硝酸纤维素膜(NC膜)的简介和生产原理3

NC膜的应用举例分子杂交杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。固相杂交技术目前较为常用,先将待测核酸结合到一定的固相支持物上,再与液相中的标记探针进行杂交。固相支持物常用硝酸纤维素膜。固相杂交包括膜上印迹杂交和原位杂交。前者包括三个基本过程:第一,通过印迹技术将核酸片段转移到固相支持物上;第二,用标记探针与支持物上的核酸片段进行杂交;第三,杂交信号的检测。用探针对细胞或组织切片中的核酸杂交并进行检测的方法称之为核酸原位杂交。某特点是靶分子固定在细胞中,细胞固定在载玻片上,以固定的细胞代替纯化的核酸,然后将载玻片浸入溶有探针的溶液里,探针进入组织细胞与靶分子杂交,而靶分子仍固定在细胞内。例如。可用特异性的细菌、病毒的核酸做为探针对组织、细胞进行原位杂交,以确定有无该病原体的感染等。原位杂交不需从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性,在临床应用上有独特的意义。下面以放射性标记探针与固定在NC膜上的核酸进行杂交为例,杂......阅读全文

蛋白质的电转实验

很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80 μg/cm2。实验方法基本方案 实验材料 蛋白质  试剂、试剂盒 转移缓冲液 甲醇 电极缓冲液 

蛋白质的电转

实验概要很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80μg/cm2。与其它膜相比,NC膜具有不要预先活化,对转移物质生物活性影响不大,能应用多种染

离子交换膜的简介和类型介绍

  离子交换膜是一种含离子基团的、对溶液里的离子具有选择透过能力的高分子膜。  因为一般在应用时主要是利用它的离子选择透过性,所以也称为离子选择透过性膜。1950年W.朱达首先合成了离子交换膜。1956年首次成功地用于电渗析脱盐工艺上。  离子交换膜是具有离子交换性能的、由高分子材料制成的薄膜(也有

湿膜轮的原理和操作介绍

   湿膜概述    涂层厚度是涂装施工需要控制的一项重要指标,涂层厚度控制得是否合理,将直接影响涂层的其他性能。    在涂层的防蚀机理中,其屏蔽作用是主要因素,而涂层的屏蔽作用是与涂层厚度密切相关的。    此外,在对各涂料产品的性能比较方面也只有在相同的涂层厚度下才具有可比性;   

转膜时甲醇的作用

  转膜  将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如 NC 膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白转移,所

影响蛋白与硝酸纤维素膜结合的四个主要方面

1、用于溶解捕获试剂的缓冲液2、膜本身3、捕获试剂本身4、蛋白结合时的周围环境(主要指湿度) 缓冲液的使用合适的缓冲液必需能够溶解捕获蛋白以达到应用所需浓度,并能保持稳定(换言之,即溶解蛋白并维持其结合能力)。要获得最佳的结合意味着创造利于蛋白分散于固相的最佳条件。随着捕获蛋白不同,蛋白与膜结合的优

Southern-Blot实验原理及方法

实验原理:Southern Blot是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,

关于Southern杂交的转膜的介绍

  即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上,因此,凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂,转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与在凝胶中的相对位置仍然一样,故而称为印迹(blot

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究-1

摘 要:腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/ mL (0

western-blot的实验原理

Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上

NC94CYN3A多用磁粉探伤仪特点及用途

  NC94-CYN3A多用磁粉探伤仪具有磁轭,旋转磁场探伤双重功能。仪器采用可控硅作无触点开关,噪音小,寿命长,工作稳定,可靠性好。整机设计体积小,重量轻,携带方便。主要技术指标:提升力:交流磁轭98N(10Kg);带活动关节时69N(7 Kg);旋转磁场98N(10 Kg)(被探工件表面与探头端

关于斑点杂交的基本信息介绍

  斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

什么是斑点杂交?

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交的技术特点和应用

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交的技术特点

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧(二)

不同秒数的膜对反应有什么影响呢?首先,我们分析一下液体在膜上的运动过程. 一张长度为4cm的膜, 每隔1cm做一个标记, 当液体运动过标记处时记录时间点. 那么你将会发现液体在膜上的运动是呈减速前行的. 而两张不同秒数的膜(例如135s, 180s)在同一时间标记点处的运动速度不同.这个试验

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧1

硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论. 一. NC膜的生产原理这个虽然看上去

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧2

五.膜的深入探讨和应用技巧从本节开始,我们开始对膜进行深入讨论和谈一些应用技巧.1. 蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理, 已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑.主要有两种假说:1) 首先两者靠静电作用力结合, 然后靠H键和疏水作用来维持长时间结

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧(三)

2. 膜对结合的影响1)膜孔径有些技术人员倾向使用膜孔径来区分不同的膜,但是请注意这只仅仅限于同一厂家的产品,如果是不同厂家的产品,这种比较是无意义的. 膜孔径与层析速度的关系,已在上文描述. 随着膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增. 估量表面积的参数为表面积比率(实际可用表面

斑点酶联免疫吸附测定(DELISA)材料和方法

(以快速诊断口蹄疫为例) 斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究   刘仁沿1 , 梁玉波3 1 , 陈 媛2 , 许道艳1 , 陈冰君1 , 刘永健1   (1. 国家海洋环境监测中心,辽宁大连116023 ;   2. 江西中德生物工程有限公司,江西南昌330029)   摘 要:腹泻性贝毒是一类分布较

代做实验|蛋白质印迹实验具体操作步骤

  蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体 作为探针与之结合,经洗涤后,再将滤膜与二级试剂-放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 偶联抗免疫球蛋白抗体 结合,进一步洗涤后,通过放射自显影或原

代做实验|蛋白质印迹实验具体操作步骤

   蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体 作为探针与之结合,经洗涤后,再将滤膜与二级试剂-放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 偶联抗免疫球蛋白抗体 结合,进一步洗涤后,通过放射自显影或原位酶反

旋涡气泵的简介和原理

  旋涡气泵是高压鼓风机的一种,也叫环形风机,其工作原理于早在第二次工业革命时代,为顺应工业对流体控制及气动原件的的需要,在德国,日本,美国前后泛起了轻松的离心式高压风机,早期人们对此界说为离心风泵  旋涡气泵的叶轮由数数片叶片组成,它类似庞大的气轮机的叶轮。叶轮叶片中间的空气受到了离心力的作用,向

照度仪的简介和原理

  照度仪是用来测量光线强弱等级的专用设备。在某些特定的环境对光的照度是有严格要求的,如用人工对药品的检验就对光的照度有严格的要求。  照度仪的原理  用锗光电池作探头,由于光的强度不同光电池产生的电流就不同,再把这个电流进行直流放大,再经过数模转换电路把直流信号变成直截反应光照强弱的数字信号显示出

冰点仪的简介和原理

  定义   冰点(凝固点)(freezing point)是在一定非固体物质,一定压力下等条件,变为固态,称之为冰点或凝固点.  淡水在0℃结冰,叫做冰点。生牛乳的冰点是一个不确定的温度。因为,生乳中含有大量的无机盐,蛋白、脂肪。所以牛乳的冰点的变化与牛乳中的成份和密度有密切的关系,正常牛奶的冰点

普通晶闸管的简介和原理

  普通晶闸管是一种半可控大功率半导体器件,出现于70年代。是pnpn四层半导体结构,普通晶闸管它有三个极:阳极,阴极和门极; 晶闸管具有硅整流器件的特性,能在高电压、大电流条件下工作,它的出现使半导体器件由弱电领域扩展到强电领域。  基本工作原理  普通晶闸管t在工作过程中,它的阳极a和阴极k与电

膜性肾病的简介

  膜性肾病是一个病理形态学诊断名词,是导致成人肾病综合征的一个常见病因,其特征性的病理学改变是肾小球毛细血管袢上皮侧可见大量免疫复合物沉积。临床表现为肾病综合征(大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿、高脂血症),或无症状、非肾病范围的蛋白尿。

葡萄膜病的简介

   葡萄膜病  葡萄膜包括包括三部分虹膜、睫状体及脉络膜。虹膜为围绕黑色瞳孔的彩色膜,瞳孔尤如照相机的光圈,可以开大和缩小。睫状体内的肌肉,可使晶状体变厚或变薄,因此远处和近处的物体都能看清楚。脉络膜衬于眼球内面,前方起于睫状体,向后延伸至眼底后极部的视神经。葡萄膜疾病以炎症最多见,称葡萄膜炎,分

膜脂的功能简介

  ◆构成膜的基本骨架,去除膜脂,则使膜解体;  ◆是膜蛋白的溶剂,一些蛋白通过疏水端同膜脂作用,使蛋白镶嵌在膜上,得以执行特殊的功能;  ◆膜脂为某些膜蛋白(酶)维持构象、表现活性提供环境,一般膜脂本身不参与反应(细菌的膜脂参与反应);  ◆膜上有很多酶的活性依赖于膜脂的存在。有些膜蛋白只有在特异