哈佛大学成功捕获单病毒形成图像新型成像技术成亮点
最近，研究人员第一次捕获了单个病毒形成的图像，从而实时了解了病毒装配的动力学特征。该研究为如何对抗病毒和工程自组装粒子提供了新的见解。该研究发表在《PNAS》杂志上。 哈佛大学约翰·保尔森工程学院的物理学教授Vinothan Manoharan表示：“结构生物学已经能够以惊人的分辨率解析病毒的结构，甚至可以到每种蛋白质中的每个原子。但是我们仍然不知道病毒结构如何自我组装。我们的技术为了解病毒如何组装提供了第一个窗口，并在定量细节上揭示了动力学和途径。” Manoharan还是“定量生物学计划”（Quantitative Biology Initiative）的共同负责人，该计划是哈佛大学的一项跨学科工作，将生物学，新颖的测量技术，统计学和数学结合在一起，以开发生物系统的预测性数学模型。（图片来源：Www.pixabay.com） Manoharan和他的团队专注于单链RNA病毒，这是地球上最丰富的病毒。在人类中，RNA......阅读全文
PNAS：利用新型成像技术追踪细胞突变
这是科学家首次在完整组织里查明突变细胞的数量和位置 美国科学家近日开发出一种新型成像系统，利用它可以观察到经历特殊突变的细胞。这一研究是科学家首次在完整组织里查明突变细胞的数量和位置，也有望帮助他们理解癌症前期突变如何产生。相关论文在线发表于美国《国家科学院院刊》（PNAS）上。 图片说明
－PNAS：新型抗流感病毒药物
流感病毒复制有容易出错的特性，可以迅速产生耐药性选择的点突变，会严重损害流感治疗的有效性。在流感病毒异三聚体复制结构内的核酸内切酶域是必不可少的，它处理寄主的mRNA前体作为病毒mRNA引物，对于流感药物的发现是一个有吸引力的靶点。对于设计合适的抑制剂和优先选择不太会导致临床相关耐药抗性突变的候
PNAS：科学家发现新型真菌病毒
由Robert Coutts博士领导的研究人员发现了一种全新类型的真菌病毒。这项研究发表在《美国国家科学院院刊》(PNAS)上。 这种病毒感染烟曲霉菌型真菌，该细菌能引起人类患曲霉病。这种真菌靶向感染肺器官，并且是免疫力低下的个体发病率和死亡率的主要原因。 这种真菌病毒称为烟曲霉菌-1(Af
病毒包装技术——腺病毒包装流程
1. 细胞的准备a) 复苏293细胞，传代培养1-2代，调整好细胞状态，务必4代以内完成转染实验。b) 在转染前1天，用胰酶消化传代，将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中，加入2ml完全培养基（DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax），摇匀后置于5% CO2、95% 湿润
病毒包装技术6——腺病毒包装流程介绍
1. 细胞的准备 a) 复苏293细胞，传代培养1-2代，调整好细胞状态，务必4代以内完成转染实验。 b) 在转染前1天，用胰酶消化传代，将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中，加入2ml完全培养基（DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax），摇匀后置于5%
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意，一般在
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装（一）
摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒， 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5)，排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AA
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装（二）
2.3 蛋白质分析 为了分析AAV Rep和Cap蛋白质表达，按照2.2部分所述进行质粒转染。转染后48小时，将培养物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2)，细胞低速离心沉淀收获。细胞沉淀在冰上用200ml STM-NP缓冲液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl，pH8
病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程
一、实验流程（1和2为并列步骤）慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，PCR(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（CDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
病毒包装技术7——腺相关病毒(AAV)包装介绍
锐赛小课堂技术篇0702-113 摘要: 腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒， 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH
PNAS指出新型冠状病毒人传人可能性不大
对于新出现冠状病毒引起的中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome，MERS)，科学家们了解的并不多——不清楚这种病毒的来源，传播模式，以及最佳的治疗方式。但是随着这种病毒引发的死亡病例越来越多，目前已经升至了47例(8月份数据)，科学家们不得不加紧了研
PNAS：危险！新型SARS样冠状病毒有潜力直接感染人类
在一项新的研究中，来自美国北卡罗来纳大学教堂山分校的研究人员证实在中华菊头蝠（Chinese horseshoe bats）体内发现的一种新的SARS样冠状病毒无需适应，就可能已做好感染人类的准备，从而就有可能导致传染性流行病爆发。相关研究结果于2016年3月14日在线发表在PNAS期刊上，论文
PNAS：危险！新型SARS样冠状病毒有潜力直接感染人类
在一项新的研究中，来自美国北卡罗来纳大学教堂山分校的研究人员证实在中华菊头蝠（Chinese horseshoe bats）体内发现的一种新的SARS样冠状病毒无需适应，就可能已做好感染人类的准备，从而就有可能导致传染性流行病爆发。相关研究结果于2016年3月14日在线发表在PNAS期刊上，论文
病毒包装技术8——病毒包装实验经验总结介绍
锐赛小课堂常识篇0703-115 病毒包装实验经验总结 第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。 第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立
病毒包装技术——病毒与非病毒载体
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，一般实验方向
慢病毒包装实验
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后，可用于：（1）感染原代培养细胞；（2）制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；（3）in vivo的基因操作、转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动
慢病毒包装实验
实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血
病毒包装的原理
质粒 DNA 和其他包装质粒共转染细胞（293T 细胞）产生病毒，即为病毒包装。293T 细胞是由 293 细胞派生, 表达 SV40 大 T 抗原的人肾上皮细胞系, 被广泛应用于瞬时转染以过表达各种目标蛋白, 或是用以包装病毒。病毒包装的原理（以慢病毒包装为例）质粒 DNA 为能转录出慢病毒遗传物
慢病毒包装实验
慢病毒包装实验 实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于反转
PNAS：新型荧光cAMP指示器有助于神经元活细胞成像
环磷酸腺苷(cAMP)是一种胞内信使分子，负责包括神经元在内的许多细胞的功能，促进轴突的生长，维持神经元间的通信。cAMP的分子途径已得到充分研究，已知它在调节突触功能中发挥重要作用;然而，能够精确监测其细胞内活动的指标还有待开发。现在,Naoto Saitoh带领的研究团队通过开发一种新型绿色荧光
病毒包装技术3——慢病毒载体构建及包装流程介绍
1 菌液的准备 1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。 1.2. 将单
包装新材料－新型包装膜领“鲜”奥秘
现在能在二三月份吃到西瓜、葡萄、草莓等水果已经不再是什么新鲜事。随着生产的发展和人民生活水平的日益提高，水果的反季节消费大幅增长，而且人们对果蔬的消费由数量消费正在向质量消费转变，新鲜水果的贮藏变得越来越重要。 在刚刚结束的全国科技周上，北京印刷学院印刷包装材
PNAS：病毒小RNA抑制登革病毒复制
每年有超过100个国家报道了近100百万例登革病毒(Dengue virus，DENV)感染性疾病，包括50万例登革出血热。伊蚊属的埃及伊蚊(Aedes aegypti)和白纹伊蚊(Aedes albopictus)是DENV的主要传播者。MicroRNA(miRNA)是一类具有调控功能
PNAS：科学家发现新型猪病毒－或对人类健康带来潜在威胁
近日，一项刊登在国际杂志PNAS上的研究报告中，来自俄亥俄州大学和乌德勒支大学的科学家们通过研究鉴别出了一种新型的猪病毒，而且这些猪病毒能够通过寻找到特殊的途径感染实验室中培养的人类细胞和其它动物的细胞，这一研究发现提醒人们应该注意这种新型猪病毒对人类健康产生的潜在威胁。 文章中，研究人员深入
慢病毒包装的原理
病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增，也只能在293A里扩增，其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的，野生型的慢病毒载体是可以复制的，但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。简单来说，就是把相应的涉及相应功能的元件进行替换或者删除。慢病毒
病毒包装技术——腺病毒载体的制备
1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄
病毒包装技术1——病毒与非病毒载体介绍
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。 锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，
PNAS：揭秘HIV病毒的要害
Duke大学的研究人员对HIV衣壳蛋白的关键区域进行了结构分析，即gp41的近膜端外部区MPER(membrane proximal external region)。文章于一月十三日提前发表在美国国家科学院院刊PNAS杂志的网络版上。 为了控制HIV的传播，数十年来人们一直在尝试开发
PNAS：老病毒诉说新故事
逆转录病毒是一类能够跨越物种障碍感染新宿主的重要病毒，但目前对于它们的进化史所知有限。通过绘制内源性逆转录病毒(ERVs，这类逆转录病毒的基因成为了宿主生物体基因组的组成部分)的图谱，瑞典乌普拉萨大学的研究人员现在提供了一些关于逆转录病毒和它们的宿主之间进化关系的独特认识。这些研究结果发表在《美
PNAS描述新型基因表达调控系统
报道：科学家们开发了一个调控基因表达的新系统，该系统只需将特定DNA序列简单插入到基因的任意一侧，就可以实现剂量依赖性的基因表达抑制。这项成果发表在美国国家科学院院刊PNAS杂志上，文章认为这一系统有望替代Tet基因表达调控系统。 这是首次采用适体酶核糖开关有条件地knockdown病毒基