PCR法检测乙肝病毒(HBV)
多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃ 低温退火,引物与模板互补结合。在72℃条件下,结合于模板上的引物在DNA聚合酶的催化下,利用反应体系中的4种dNTP为原料,按碱基互补配对的方式延伸合成两条新的DNA链。所扩增的DNA可作为下一轮扩增反应的模板。重复上述循环过程,经过20~30个周期后,特异的目的DNA可扩增百万倍以上。 PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后即可观察到特异的扩增条带。PCR方法操作简便,灵敏度高,可检测出少至0.1pg的目的DNA。目前已广泛应用于多种病原微生物的检测。乙肝病毒(HBV)感染引起的乙型肝炎,在我国发病率很高,而且HBV与肝硬化、原发性肝癌关系密切,因此,......阅读全文
痘苗DNA检测实验——PCR-法
除了 PCR 和 Southern 杂交可以检测病毒 DNA 外,也可以利用 DNA 点迹杂交方法检测在分离的噬斑中的重组病毒。本实验主要介绍用这3种方法来检测痘苗DNA。实验材料贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒PBS胰酶/EDTA干冰/乙醇
专家视角|“乙肝转阴”意味着什么?
慢性乙肝的根本治疗措施是抗病毒,目前推荐的一线抗病毒药物有恩替卡韦、替诺福韦和聚乙二醇干扰素,其他可选择的药物还有替比夫定、阿德福韦和拉米夫定。在评价抗病毒疗效时,需要进行乙肝病毒学检测,检测内容包括乙肝五项指标(俗称两对半)和病毒脱氧核糖核酸(即HBV DNA)。 乙肝五项指标检测结果常常用
肝炎病毒标志物的检验,你知道多少?
肝炎病毒学标志物检查:是用来判断是否感染肝炎病毒,常见嗜肝病毒学标志物包括甲肝抗体、乙肝两对半、乙肝病毒DNA,丙肝抗体、丙肝病毒RNA,丁肝抗体,戊肝病毒抗体。各类病毒型肝炎传播途径(不是所有类型肝炎均通过吃饭传播):甲型、戊型病毒型肝炎主要通过消化道传播;乙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、母婴
荧光定量PCR检测HBV-DNA准确性的影响因素及解决措施
现在国内多数三级医院都用自动荧光聚合酶链式反应(PCR)扩增仪检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA。但在临床实践中发现,不同仪器之间检测结果差异较大。这对在同一医院用同一台仪器检测结果的意义影响不大,但在不同医院用不同仪器检测的结果如果存在差异,则会使医师难以判断患者检测指标的准确意义,从而使患者不得不
酶联免疫吸附法检测HBV抗HBc假阳性的探讨
【摘要】 目的 鉴别并纠正酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎抗-HBc过程中出现的假阳性结果。方法 在乙型肝炎“两对半”临床检测标本中随即挑选抗-HBc阳性的标本310份,根据“两对半”检测结果的不同模式分为三组:A组HBs-Ag(+)、抗-HBs(-)、HBeAg或抗-HBe(+)、抗-H
罗氏Cobas-HBV病毒载量检测获CE标志
2015年3月2日,罗氏公司公布其Cobas HBV对乙肝病毒的载量检测已获得CE标志。 该检测方法是一种基于Cobas 6800/8800系统对HBV基因型(A-H)的实时PCR测试。中期和高通量PCR系统在2013年公布,允许快速、自动、混合批量处理。Cobas 6800/8800 CMV
HBV的各种检测方法和效果
乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的世界性传染性疾病。据统计,全世界无症状乙肝病毒携带者(HBsAg携带者)超过3.5亿。因而乙肝的检测、预防和治疗显得尤为重要。中国计量科学研究隋志伟等人在汉斯期刊《医学诊断》上发表了一篇关于HBV生物标志物及其检测方法的研究综述。据了解,用于研究HBV的
乙肝血清学标志物定量检测及其临床意义
全球60 亿人口中, 约1/2 人口生活在乙肝病毒(HBV ) 高流行区, 约20 亿人证明有HBV 感染, 3~4 亿人为HBV 慢性感染, 每年约有100 万人死于HBV 感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)。2005 年12 月10 日中华医学会肝病学分会和中华医学会感染学
HBV血清标志物与乙肝病毒前S1抗原检测结果对比分析与...
HBV血清标志物与乙肝病毒前S1抗原检测结果对比分析与临床意义 Clinic meanings and analysis of the sign of HBV in bloodserum and pre
乙型肝炎病毒耐药基因检测概述
一、乙型肝炎病毒耐药基因检测的临床意义 WHO相关资料显示,全球感染过乙型肝炎病毒(HBV)的患者超过三分之一,而慢性乙型肝炎患者约有2.4亿,乙肝严重影响着人类的生命健康。HBV是传染性疾病乙型病毒性肝炎的主要病因,感染HBV可引起肝硬化甚至肝细胞癌变。HBV属嗜肝DNA病毒科,为双链DNA
肝炎病毒标志物的检验,你知道多少?
各类病毒型肝炎传播途径(不是所有类型肝炎均通过吃饭传播):甲型、戊型病毒型肝炎主要通过消化道传播;乙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、母婴传播;丙型病毒型肝炎主要通过输血、性接触、纹身、吸毒注射器、母婴传播;丁肝主要是血液传播。 肝炎病毒标志物知多少? 甲型肝炎 甲型肝炎:(HAV-IgM
乙肝病毒血清标记物与血清HBVDNA的关系(2)
3 讨论 HBV血清学标志物检测是乙型肝炎病原学诊断的指标, 包括HBsAg、 HBsAb、 HBeAg、 HBeAb和HBcAb五项指标。HBsAg阳性表示存在HBV感染, 见于急性肝炎、 慢性肝炎或无症状携带者。HBeAg是HBV复制的指标之一。 HBsAb阳性表明曾经感染过
乙肝病毒携带产妇血清和乳汁HBV-DNA的相关性探讨
作者:江冬梅 朱海滨 作者单位:272000山东济宁市传染病医院分子生物学实验室【摘要】 目的:探讨产妇血清和乳汁HBV-DNA的相关性,以指导母乳喂养。方法:选取2003年3月~2008年6月在门诊或住院的乙型病毒性肝炎病毒携带产妇115例,采用荧光定量PCR检测产妇血清和乳汁HBV-DNA
肝炎标志物的常用检测方法
患者在做乙肝五项检查时会发现化验结果有时会有不同的单位,例如HBsAg有时显示阳性或者阴性,有的时候标注的是COI值,有的时候是IU/ml。有的化验单上还会标注所用的试剂和检验方法。那么它们有什么区别吗?目前乙肝五项的检测方法有三大类,一类是定性检测,另外两类就是半定量和定量检测。定性检测有国产乙肝
荧光PCR法检测RNasin性能效果
实验目的:对RNasin性能效果进行检测及评估。 实验材料及设备: 模板RNA:大鼠肌肉组织RNA 引物:Rat β-acting:Forward CCCATCTATGAGGGTTACGC Reverse TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase:50mg/ml(simgen)
荧光PCR法检测RNasin性能效果
实验目的:对RNasin性能效果进行检测及评估。实验材料及设备:模板RNA:大鼠肌肉组织RNA引物:Rat β-acting:Forward CCCATCTATGAGGGTTACGCReverse TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase:50mg/ml(simgen)RNasin:4
免疫PCR法检测有哪些特点
免疫PCR法检测有哪些特点?:免疫PCR综合了固相免疫反应和PCR两者的特点。因而在保证免疫测定特异性的同时,又具有极高的检测灵敏度。免疫PCR的基本原理与执业护士网常规标记免疫技术相似,只不过在免疫PCR中所用的抗原或抗体标记物为DNA,在固相免疫结合反应完成后,再采用PCR技术对标记DNA进行扩
乙肝检测项目结果解析大全
生物化学检查血清ALT与AST血清ALT(丙氨酸氨基转移酶)和AST(门冬氨酸氨基转移酶)水平一般可反映肝细胞损伤程度,最为常用。若大于正常上界10 倍见于急性病毒性肝炎、中毒性(药物性)肝坏死和缺血性肝炎。但转氨酶水平的高低不能完全代表肝功能的好坏, 更确切地说转氨酶水平与肝功状态不成平行关系。A
乙型肝炎病毒大蛋白检测在拉米夫定抗病毒治疗中的应...
乙型肝炎病毒大蛋白检测在拉米夫定抗病毒治疗中的应用研究 目的 通过检测拉米夫定治疗患者血清中的乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP),同时检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量,探讨拉米夫定治疗过程中HBV-LP与HBV-DNA的关系,观察乙型肝炎病毒大蛋白用于评估拉米夫定抗病毒治疗
qpcr和ddpcr基因检测的区别
QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂,构成PCR-DNA终点法定量检测(End-point quantitat
乙肝病毒DNA载量很高,抗原胶体金却显示阴性,原因竟是
乙型肝炎病毒(HBV)感染可导致肝脏的炎症,称乙型病毒肝炎,是严重危害人类生命健康的病毒之一,乙型肝炎在我国的发病率较高,占我国总人口的10%,约1.3亿人是乙肝病毒携带者,因此临床对于HBV诊断与治疗工作也非常重视。 乙肝病毒感染目前诊断主要是测定血清中五项标志物包括乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
核酸扩增荧光定量检测
如果怀疑有乙肝的情况,那么需要到医院进行专业的检查,比如做核酸扩增荧光定量检测之类的,当然核酸扩增荧光定量检测还可以测量其他方面的情况,比如测解脲脲原体,接下来我们来了解一下核酸扩增荧光定量检测的相关情况吧。核酸扩增荧光定量检测检查什么核酸方面的检查有核酸扩增荧光定量检测检查,那么核酸扩增荧光定量检
乙肝HBV基因分型检测原理
1、全面型别分析 采用Sanger测序法对乙肝病毒进行分型基因检测。通过提取慢性乙型肝炎患者血液中的病毒DNA,利用特异性引物对HBVDNA中的基因进行PCR扩增。通过对扩增后的目的基因进行测序,将测序信息与NCBI中标准株的序列信息进行比对,可一次性检出慢性乙型肝炎病毒A、B、C、D
简述HBVDNA的检测意义
乙肝病毒检测有两个意义,一个是乙肝病毒DNA定性检测,一个是定量检测,另外还有一个是基因分析和耐药的变异检测,定性检测比定量要求高,这点在国内是比较忽视的。 还有定量的问题,强调用干扰素和核苷类似物进行抗病毒治疗,无论是哪一种药物的治疗,乙型肝炎病毒的滴度和阴转都是考核抗病毒治疗的硬性指标,所
如何看荧光定量PCR检验报告单?
荧光定量 PCR 检测是反映被检标本中病毒 DNA/RNA 存在的多少,结果通常用数字表示(即 X×10 n copies/ml ),定量检测结果主要是对抗病毒治疗疗效提供检测和参考。 HBV DNA 、 HCV RNA 的定量单位在报告单上通常用“ copies/ml ”表示每毫
检验科如何与临床对话?
随着当代物理学、化学、免疫学和分子生物学技术的飞速发展,疾病的精确诊断正越来越依赖于实验室和影像学技术。然而从医院检验科出具的化验单也正让人越来越看不懂,不光是患者感到迷惑,就是临床医生,也常常不明其义,或得到错误结论,或对检验科工作发出不适当的抱怨。为了避免这些问题,就需要检验科积极地与临床进行“
乙肝两对半检查临床意义(四)
六、乙肝两对半4 5项阳性是什么意思 乙肝两对半45阳性分为两种情况: 一、表示乙肝病毒感染,但是人体免疫力已经清除或者正在清除,属于病情康复期。所以,应坚持保健和治疗,待第四项阳性消失,即可痊愈。同时,应注意自身不存在乙肝表面抗体,无保护作用,所以,应接种乙肝疫苗,按照0.1.6原则进行,产生
侧向层析检测替代PCR的新型快速检测法
用传统的微生物分析法检测沙门氏菌、克罗诺杆菌等,往往需耗时4天。本文介绍的借助于杂化传感技术的新型检测方式,可在几分钟内完成对rRNA(核糖体核糖核酸)的检测,也可应用于易腐及敏感性食品的快速检测。 侧向层析检测已在妊娠测试等诸多诊断中得到应用。该方法与奥地利SY-Lab 公司开
PCRELISA端粒酶检测法
端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复
PCRELISA端粒酶检测法
端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复