电子显微镜的使用与细胞超微结构观察
一、 实验目的(1) 了解透射 电子显微镜 的主要结构、功能与基本工作原理;(2) 了解扫描 电子显微镜 的主要结构、性能与基本工作原理。 二、 实验步骤(讲解演示)1)透射电镜样品超薄切片常规制作规程1.取材:根据实验目的取材,要求部位准确,体积小于2mm32.醛类固定:用2%-3%的戊二醛固定2小时;3.清洗:用磷酸 缓冲液 清洗3次,每次10min;4.锇酸固定:用1%-2%的锇酸固定2~3小时;5.清洗:用磷酸 缓冲液 清洗3次,每次10 min;6.脱水:用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脱水各15min,再用100%乙醇脱水3次,每次30min;7.置换:用环氧丙烷或丙酮置换3次,每次30min;8.浸渍:10hr以上,浸渍过程如下:①丙酮:包埋剂=3:1的浸渍液浸渍(动物样品1hr,植物样品2~3hr);②丙酮:包埋剂=1:1的浸渍液浸渍(动物样品1hr,植物样品2~3hr);③丙酮:包埋剂=1:3的浸渍液浸......阅读全文
使用透视电子显微镜观察生物样品前的预先处理
在使用透视电子显微镜观察生物样品前样品必须被预先处理。随不同研究要求的需要科学家使用不同的处理方法。 1. 固定:为了尽量保存样本的原样使用戊二醛来硬化样本和使用锇酸来染色脂肪。 2. 冷固定:将样本放在液态的乙烷中速冻,这样水不会结晶,而形成非晶体的冰。这样保存的样品损坏比较小,但图像的对
细胞超微结构细胞损伤时核结构的改变
细胞在衰亡及损伤过程中的重要表征之一是核的改变,主要表现为核膜和染色质的改变. 核浓缩(karyopyknosis):染色质在核浆内聚集成致密浓染的大小不等的团块状,继而整个细胞核收缩变小,最后仅留下一致密的团块,是为核浓缩.这种浓缩的核最后还可再崩解为若干碎片(继发性核碎裂)而逐渐消失.
细胞、细胞器及组分的分离与观察2
细胞器标记酶的测定是评价细胞器内膜组分和分离纯度的主要依据,如线粒体内膜上分布有细胞色素氧化酶,该酶使詹纳斯绿B染料保持在氧化状态呈现蓝绿色,从而使线粒体显色,而胞质中的染料被还原成无色。詹纳斯绿B是一种活体染料,能对动植物的细胞或组织在活体状态下进行无毒害的染色。由于染料(碱性染料)的胶粒表面带有
细胞、细胞器及组分的分离与观察1
叶绿体的分离与荧光观察一、实验目的了解叶绿体分离的一般原理和方法,并熟悉应用荧光显微镜方法观察叶绿体荧光现象。二、实验原理叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,能发生特有的能量转换。利用低速离心机可以分离叶绿体,其分离在等渗溶液(0.35mol/L氯化钠或0.4mol/L蔗糖溶液)中进行,目的是为了防
细胞超微结构过氧体的相关介绍
过氧体(peroxisome)为胞浆中由单层界膜包绕的另一类小体,直径为0.5~1μm,形态与细胞化学特性均不同于溶酶体.小体基质电子密度中等,中央大多含有一电子密度较大的有时呈晶状的核芯. 此小体不含水解酶而含有若干种氧化酶,还有大量呈过氧化作用的触酶,被视为过氧体的标志酶.过氧体的功能至今
简述平滑肌细胞的超微结构
平滑肌纤维表面为肌膜,肌膜向下凹陷形成数量众多的小凹(caveola)。这些小凹相当于横纹肌的横小管。肌浆网发育很差,呈小管状,位于肌膜下与小凹相邻近。核两端的肌浆内含有线粒体、高尔基复合体和少量粗面内质网以及较多的游离核糖体,偶见脂滴。平滑肌的细胞骨架系统比较发达,主要由密斑、密体和中间丝组成
观察植物细胞的质壁分离与复原
一 质壁分离原理 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过渗透作用失水,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,也就是逐渐发生了质壁分离。 反之,外界溶液
酵母细胞的培养与观察操作指南
一、实验目的1.掌握酵母细胞的培养 方法2.学会使用相差和微分干涉显微镜二、异源互补技术概述酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌 株在复合液体培养基中的倍增时间为90~120min,到静止期时细胞滴度为3
线粒体和细胞核的制备与观察
实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定,有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来(差速离心技术)。线粒体是真核细胞
使用徕卡体视显微镜观察细胞
徕卡体视显微镜在特殊照明、电脑程序和样品制备的帮助下,观察细胞特别是活体内细胞,能得到细胞结构和细胞动力学的宝贵信息。不过,这对于高等生物尤其困难。德国卡尔斯鲁厄理工学院(KIT)、马克斯·普朗克协会高分子研究所,以及美国国家卫生研究所(NIH)的研究人员,通过一种新观察方法观察到八分之一微米大小的
受精前卵细胞的超微结构的特点
受精前卵细胞的超微结构的特点是:线粒体和高尔基体少,核糖体很少而且不聚集成多体。代谢和合成活动强度比较低。在受精以后,合子中的各种细胞器增加和重新分布,核常常被大量的造粉质体和线粒体包围,核糖体聚集成多聚核糖体,呈代谢活跃状态。
受精前卵细胞的超微结构的特点
受精前卵细胞的超微结构的特点是:线粒体和高尔基体少,核糖体很少而且不聚集成多体。代谢和合成活动强度比较低。在受精以后,合子中的各种细胞器增加和重新分布,核常常被大量的造粉质体和线粒体包围,核糖体聚集成多聚核糖体,呈代谢活跃状态。
细胞凋亡形态学检测与观察
hoechst33258染色,他们认为细胞发生凋亡时,染色质会固缩。 所以Hoechst染色时,细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。正常细胞核刺激后有致密浓染的凋亡细胞 AO-EB染色法:The image below shows human lymphoma cells treated wi
植物徒手切片与植物细胞结构观察
[目的要求] 1.掌握植物 徒手切片技术。 2.观察认识植物细胞的基本结构,质体的形态。 3.认识和鉴定植物细胞内常见的后含物。 [材料用品] 材料:洋葱鳞茎或番茄果实、葫芦藓叶、红辣椒、鸭跖草叶片、马铃薯块茎、蓖麻种子、花生种子。 用品:I-KI溶液、苏丹溶液、显微镜
植物徒手切片与植物细胞结构观察
[目的要求] 1.掌握植物 徒手切片技术。 2.观察认识植物细胞的基本结构,质体的形态。 3.认识和鉴定植物细胞内常见的后含物。 [材料用品] 材料:洋葱鳞茎或番茄果实、葫芦藓叶、红辣椒、鸭跖草叶片、马铃薯块茎、蓖麻种子、花生种子。 用品:I-KI溶液、苏丹溶液、显微镜
细胞组分的分析方法——线粒体的分离与观察
一.实验目的用差速离心法分离动、植物细胞线粒体。二.实验原理 线粒体(mitochondria)是真核细胞特有的,司能量转换的重要细胞器。细胞中的能源物质——脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过藕联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行
细胞超微结构溶酶体的病变相关介绍
1.溶酶体的病理性贮积过程 在某些病理情况下,一些内源性或外源性物质可在溶酶体内贮积,使病酶体增大和数目增多.贮存在溶酶体中的物质被溶酶体酶加以降解(消化).但有时进入细胞的物质为量过多,超过了溶酶体的处理能力,于是在细胞内贮积. 例如各种原因引起的蛋白尿时可在肾近曲小管上皮细胞中见到玻璃滴
细胞超微结构内质网的基本介绍
除红细胞外,内质网或多或少地见于所有各种细胞.内质网为由生物膜构成的互相通连的片层隙状或小管状系统,膜片间的隙状空间称为池,通常与细胞外隙和细胞浆基质之间不直接相通. 这种细胞内的膜性管道系统一方面构成细胞内物质运输的通路,另一方面为细胞内各种各样的酶反应提供广阔的反应面积.内质网与高尔基体及
细胞超微结构高尔基体的相关介绍
高尔基体(Golgi apparatus)见于一切有核细胞,来自核膜外层,由数列弯曲成蹄铁状的扁平囊组成,在横切面上表现为光面双膜,其末端膨大成烧瓶状.高尔基体面向核的一面称为形成面,由许多与粗面内质网池相连的小泡构成.另一面称为成熟面,由此断下一些较大的泡,内含分泌物. 由粗面内质网合成的蛋
关于细胞超微结构基浆的相关介绍
基浆(胞浆基质)为胞浆的无结构成分,内含一系列酶,蛋白质和其他溶于其中的物质. 基浆的病变 1.水、电解质的改变 基浆最重要的形态改变为由于水与电解质运输障碍所致的含水量的改变,常表现为基浆水肿,即基浆内含水量过多,从而使细胞体积增大,基浆染色变淡,电子密度下降,细胞器互相离散. 此时一
使用扫描电镜观察细胞样品的制备方法
电子显微镜下的神奇世界 一、原理 超薄切片实际上是样品的二维切片,不能表达细胞的三维结构,而且在观察切片后所拍摄的显微照片时,容易造成错误的印象,用扫描电子显微镜 ( SEM )能直接观察标本表面的三维空间结构,真实地反映各种细胞表面和断裂面的形态特征,其照明源与透射电镜基本相同,由
使用扫描电镜观察细胞样品的制备方法
一、原理 超薄切片实际上是样品的二维切片,不能表达细胞的三维结构,而且在观察切片后所拍摄的显微照片时,容易造成错误的印象,用扫描电子显微镜( SEM )能直接观察标本表面的三维空间结构,真实地反映各种细胞表面和断裂面的形态特征,其照明源与透射电镜基本相同,由电子枪经聚光镜汇聚成极细
浅谈扫描电子显微镜在三大领域的应用
浅谈扫描电子显微镜在三大领域的应用扫描电子显微镜是一种多功能的仪器、具有很多优越的性能、是用途最为广泛的一种仪器.它可以应用于很多领域中。1扫描电镜在材料研究中的应用扫描电镜材料的组织形貌观察、层表面形貌分析和深度检测、区化学成分分析和微组织及超微尺寸材料的研究 。例如:扫描电子显微镜在新型陶瓷材
植物细胞的质壁分离与复原观察实验
一 质壁分离原理 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过渗透作用失水,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,也就是逐渐发生了质壁分离。 反之,外界溶液
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼
细胞的超微结构实验_小脑皮质的突触实验
实验材料成年大鼠的小脑皮质大鼠经腹腔内注射戊巴比妥钠麻醉后取出小脑试剂、试剂盒Kamovsky固定液多聚甲醛戊二醛二甲砷酸钠实验步骤一、固定1.用 Kamovsky 固定液灌注。Kamovsky 固定液配方如下(以 100 ml 固定液的量计):A 液:2 g 多聚甲醛溶于 60℃ 的 40 ml
显微镜的使用及动物细胞的观察
实验方法原理1. 了解显微镜的基本构造,初步掌握显微镜的使用方法。2. 初步掌握动物涂片标本的制作方法,了解动物细胞的类型及结构。实验材料人口腔上皮细胞临时装片人血制片蛙血细胞制片马蛔虫卵细胞有丝分裂切片牛脊髓涂片试剂、试剂盒亚甲基蓝生理盐水仪器、耗材显微镜载玻片盖玻片实验步骤1. 显微镜的基
显微镜的使用及动物细胞的观察
实验方法原理 1. 了解显微镜的基本构造,初步掌握显微镜的使用方法。2. 初步掌握动物涂片标本的制作方法,了解动物细胞的类型及结构。实验材料 人口腔上皮细胞临时装片人血制片蛙血细胞制片马蛔虫卵细胞有丝分裂切片牛脊髓涂片试剂、试剂盒 亚甲基蓝生理盐水仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片实验步骤 1.
植物细胞结构与植物徒手切片观察试验
实验方法原理1. 了解植物细胞形态的多样性;简易染色技术。 2. 掌握植物细胞的结构和植物徒手切片技术。 3. 识别和鉴定植物细胞中常见的后含物。 实验材料洋葱