labonchip对PCR的一些个人体会
PCR应该是分子生物学的基本，记得刚进实验室时，大家的口头禅就是：今天你P了吗?那怎样才能做好PCR，结合个人体会，我谈谈自己的看法。论坛里高人很多，说得不对的还请多多指教和包含。当然，若能给新人朋友们带去一些帮助，那我本贴的目的就算是达到了。PCR设计的一般套路1） 目的基因或目的基因片段对象是什么？对于原核生物来说，由于不存在外显子和内含子，因此还比较简单，直接从genebank把序列调出来就可以，个人建议以FASTA格式（txt文本方式）保存，这可方便后面的primer或danman等软件调用。而对于真核生物来讲，那你就要注意了。对象如果是DNA基因（即直接从基因组中调出），那你就要从genebank中调DNA序列而不是mRNA基因序列了。如果是做RT-PCR，那就要掉mRNA序列。对于细菌来讲，由于存在种和型的分类，那这是你就要注意了，你到底是想做哪个水平的研究（是属？还是种？还是某某型），根据你的情况，调出相应基因。2......阅读全文
对小麦测土配方施肥的一些分析
测土配方施肥是实现农业现代化的一个关键步骤，作物的生长离不开养分，而肥料就是土壤养分最直接的来源，如何让肥料发挥出最大的效益？如何让肥料对土壤环境产生的影响降到最低？测土仪可以帮助我们解决这些困难，测土仪可以测得土壤中的养分情况，为我们科学施肥提供了帮助。一、小麦测土配方施肥的意义和内涵所谓的小麦测
对顶空进样器的一些了解
顶空进样器是气相色谱法中一种方便快捷的样品前处理方法，其原理是将待测样品置入一密闭的容器中，通过加热升温使挥发性组分从样品基体中挥发出来，在气液（或气固）两相中达到平衡，直接抽取顶部气体进行色谱分析，从而检验样品中挥发性组分的成分和含量。 用顶空进样技术可以免除冗长繁琐的样品前处理过程，避免
PCR新手指南：PCR仪维修对仪器性能的影响
PCR仪是一种在实验室使用频率非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍1、制冷半导体故障由于制冷半导体是半手工生产的，每一
PCR新手指南：PCR仪维修对仪器性能的影响
PCR仪是一种在实验室使用频率非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍1、制冷半导体故障由于制冷半导体是半手工生产的，每一片
PCR新手指南：PCR仪维修对仪器性能的影响
PCR仪是一种在实验室使用频率非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍1、制冷半导体故障由于制冷半导体是半手工生产的，每一片
PCR新手指南：PCR仪维修对仪器性能的影响
PCR仪是一种在实验室使用频率非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍1、制冷半导体故障由于制冷半导体是半手工生产的，每一片
正常人打干细胞对人体会有什么好处
正常人补充了干细胞，干细胞能帮助机体快速地更新替换衰老的细胞，从而使机体年轻充满活力。干细胞疗法采用细胞回输，可以在机体内不断更新和替换衰老的细胞，亦可通过细胞分裂不断繁殖，让身体从内到外都散发青春的光彩，并且干细胞在体内存活表现为长期有效。
PCR的退火温度对反应的影响
引物退火温度是影响PCR的主要因素之一，一般来说每个引物都对应着各自的退火温度。影响：以文献作参考，在一定的温度范围内，退火温度越高，扩增的特异性也就越高。退火温度越低，扩增产物的特异性也就降低。如果退火温度过高，引物与模板结合差，电泳条带差，甚至没有扩增。如果温度过低，扩增特异性差，杂带较多，背景
PCR的退火温度对反应的影响
引物退火温度是影响PCR的主要因素之一，一般来说每个引物都对应着各自的退火温度。影响：以文献作参考，在一定的温度范围内，退火温度越高，扩增的特异性也就越高。退火温度越低，扩增产物的特异性也就降低。如果退火温度过高，引物与模板结合差，电泳条带差，甚至没有扩增。如果温度过低，扩增特异性差，杂带较多，背景
呃逆的治疗体会
昨日诊治一人，男，65岁。呃逆已三天。述平素体健，三日前因偶感风寒即出现此症，曾内服西药（用药不详）二天无效。刻诊时呃逆频频，有欲吐之状。予针刺右内关（直刺）、右足三里（向上45°斜刺）予提插捻转强刺激，五分钟行针一次。十分钟时呃逆顿止，留针二十分钟。一次而愈。 呃逆之症临床多见。
PCR仪维修对仪器性能的影响
1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面针对这些故障的维修对仪器性能的影响做简单介绍1、制冷半导体故障由于制冷半导体是半手工生产的，每一片制冷半导体的性能都不一样。用于PCR仪生产的制冷半导体都是需要配对的。一般大的生产商会通过较大量的
模板的浓度对PCR有什么影响
pcr的灵敏度很高，几pg的DNA就能检测出来了。一般用pcr产物或者质粒做模板，只需要1ng左右就可以了，如果是基因组或者cDNA做模板，模板量可适当增加。
PCR实验室对温度的要求
控温25度，我觉得控湿也很关键，湿度太大的时候经常会污染
对目前创投行业投资条款的一些看法
本人1999年开始在中国从事创投行业，先是在跨国企业负责在华的美元投资，后于2006年创立启明创投。从管理美元基金开始，2009年起同时管理人民币基金，亲身经历了这些年投资条款的演变。在此，对时下被误解、滥用的一些条款如赎回条款、业绩对赌条款，特别是上市对赌条款等做一些溯源，希望有助于这个行业的健康
塑化剂检测机构集体噤声－对个人检测说不
白酒军团幕后发力?国内塑化剂检测机构集体噤声 21世纪网报道《致命危机：酒鬼酒塑化剂超标260%》之后，白酒塑化剂成为公众所关心的食品安全问题。 然而，随后出现了蹊跷的情况，国内已知的检测机构集体噤声，不再向个人开放检测业务，个人检测塑化剂已经不可能。不只是国家食
新法案！无需FDA，直接对个人销售基因检测服务
1392号法案，是由州众议院共和党成员Neil Parrott和Richard Metzgar提出的，其将直接面向消费者（DTC）的检测定义为一种消费者可以直接下单，并且不需要经过专业的治疗健康人士同意的消费方式。 该法案要求实验室销售的基因检测服务DTC必须有CLIA的认证。实验室还必须建议
饶毅专访：不要院士荣誉对我个人影响不大
8月17日，2011年中国科学院院士增选初步候选人名单公布，145人的名单上没有出现北京大学生命科学学院院长饶毅的名字。随后，饶毅在自己的博客上发出一篇题为《》的声明，称“从2011年8月17日后将不再成为候选人”。 饶毅是目前国内生命科学界的领军人物之一。2007年，45岁的饶毅放
利用PCR技术对污染的监测的内容
一个好的实验室，要时刻注意污染的监测，考虑有无污染是什么原因造成的污染，以便采取措施，防止和消除污染。 对照试验 一、阳性对照：在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照，它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中
心源性晕厥的临床体会
在临床工作中，常会遇到以突发晕厥为主诉的患者前来就诊。在遇到这类患者时，我们要注意区别是神经介导性晕厥、直立低血压性晕厥还是心源性晕厥。而心源性晕厥是其中最高危，并且预后不好，容易发生猝死，所以我们主要阐述一下心源性晕厥的临床诊断与治疗。 心源性晕厥是由于心脏方面的原因，引起心脏排血量减少，从而导致
子痫患者的护理体会
子痫是妊娠期高血压疾病最严重的阶段，是妊娠期高血压疾病所致母儿死亡的最主要原因，因此，积极配合医生抢救，采取有效的护理措施，是子痫病人抢救成功，保证母儿安全的关键。现就护理体会介绍如下:1. 抢救护理 遵医嘱用25%硫酸镁20毫升加于25%葡萄糖注射液20毫升静脉推注(>5min)，继之以2~
小儿腹泻的护理体会
小儿腹泻病是由多种病原多因素引起的以排便次数增多和大便性状改变为特征的消化道综合症。是儿科常见病之一，多见于六个月至两岁的婴幼儿，一年四季均可发病，但夏秋发病率较高.根据病因分为感染性和非感染性两类，以前者更多见，笔者认为在治疗小儿腹泻时，除了做好调整饮食，合理用药，控制感染，纠正电解质和酸碱平衡紊
小儿肺炎的护理体会
肺炎是婴幼儿时期常见病，就全球而言，肺炎占五岁以下小儿死亡总数的1/4~1/3，占我国住院小儿死亡的第一位，是我国儿童保健重点防止“四病"之一。肺炎一年四季均可发病，以冬春季者多见，所以在合理治疗的基础上，临床护理的恰当与否直接影响小儿肺炎的康复。 1.临床表现 本病多
基因扩增PCR的扩增与克隆方法及一些使用的小建议
基因扩增PCR主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平等。加样器、天平除了要专用外，还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行，扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试剂制备好后应有质检：一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。 基因扩增PCR的扩增与克隆方法： ①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守
基因扩增PCR的扩增与克隆方法及使用的一些小建议
基因扩增PCR主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平等。加样器、天平除了要专用外，还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行，扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试剂制备好后应有质检：一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。 基因扩增PCR的扩增与克隆方法： ①引物的序列应位于基因组DNA的
气相色谱仪对环境中的一些作用
作为实验室测试设备，许多专业人员将气相色谱仪视为分析工具，为了分析蒸汽和液体中的各种有机化合物，可以容易地获得物质的组成，因此，很多人对气相色谱的看法只停留在企业，研究机构和其他科学目的进行实验分析。 事实上，在当前的环境污染控制浪潮中，气相色谱仪也可以发挥非常重要的作用，我们知道最直观的
对电子天平测量造成影响的一些环境因素
使用电子天平的人员应该要知道，电子天平放置的环境太差会影响天平的正常工作，环境因素包括：振动、气流、温度、外部磁场，必须改善上述环境，关闭称量室的防风窗，天平才能正常工作。 关于称量的样品，有些样品存在吸水性、放水性、静电、磁性等特性。使用者要克服上述影响，才能正确称量和微量天平的正确
气相色谱仪对环境中的一些作用
作为实验室测试设备，许多专业人员将气相色谱仪视为分析工具，为了分析蒸汽和液体中的各种有机化合物，可以容易地获得物质的组成，因此，很多人对气相色谱的看法只停留在企业，研究机构和其他科学目的进行实验分析。 事实上，在当前的环境污染控制浪潮中，气相色谱仪也可以发挥非常重要的作用，我们知道直观的
变性、退火温度对PCR热循环的影响
PCR退火温度应如何设置？ 在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s, 37℃60s, 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。在这里，每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪
如何对PCR扩增的产物进行酶切？
Fermentas公司的研究表明，限制性内切酶在 PCR扩增体系中仍然有部分活性，可以通过稀释（3倍以上）扩增混合液，适当提高酶量和反映时间，进行酶切。个人认为需要对PCR产物进行酶切分析通常是为了或基因表型分析，由于Taq，Pfu等高温聚合酶在酶切温度（37度或更高）下，仍然保持一定的活性，高
如何对PCR扩增的产物进行酶切
限制性内切酶在 PCR扩增体系中仍然有部分活性，可以通过稀释（3倍以上）扩增混合液，适当提高酶量和反映时间，进行酶切。个人认为需要对PCR产物进行酶切分析通常是为了或基因表 型分析，由于Taq，Pfu等高温聚合酶在酶切温度（37度或更高）下，仍然保持一定的活性，高温聚合酶所具有的聚合或无模板添A或外