人CD34+细胞分选
实验概要人CD34 细胞分选主要试剂HSCs培养液、造血干细胞分选缓冲液、 CD34 磁珠分选试剂盒主要设备磁珠分选系统,离心机,超净台,体视镜,倒置镜,30μm细胞筛,细胞计数仪实验步骤(1)用DPBS将30μm细胞筛润湿,过滤分离得到的单个核细胞,去除细胞团块。(2)用细胞计数仪进行细胞计数,根据细胞数来确定使用的柱子数量。(3)过滤后的单个核细胞2000 r/min离心4min。(4)弃上清,用300 μl的造血干细胞分选缓冲液重悬细胞。(5)每1×108细胞加100 μl的FcR阻断剂和100 μl的CD34磁珠。(6)混匀后在4~8°C冰箱中孵育30 min。(7)每1×108细胞加5~10 mL造血干细胞分选缓冲液洗涤细胞,室温2000 r/min离心10 min。(8)弃上清,把1×108细胞重悬在500 μl缓冲液中。(9)细胞分选①在分选器上安装分选柱。② 用造血干细胞分选缓冲液润洗分选柱。③ 把细胞悬液加入到......阅读全文
兔CD34分子(CD34)酶联免疫分析
兔CD34分子(CD34)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定兔子细胞裂解液或其它相关生物液体中CD34 的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔CD34分子(CD34)水平。用纯化的兔CD34分子(CD34)抗体包被微孔板,制成固相抗
CD34的结构和功能
CD34:CD34是一种属于I型跨膜蛋白的磷酸糖蛋白,主要在造血(祖)细胞上表达。通过实验发现在培养条件下CD34+细胞比CD34-细胞具有更强的克隆能力,证实CD34+上皮细胞比CD34-上皮细胞具有更高的增殖潜能。此外证实CD34+细胞位于毛囊的隆突部,它们处于静止期或在培养条件下有巨大的克隆能
CD34阳性细胞计数1
外周血现已被广泛地被用作骨髓移植、癌症患者接受大剂量化疗或放疗后骨髓重建造所需血干细胞(Hemotopoietic Progenitor Cells HPC)的来源。外周血源性干细胞现主要被运用自体移植,其应用面也逐步拓展至异基因骨髓移植中。使用外周血替代骨髓作为造血干细胞的来源有着以下优点:1,易
CD34阳性细胞计数2
其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查,如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异,但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展,他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并
免疫磁珠分离及流式细胞仪分选纯化外周血CD34~+/CD90~+
摘要:目的 建立人外周血 CD34 +细胞及其亚群的纯化分离方法。方法 用干细胞采集仪收集了3例病人的外周血干细胞,应用免疫磁珠分离柱快速分离其中的CD34+细胞,随后采用分选型 EPICS Elite 流式细胞仪进一步分选出CD34 +/ CD90 +双阳性早期造血干细胞。结果 免疫磁珠分离纯化后
一些干细胞标志物
胚胎干细胞的标志物 Oct-4: Oct-4(也叫Oct-3或Oct3/4)属POU转录因子一员,最初鉴定为DNA结合蛋白,可通过顺式元件活化基因转录。它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。该表达对于维持干细胞的自我更新和多能性是必要的。4 ES的分化导致Oct-4的下调。5 Oct-4不仅是细
绝对计数的原理及意义
原理 干细胞计数是根据血液中不同血细胞的特性,选择特异性标记物,采用多参数分析的方法,排除细胞之间的干扰,识别出不同的细胞并分类计数。具体而言,针对干细胞核酸含量高、大小与大淋巴细胞相近、粒度与淋巴细胞相似、CD45 表达弱、CD34 表达强的特点,首先可通过核酸染料标记所有的有核细胞(包括白
绝对计数的原理
干细胞计数是根据血液中不同血细胞的特性,选择特异性标记物,采用多参数分析的方法,排除细胞之间的干扰,识别出不同的细胞并分类计数。具体而言,针对干细胞核酸含量高、大小与大淋巴细胞相近、粒度与淋巴细胞相似、CD45 表达弱、CD34 表达强的特点,首先可通过核酸染料标记所有的有核细胞(包括白细胞和幼
自体造血干细胞移植的步骤—体外净化的简介
由于移植物中残留的白血病细胞是造成移植后白血病复发的根源,也是自体造血干细胞移植疗效差于异体造血干细胞移植的最重要的原因。因此,近20年来移植专家一直在尝试各种体外净化的方法,以最大限度地减少移植物中残存的白血病细胞,同时又尽可能完好保留正常的造血干细胞。 (1)药物清除国外应用最多的是4-氢
CD34+-细胞的扩增
实验概要CD34 细胞的扩增主要试剂DPBS、HSCs培养液主要设备超净台,倒置显微镜,移液枪,细胞计数器实验步骤(1)分选得到CD34 细胞后用HSC培养液在培养板上进行悬浮培养。(2)每隔2~3天进行半量换液,并进行细胞计数得到生长曲线,培养至19天时细胞增殖约260倍。
纤维细胞的结构特点
纤维细胞表达几种造血细胞标志物,包括PTPRC和淋巴细胞特异性蛋白-1。纤维细胞像巨噬细胞一样,表达细胞粘附分子CD11b、CD11c和CD11d4、主要组织相容性复合体、CD80和CD86等抗原呈递因子,以及脑啡肽酶和丙氨酸氨基肽酶等细胞表面酶。在某些情况下,还有CD163等清道夫受体。经人工培养
造血干细胞知识点
造血干细胞是一类具有高度自我更新能力,并有进一步分化能力的最早的造血细胞。造血干细胞具有以下一般特征:①缺乏特异系列抗原表面标志。②多数细胞处于G0期,即静止期。③低表达或不表达CD38和HLA-DR。④绝大多数表达CD34和Thy-1(CD34 + Thy-1 + )。造血干细胞具有自我更新能力造
造血干细胞知识点
造血干细胞是一类具有高度自我更新能力,并有进一步分化能力的最早的造血细胞。造血干细胞具有以下一般特征: ①缺乏特异系列抗原表面标志。 ②多数细胞处于G0期,即静止期。 ③低表达或不表达CD38和HLA-DR。 ④绝大多数表达CD34和Thy-1(CD34 + Thy-1 + )。 造血
流式细胞分选仪检测CD34+细胞比率
实验概要流式细胞分选仪(Flow Activated Cell Sorter,FACS)检测CD34 细胞比率主要试剂DPBS,流式缓冲液,CD34-FITC抗体,0.5% BSA-DPBS主要设备流式细胞仪,离心机,超净台,体视镜,倒置显微镜实验步骤(1)取1×105个待检测的细胞,加5 mlDP
造血干细胞的主要特征和表面标志
造血干细胞最早产生于胚胎卵黄囊,妊娠4周出现于胚肝;妊娠5个月至出生后,造血干细胞主要来源于骨髓。造血干细胞具有自我更新和分化两种重要潜能,在造血组织微环境中.可增殖分化为各种功能不同的血细胞,因此又称多能造血干细胞。CD34和CD117是人类造血干细胞表面主要标志,应用CD34单克隆抗体可从骨髓、
关于皮肤干细胞的其他分子标志介绍
1、P63:P63是肿瘤抑制因子之一,结构和功能与P53类似;Pellegrini等发现在角膜缘的基底细胞有P63表达,在角膜表面的短暂增殖细胞没有P63表达,因而认为P63是表皮干细胞的标志物。 2、CD71:CD71为表皮干细胞表面转铁蛋白受体。从细胞数量、形态、分布部位和所含标记保留细胞
绝对计数的意义是什么
对于有剂量要求的干细胞移植方案而言,精确的干细胞计数显然十分重要。研究表明,需要输入病人体内的 CD34阳性细胞量取决于病人的体重,每公斤体重应输入2百万至5百万个CD34阳性细胞。此重要性也显示在动员及白细胞分离过程中,如通过计数细胞水平判断动员是否成功、何时为最佳采集时间以及采集到的干细胞数
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干 /祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及 APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种 FACS检测CD
颅内孤立性纤维性肿瘤病例报告
颅内孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumor,SFT)是一种起源于肌纤维母细胞的间质性肿瘤,约占中枢神经系统肿瘤的0.25%。本文回顾性分析2012年3月至2017年2月术后病理证实的8例颅内SFT的临床资料,并结合文献进行复习。 1.资料与方法 1.1一般资料 8例中,男6例
跨右侧小脑幕上下孤立性纤维瘤病例分析
孤立性纤维瘤(solitary fibrous tumors,SFTs)是一种少见的梭形细胞肿瘤,1931年由Klemperer等首次提出。此类肿瘤好发于胸膜腔,胸膜外其他组织也可发生。大多数SFTs表现为良性或交界性,恶性较少见。中枢神经系统的SFTs相对较少见,现将我科收治的1例颅内孤立性纤维瘤
人CD34+细胞分选
实验概要人CD34 细胞分选主要试剂HSCs培养液、造血干细胞分选缓冲液、 CD34 磁珠分选试剂盒主要设备磁珠分选系统,离心机,超净台,体视镜,倒置镜,30μm细胞筛,细胞计数仪实验步骤(1)用DPBS将30μm细胞筛润湿,过滤分离得到的单个核细胞,去除细胞团块。(2)用细胞计数仪进行细胞计数,根
原幼淋巴细胞形态知多少
平时工作中我们会遇见种种幼稚淋巴细胞,今天我把常见的几种形态综合起来与大家分享!第1例:1.免疫表型 异常细胞群占有核细胞的83.76%,表达HLA-DR,CD10,TDT ,CD34,CD9,CD38,cCD79a;弱表达CD22,CD117 ;不表达CD33,CD34,CD
利用流式细胞仪检测CD34+方法异同点
相关专题实验室的CT-流式细胞仪应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBS C)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方
冬眠瘤的检查
1.组织病理学 良性肿瘤,根据多角形棕色脂肪细胞的含量和形态、伴有小血管增生的情况及间质背景情况的不同,将冬眠瘤分为6种亚型:颗粒状或嗜酸细胞型、混合型、浅染型、脂肪瘤样亚型、黏液样亚型、梭形细胞亚型。罕见分裂象和细胞异型性。 2.免疫表型 肿瘤细胞不同程度表达S-100,梭形细胞亚型中梭
先天性成纤维细胞结缔组织痣病例总结
成纤维细胞结缔组织痣(Fibroblastic connective tissue nevi,FCTN)是一种良性肿瘤,多数发生于儿童和年轻成人,先天性发病者罕见。近期,法国巴黎笛卡尔大学的 Bouaoud J 博士在 Pediatr Dermatol 上报告了 3 例 FCTN,一起学习下
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验1
从CB-MNCs中分离CD34+细胞实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒灭菌培养基过柱缓冲液FcR阻断剂CD34微球仪器、耗材柱子(MS+ RS+或LS+ VS+)磁珠细胞分离仪尼龙过滤网 30μm实验步骤(a)准备过柱缓冲液,用抽真空装置去除气体。(b)每108个CB-MNCs用终体积300μL缓冲
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞 体外扩增CD34+细胞 饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞 实验方法原理
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞体外扩增CD34+细胞饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞实验方法原理实验材料CB-MNCs 试剂、试剂盒灭菌培养基