方案16.2Giemsa染色
实验方法原理 培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。 实验材料 D-PBSA D-PBSA:甲醇(1:1) 试剂、试剂盒 未稀释的Giemsa染液 甲醇 去离子水 实验步骤 本程序假设用单层细胞进行染色,而固定的悬浮细胞也可以使用,但从第6 步开始。1. 移除培养基。2. 用 D-PBSA 冲洗单层细胞,去掉......阅读全文
关于肥大细胞增多症的检查诊断介绍
检查 组织活检可见组胺含量极高,与肥大细胞聚集程度相一致,全身性肥大细胞增多症时,尿内组胺及其代谢产物含量也高,血浆内组胺可升高,有报道血浆内类胰蛋白酶,肝素,前列腺素D2(PGD2)浓度升高,所有皮肤损害的组织病理学表现为肥大细胞浸润,只是位置和数量不同,肥大细胞的特征为在细胞质内有异染性颗
沙眼衣原体的生物学性状
沙眼衣原体的生物学性状:基本形态沙眼衣原体具有两种形态:在细胞外是孢子样具高度传染性的细胞,称为原体;在细胞内是进行复制的细胞,称为始体。始体的体积较大,形状不甚规则,其包膜富有韧性,无刚性的细胞壁,原体和始体内皆含有DNA与RNA 。培养特性和生化特征沙眼衣原体是一种有DNA和RNA,能够通过滤器
动物染色体标本的制备_秋水仙素阻断细胞分裂法
实验材料蟾蜍试剂、试剂盒秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋酸 低渗液 PH6.8 磷酸缓冲液 Giemsa 染色液仪器、耗材显微镜 培养皿 手术剪 镊子 冷冻载片 滴管实验用品器具:显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管试剂:秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8 磷酸缓冲液、Gie
人癌细胞染色体制备及观察
一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是
沙眼衣原体有哪些生物学特性?
(一)形态与染色 将鸡胚卵黄囊或细胞培养的沙眼衣原体高度提纯,于电镜下检查,可见原体呈球形或类球形,胞浆膜外有刚性细胞壁,壁外有平滑表层。始体的体积较大,形状不甚规则,其包膜富有韧性,无刚性的细胞壁,原体和始体内皆含有DNA与RNA。沙眼衣原体具有特殊的染色性状,不同的发育阶段其染色有所不同。成熟的
植物染色体显带技术和带型分析
实验概要学习和掌握植物染色体Giemsa显带技术和带型分析方法,进一步鉴别植物染色体组和染色体结构。实验原理对植物有丝分裂中期染色体进行酶解,酸、碱、盐等处理,再经染色后,染色体可清楚地显示出很多条深浅、宽窄不同的染色带。各染色体上染色带的数目、部位、宽窄、深浅、相对稳定,为鉴别染色体的形态提供依据
皮肤弓形体病的诊断及检查
诊断 本病的皮肤表现为非特异性。因此,仅根据临床症状难以做出确切的诊断。通常经凝集试验、补体结合试验、直接荧光素标记抗体试验、酶标检测、放射免疫法、弓形体素皮试等,并由淋巴结、脑脊液或周围血液取材接种于实验鼠,再用Giemsa染色在涂片中找到弓形体方能确诊。 检查 凝集试验、补体结合试验、
人癌细胞染色体制备
实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括
动物骨髓细胞染色体的制备与观察1
[实验目的]1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。[实验原理]骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
细胞的分裂指数测定
一、原理体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品:CO2培养箱、
细胞分裂指数(mitotic-index,MI)测定原理和操作步骤
一、原理体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品:CO2培养箱、
细胞周期测定实验
细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的
细胞的分裂指数测定原理和操作步骤
一、原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定细胞 周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品:CO2
染色体的标本制作及其组型实验2
3.3.5. 磷酸缓冲液:1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O: 2.39g 溶于100ml双蒸水中。1/15 mol/L KH2PO4 0.907g 溶于100ml双蒸水中。取1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O液80ml、1/15 mol/L KH2PO4液 20ml混合
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
动物染色体标本的制备与观察
实验概要本实验介绍了动物染色体标本(cell chromosome)制备的原理及操作步骤。实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中
动物染色体标本的制备与观察
实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶
关于细胞分裂指数的测定方法介绍
分裂指数测定可用盖片培养法,亦可直接在小平皿中进行。在计算分裂相时要掌握好分裂相标准,选择密度近似区观察计数。 一、原理 体外培养细胞生长、分裂繁殖的本领,可用分裂指数来显示.它与生长曲线有一定的联系,如跟着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期. 分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的
细胞周期测定实验_细胞计数法
细胞周期测定可应用于:(1)作为生物相容性评价指标;(2)研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定
如何制作动物染色体标本
细胞处于活跃的增值状态或者通过人工的各种处理后,细胞进入分裂的动物组织科用于染色体的分析。由于在正常的动物骨髓内,细胞是处于不断分裂的,给其注射一定的秋水仙碱可以让许多细胞处于分裂的细胞停在细胞分裂中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。 实验用品 一、 材
姐妹染色单体分化染色法
1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromode Oxyurdine,BrdU),用Hoechst 3
G显带的定义
G显带,是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其他盐溶液处理后,再使用Giemsa 染液染色,染色体上出现与Q带相类似的宽窄和亮度不同的横纹,在普通显微镜下,可见深浅相间的带纹,称G带(G band) 。
G显带的概念
G显带,是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其他盐溶液处理后,再使用Giemsa 染液染色,染色体上出现与Q带相类似的宽窄和亮度不同的横纹,在普通显微镜下,可见深浅相间的带纹,称G带(G band) 。
细胞培养中的一些试剂
一、纺锤体阻断剂 在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。 在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量
细胞培养中的一些试剂(纺锤体阻断剂、低渗液、固定液...2
一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor)在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水
细胞学技术的一般环节
一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor)在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水
细胞培养中的一些试剂(纺锤体阻断剂、低渗液、固定液、...
细胞培养中的一些试剂(纺锤体阻断剂、低渗液、固定液、滴片与Gi一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor)在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS