使用流式细胞仪进行人类单核细胞亚群的全血染色

一、材料与试剂1. 抗体(1)鼠抗人CD56FITC(BD,340410)(2)鼠抗人CD2FITC(BD555326)(3)鼠抗人CD19FITC(555412)(4)鼠抗人CD14PerCP(Invitrogen,MHCD1431)(5)鼠抗人CD16PacBlue(BD,558122)(6)鼠抗人HLA-DRAPC-Cy7(BioLegend,307617)2. 其他材料(1)带K3EDTA的玻璃全血管(BDVacutainer366450)(2)10×BDFACS裂解液(BDPharmigen349202)(3)20%甲醛(Tousimis1008A)(4)PBS(CalciumandMagnesiumfree,Gibco20012-027)(5)5 mL 聚丙烯管(BDFalcon352063)二、仪器1. BDLSRII流式细胞仪三、步骤1. 将人血加入到带K3EDTA的玻璃全血管,然后轻摇几次混合血液。2......阅读全文

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

流式细胞仪实验方法1

流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板1.活化2.活化检测3.网织血小板 五、红细胞1.网织红细胞2.

临床新鲜全血的合理输注

我国输血事业的发展各地差异较大,与发达国家相比,仍处于比较落后的状态。具体表现是不少地区成分输血的比例不高,个别医生还习惯于输全血。有些医生认为全血内含有各种血液成分,凡有输血指征者输全血比较好;有些医生认为新鲜血比保存血好,并认为越是新鲜的血越好;有些医生认为急性失血失掉的是全血,只有输全血才合理

全血乳酸测定的注意事项

  检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。  检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。血乳酸测定时取样时间非常重要,安静值应在早晨起床前安静时采样;运动后血乳酸的测定应根据不同

血液的化学检验项目全血黏度

全血黏度介绍:  全血黏度指血液流动时,邻近两层平行流体层互相位移时的摩擦而形成的阻力。全血黏度是血清黏度、血细胞比容、红细胞变形性和聚集能力、血小板和白细胞流变特性的综合表现。另外,血黏度还受血液理化性质(如温度、酸碱度、血浆渗透压等)、血管因素等影响。血黏度还与血流灌流量有关,因此全血黏度又有高

全血乳酸测定的检查过程

  精密称取供试品1g,精密加水50mL,再精密加入氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL,煮沸5分钟,加酚酞指示液2滴,趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定,至溶液显粉红色,并将滴定的结果用空白试验校正,记录消耗硫酸滴定液的体积数(mL),每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于90.

全血乳酸测定的临床意义

  异常结果  检查结果为乳酸过量  休克状况的评估  血乳酸升高常见于循环性休克的患者,循环性休克(严重低血压)可由血容量的减少(失血或脱水),心输出量减少或脓毒血症(脓毒性休克)性血流紊乱等引起。  冠状动脉分流术  主动脉内球囊起博器植入术  主动脉内球囊起博器植入术(IABP)有时作为在心外

流式细胞术在免疫学中的应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是二十世纪70年代发展起来的,是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术,能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选,且能保持细胞及细胞器或微粒

单核细胞增生李斯特氏菌的形态与染色

  该菌为革兰氏阳性短杆菌,大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯,两端钝圆,常呈V字型排列,偶有球状、双球状,兼性厌氧、无芽胞,一般不形成荚膜,但在营养丰富的环境中可形成荚膜,在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性,该菌有4根周毛和1根端毛,但周毛易脱落。 [2]   幼龄培养物为革

流式细胞术(FCM)简介

流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,广泛应用于基础临床研究和临床实践各个方面, 希望我们的工作能给您的科研和临床诊治带来一定的帮助,  也希望您能给与我们的工作一定的支持!检测项目有:1,淋巴细胞亚群 2,HLA-B27  3,白血病免役分型    4,DNA倍体分析 5,血

怎样对流式细胞仪进行校准?

  流式细胞仪的校准包括流路的稳定性、光路的稳定性、多色标记荧光颜色补偿、光电倍增管转换的线性和稳定性。对仪器的校准主要是利用标准微球进行监测。聚苯乙烯可以被做成各种大小的微球,也可被荧光标记或者拥有定量免疫球蛋白的结合位点。这种制成固定荧光强度、大小和光散射性的聚苯乙烯微球,已成为流式质控中的一个

关于血涂片染色的操作步骤介绍

  1、血涂片染色— 用毛细吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL,或者直接采集患者末梢血,将血滴滴至载玻片的一端约1CM处或整片的3/4端。有磨砂片的玻片,可在接近磨砂头的部位来水反复冲洗,然后擦干备用。  2、血涂片染色— 左手持载玻片,右手持玻片,将推片接近血滴处,然后轻轻接触血滴并压在血滴上

简述血涂片染色的制作方法

  血涂片染色的制作方法:  ①采血、制血膜、水平放置血膜片晾干。  ②血膜片固定于甲醇 2~ 3min,取出晾干。  ③用蜡笔在血膜片两端划一染色区,避免染色时染液外溢 。  ④往血膜片滴加瑞氏染液 (瑞氏染料 0.1g+甲醇 60m1),数十秒钟后 ,再加一倍于染液的蒸馏水 ,染色 5~8min

不成熟网织红细胞片断和网织红细胞成熟指数(2)

最初,网织红细胞的流式细胞分析在多功能的流式细胞仪专门使用,复杂的程序和荧光染色。这些程序在某些流式细胞仪上自动化,比如EPICS XL及MLL使用流式sysmex ⅡTM微软和Roril染色。一种专门的网织红细胞分析仪,sysmex TmR系统由东亚医疗电器研制;可较大的实验室提供精确精密度,且不

怎么做全血质控图?

近年来,高科技术在医疗领域的渗透和应用,使得血红胞分析仪得到了迅猛的发展,血细胞分析仪由于其操作简便、测定快捷,计数结果准确度高、精密性好,已逐渐取代传统的手工操作方法,成为各大、中型医院临床实验室的主要检测手段。由于不同的血细胞分析仪生产厂家各自使用的测定原理和方法不尽相同,使得其测定结果及参考范

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞

人类染色体的分类介绍

  人类染色体可分为两种类型:常染色体(体染色体)和性染色体(异体染色体)。某些遗传特征与一个人的性别有关,并通过性染色体传播。常染色体因此包含其余部分的遗传信息。常染色体和性染色体的复制、有丝分裂和减数分裂过程一致。  人类细胞有 23 对染色体(22 对常染色体和一对性染色体),即每个细胞共有

简述人类染色体的类型

  人类染色体可分为两种类型:常染色体(体染色体)和性染色体(异体染色体)。某些遗传特征与一个人的性别有关,并通过性染色体传播。常染色体因此包含其余部分的遗传信息。常染色体和性染色体的复制、有丝分裂和减数分裂过程一致。  人类细胞有23对染色体(22对常染色体和一对性染色体),即每个细胞共有46个染

人类染色体的临床应用

  细胞核中染色质的性别差异称为核性别(nuclear sex)。染色质在临床上的应用主要有  两方面:其一,临床上疑为性染色体异常的患者,可检查患者的间期细胞的性染色质,作出初步诊断。例如:Turner综合征患者(核型为45,X),X染色质和Y染色质均阴性,而47,XXY患者,X和Y染色质均 阳性

人类染色体的主要类型

人类染色体可分为两种类型:常染色体(体染色体)和性染色体(异体染色体)。某些遗传特征与一个人的性别有关,并通过性染色体传播。常染色体因此包含其余部分的遗传信息。常染色体和性染色体的复制、有丝分裂和减数分裂过程一致。

人类全基因组测序计划

  全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。 1986年, Renato Dulbecco是Z早提出人类基因组测序的科学家之一。他认为如果能够知道所有人类基因的序列,对癌症的研究将会很有帮助。美国能源部(DOE)与美国国家卫生研究院(NIH),分别在1986年与1987年加入人类基

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板1.活化2.活化检测3.网织血小板 五、红细胞1.网织红细胞2.PNH3.胎儿红

经腹腔镜全子宫切除术后进行性高乳酸血症病例分析

患者,女,48岁,因“发现子宫肌瘤2年,继发痛经3月”入院,拟在全麻下行“经腹腔镜全子宫切除术”。既往有高血压病史,间断口服降压药(具体不详),否认“糖尿病史”及手术外伤史。术前检查均未见异常。 患者入室后BP140/80 mm Hg,SpO2 98%,麻醉诱导采用咪达唑仑0.05mg/kg、丙泊酚

细胞亚群分析

实验概要对一群细胞依据是否表达特定蛋白进行亚群分析是细胞鉴定中的常用实验。一般通过特异性抗体标记细胞,通过流式细胞术或磁珠等方法分离细胞。实验原理利用抗原抗体反应,使表达目标抗原的细胞带上标记,通过流式细胞仪或磁珠,对带有标记的细胞进行分选/分析。这种方法结合流式细胞术和免疫染色,能够快速、大量、特

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

流式细胞检测

技术原理       流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。是一种在液体系统中,测定单个细胞或细胞器的生物、物理和化学特性,并根据这些特性将所需要的细胞或细胞器进行定量分析和分选的技术。它是一种可以检测细胞或者生物学颗粒的多种特性的技

进行性风疹全脑炎的病理生理

  病理改变可见脑膜、皮质和白质血管周围淋巴细胞和浆细胞侵润,神经胶质增生、广泛脱髓鞘和白质萎缩,伴微动脉纤维素样退行变和矿物质沉积血管炎。

进行性风疹全脑炎的诊断检查

  本病多在20岁发病,行为改变、认知障碍[2]和痴呆常为首发症状,表现小脑性共济失调,肌阵挛不如SSPE明显,可有癫痫发作。无头痛、发热和颈强等,病程与SSPE相似,发展至昏迷、脑干受累于数年内死亡。

进行性风疹全脑炎的症状体征

  本病多在20岁发病,行为改变、认知障碍和痴呆常为首发症状,表现小脑性共济失调,肌阵挛不如SSPE明显,可有癫痫发作。无头痛、发热和颈强等,病程与SSPE相似,发展至昏迷、脑干受累于数年内死亡。EEC为弥漫性慢波,无周期性,CT可见脑室扩大。CSF淋巴细胞增多、蛋白增高,血清和CSF抗风疹病毒抗全