测样本回收率或者加样误差等因素带来的差异。具有标准化作用,内参基因表达相对稳定,以其为参照,反应基因表达水平的变化。根据查询相关信息显示引入内参基因进行了归一化处理,可以最大限度地减少样本制备,处理时产
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验——肌球蛋白的纯化
实验材料冷冻肌肉试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 准备下面的贮存液(都冷却到 4℃)。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水(dH2O)4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol/L C
α辅肌动蛋白4(ACTN4)ELISA检测试剂盒使用说明
使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本α辅肌动蛋白4(ACTN-4)含量。试验原理:ACTN-4试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ACTN-4浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ACTN-4和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的H