动物骨髓细胞染色体的制备与观察1
[实验目的]1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。[实验原理]骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行准确的观察和分析。由于骨髓直接涂片观察到的分裂相少,效果差,因此要对骨髓细胞进行必要的处理。这个处理方法称为低渗法,其基本要求首先是要获得较多的中期分裂相。秋水仙素对分裂期纺锤丝的形成具有破坏作用,当动物被注射适量的秋水仙素后,处于分裂增殖中的骨髓细胞由于纺锤丝不能形成,中期染色体不能正常趋向两极,到达后期、末期,因而大量的细胞处于观察染色体形态最佳的分裂中期。其次是要能够清楚的观察染色体的形态。为了达到此目的,取出的骨髓细胞要经过低渗(kcl溶液)使细胞膨胀、染色体适当的分散。固定(甲醇、冰醋酸)使染色体保持完好的形态。染色(gie......阅读全文
动物骨髓细胞染色体的制备与观察1
[实验目的]1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。[实验原理]骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行
动物骨髓细胞染色体的制备与观察2
二、染色体制备各种动物骨髓细胞染色体的制备方法基本都采用低渗法,现以青蛙为例,说明其制备的过程。1. 取健康小鼠一只,按每10g体重由腹腔注入含量为0.02% 的秋水仙素0.3ml(此步在实验前12~24小时完成,哺乳动物在实验前2~4小时完成)。2. 将青蛙处死,迅速取出后腿长骨,包括股骨和胫骨,
动物染色体标本的制备与观察
实验概要本实验介绍了动物染色体标本(cell chromosome)制备的原理及操作步骤。实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中
动物染色体标本的制备与观察
实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不
小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察
实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验原理制备方法包括以
骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤1
实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色
动物染色体标本的制备
秋水仙素阻断细胞分裂法 实验材料 蟾蜍 试剂、试剂盒 秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋
动物染色体标本的制备
一、实验目的1. 了解染色体标本制备的基本原理2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤二、实验原理每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体,在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期,此时染色体形态最典型,然后通过低渗、固定、染色等步骤,便可在显微镜下呈现出其形态。三、实验用品器具:显微镜
动物染色体标本的制备
秋水仙素阻断细胞分裂法 实验材料 蟾蜍 试剂、试剂盒 秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋
人癌细胞染色体制备及观察
一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是
金相试样制备与观察
金相试样制备与观察1、取样取样是金相试样制备的*道工序,若取样不当,则达不到检验目的。因此,取样的部位、数量、磨抛光面方向等应严格按照相应的标准规定执行。(1)取样部位和磨面方向的选择取样部位必须与检验目的和要求相一致,使所切取的试样具有代表性。必要时应在检验报告单中绘图说明取样部位、数量和磨抛光面
体内哺乳动物骨髓细胞微核试验1
1范围本规范规定了哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验的基本原则、要求和方法。本规范适用于化妆品原料的染色体畸变检测。2规范性引用文件GB 14924实验动物与饲料标准OECD Guidelines for Testing of Chemicals(No.481,Adopted:21,July 1997
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤2
2.第3步可省去,改用1ml 注射器直接钻入骨末端即可,避免剪去骨骺时损失过多骨髓细胞; 3.在分离股骨大转子一端时,应防止折断股骨头; 4.如有需要,细胞悬液可用尼龙网过滤,进一步去除骨碎片及杂质。 四、实验结果及思考题 1.在低倍及中倍镜下观察Giemsa染色之后的染色体制片,寻
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验方法原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验概要 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许
霉菌水浸标本片的制备与观察
(一)实验目的:学习自制水浸片观察霉菌的形态(二)实验原理:霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多,分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液
霉菌水浸标本片的制备与观察
实验方法原理霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多,分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是:细胞不变形,具有杀菌防
霉菌水浸标本片的制备与观察
(一)实验目的:学习自制水浸片观察霉菌的形态(二)实验原理:霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多,分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液
线粒体和细胞核的制备与观察
实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定,有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来(差速离心技术)。线粒体是真核细胞
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料骨髓液试剂、试剂盒肝素抗凝剂PBS实验步骤1. 无菌抽取骨髓液 0.5 ml。2. 将骨髓标本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝剂的 1 ml PBS 液中。3. 再加入 PBS 液稀释至 10 mI。4. 用吸管吸取 5 ml 稀释骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人类淋巴细胞分离液液面之
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
小白鼠骨髓细胞染色体制片技术
实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法
实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中
小鼠细胞染色体制备及核型分析实验1
培养以及小鼠外周血分裂相细胞收获实验实验材料雌性小鼠7〜10周龄试剂、试剂盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素钠溶液秋水仙碱溶液固定剂仪器、耗材聚苯乙烯组织培养管肝素化的微量毛细分血管有盖的12mm X 75mm 无菌管锥形玻璃离心管清洁的显微镜玻片实验步骤基本方案 培养以及小鼠外周血分裂
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中
如何制作动物染色体标本
细胞处于活跃的增值状态或者通过人工的各种处理后,细胞进入分裂的动物组织科用于染色体的分析。由于在正常的动物骨髓内,细胞是处于不断分裂的,给其注射一定的秋水仙碱可以让许多细胞处于分裂的细胞停在细胞分裂中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。 实验用品 一、 材