追踪血液足迹，新方法有望利用血液cfDNA准确诊断癌症
尽管组织活检仍然是确诊癌症的金标准，但是来自血浆的侵入性较低的液体活检正成为越来越可靠的癌症筛查和分期工具。液体活检性能的基础是伴随正常细胞更新的DNA脱落。在癌症患者中，无细胞DNA（cell-free DNA, cfDNA）的数量会随着肿瘤负荷的增加而增加，这是因为起源于癌症的DNA代表了最活跃地死掉和分裂的细胞群体。当从血浆中取样时，对循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA, ctDNA）的检测很大程度上基于cfDNA的下一代测序和鉴定源自肿瘤细胞的体细胞突变。图片来自Nature Communications, 2019, doi:10.1038/s41467-019-12714-4。 大多数ctDNA检测平台使用杂交捕获富集来快速、优先地对癌基因或肿瘤抑制基因的编码区进行测序，这可以指导精确治疗，尤其是在没有组织活检的情况下。在一项新的研究中，Ulz等人对来自健康志愿者和癌症患者的血浆cfDN......阅读全文
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定1
㈣ DNA聚合酶 如前所述，选用合适的DNA聚合酶进行测序反应也是保证测序质量的重要因素之一。常用于双脱氧末端终止法测序的有几种不同的酶： 1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段（Klenow片段） 此酶是最早用于建立Sanger测序的酶。但通常会有两个问题：①Klenow片段的持续合成能力较
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定2
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法（双脱氧链终止法）和Maxam（1977）提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组核苷酸都有共同的起点，却随机终止于一种（或多种）特定的残基，形成一系列以某一特定核苷酸
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA序列测定3
2．利用末端转移酶和α-32P-ddNTP标记DNA的3ˊ-末端 在二价阳离子存在下，末端转移酶催化dNTP加入DNA分子的3ˊ-羟基末端，如果作为底物的核苷酸经过修饰（如ddNTP），则可以在DNA的3ˊ-OH上仅加入一个核苷酸。对于双链DNA片段，亦存在DNA的两侧均被标记问题，可通过上述同
血液的特性
血液特性通常指的红细胞的悬浮稳定性、粘滞性和凝固性。1.红细胞的悬浮稳定性：正常人血液中红细胞呈均匀混悬状态。与红细胞膜表面的唾液酸根（形成Zeta电位使红细胞间相互排斥保持一定距离）、正常血浆成分、血浆粘度及血流动力学等因素有关。2.粘滞性：正常人全血粘度约为生理盐水粘度的4-5倍，血浆粘度约为生
血液凝固（四）
(二)纤溶抑制物 机体组织和体液广泛存在纤溶抑制物。按其作用可分为：纤溶酶原激活的抑制物；纤溶酶抑制物，又称抗纤溶酶(antiplasmin)。除接触活化阶段外，均需Ca＋＋参与，图中未显示) 正常血液中抗纤溶酶活性是纤溶酶活性的20?0倍。故在生理条件下，纤溶酶难以发挥作用。抗纤溶酶有两种
血液生理概要
1.血液的组成血液由血细胞（红细胞、白细胞、血小板）和血浆组成。离体后血液自然凝固，分离的淡黄色透明液体称为血清。血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。血清与血浆差别是：血清缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等。全血适用于临床血液学检查，如血细胞计数、分类和形
血液细胞染色
1）瑞氏染色法：为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。 瑞氏染料：是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料医`学教育网搜集整理。 染色原理：是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的
动物血液采集
实验方法原理 实验材料 小鼠仪器、耗材 毛细吸管烧杯（盛自来水用）实验步骤 1. 右手拖鼠尾，左手的食指放在小鼠左耳后面，拇指放在右耳上，然后两手指抓住此两处的皮肤，并使小鼠的头向左转，而右眼朝上，此时由於颈静脉堵塞而使眼眶内血管丛充血，眼睛是突出的。2. 右手用一毛细吸管轻轻从小鼠右眼的边缘当中插
血液组成介绍
血液组成介绍： 血液是人体的重要组成部分，它维持着人体各部分的生理功能，是维持生命的基本成分之一，没有了血液，人的生命将不会存在。血液是如此的重要，那么血液的组成是怎样的呢？ 简单地说，血液主要由血浆和血细胞（就是人们所说的血球）两大部分组成，将血液用抗凝剂抗凝处理后，放在离心机内离心或静置一段
血液凝固（一）
血液的可凝固性质对机体有重要保护作用。当血管系统受伤时，必须迅速可靠地封闭起来，以尽可能减少出血。血小板变形(粘性变态)参于封闭作用，此种封闭作用要靠纤维蛋白凝结物的支持，而后者的形成是多种凝血因子相互作用，发生一系列酶促反应的结果。目前已发现的凝血因子有14种(表10-3)。 这些凝血因子除Ca
血液ctDNA检测
日前，美国约翰霍普金斯癌症中心及墨尔本大学的科学家在《Science Translational Medicine》杂志上表明，通过检测癌症相关的血液循环DNA可准确预测部分早期结肠癌患者的癌症复发。 血液中存在ctDNA，癌症复发的可能性更大 在该研究中，科学家对澳大利亚13家医院的
血液凝固（二）
(一)内源性途径内源性途径涉及多种凝血因子活化，可分为二步：接触活化 是因子Ⅻ，也称Hagemann因子的激活作用。此蛋白质在接触到荷负电的表面，如玻璃或在体内接触到胶原蛋白时，发生构象改变，激活的因子Ⅻa为一蛋白酶，能将激肽释放酶原转变为激肽释放酶，又可活化因子Ⅻ，形成一个正反馈。同时因子Ⅻa还
血液凝固（三）
五、凝血作用的调节 由上所述，凝血过程是一个级联放大的瀑布效应，加之正反馈作用，可把最初生成的酶活性极大增强，把所有步骤加起来可增强106倍。如此高的激活速度会对机体构成危险，就是说，此过程一旦启动，整个血液就会凝固起来。此外，血凝可造成心肌梗死、脑血栓等严重疾病。因此，机体内的凝血作用必须保
DNA重组技术(DNA－Recombination)
一、DNA 的酶切与连接（1）酶切反应：同质粒DNA 的鉴定，只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切，则成比例增加。（2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。（3）15000rpm离心15min，弃上清。（4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃
血液净化技术—血液灌流的基本信息介绍
血液灌流（HP）是将患者的血液引入装有固态吸附剂的灌流器中，通过吸附作用，清除血液中透析不能清除的外源性或内源性毒素、药物或代谢废物的一种血液净化技术 [1]。主要用于抢救药物和毒物中毒，也可与血液透析合用以清除慢性肾功能衰竭维持性透析患者体内的大分子毒素。
血液净化技术—血液灌流的准备工作介绍
1、血液灌流— 器械准备 根据治疗中心的设备，可选用CRRT机器、血液透析机或血液灌流机。选择合适的灌流器（灌流器型号具有不同功能），使用前阅读说明书，检查包装及有效期。 2、血液灌流— 建立血管通路 紧急灌流治疗的患者常规选用临时性血管通路，首选深静脉置管（股静脉或颈内静脉）。若维持性血
血液净化技术—血液灌流的基本原理
血液灌流的基本原理是吸附。灌流柱由吸附剂和包裹材料构成，吸附剂有树脂和活性炭，有吸附液体中溶解物质及胶体物质的能力。根据吸附剂表面与被吸附物之间作用力的性质可以将吸附分为物理吸附、化学吸附两种基本类型。如果吸附剂与被吸附物质之间是通过分子间引力（即范德华力）而产生吸附，称为物理吸附。如果吸附剂与
血液的化学检验项目血液葡萄糖介绍
血液葡萄糖介绍： 血清葡萄糖，其测定方法有邻甲苯胺法、葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法和干化学法。其中已糖激酶法为国际推荐的参考方法，但试剂比较昂贵，我国推荐的葡萄糖氧化酶法在国内外应用甚广，目前有些单位仍沿用邻甲苯胺法。血液葡萄糖正常值： (1) 空腹： ① 邻甲苯胺法(O-TB)
血液净化技术—血液灌流的注意事项介绍
1、血液灌流— 治疗前应评估患者的凝血状况和抗凝剂的选择。 2、血液灌流— 血液灌流的血流速一般以100～200 mL/min为宜，每隔2 h更换一个灌流器，但一次灌流治疗的时间不宜超过6 h。 3、血液灌流— 灌流过程中如果患者出现血压下降，则要降低血泵速度，适当扩容，必要时加用升压药物，
什么是血液循环？血液循环的过程
心脏节律性的搏动推动血液在心血管系统中按一定方向循环往复地流动。血液循环是英国哈维根据大量的实验、观察和逻辑推理于1628年提出的科学概念。然而限于当时的条件，他并不完全了解血液是如何由动脉流向静脉的。1661年意大利马尔庇基在显微镜下发现了动、静脉之间的毛细血管，从而完全证明了哈维的正确推断。动物
简述血液净化技术—血液灌流的并发症
1、血液灌流的并发症—血小板减少：是血液灌流最典型的并发症，其程度与吸附剂材料有关，血小板下降在灌流开始后0.5～1.0 h最显著，减少可达40%～50%，此后渐回升，灌流2~3h结束后，血小板的下降一般在10%～30%，个别患者可出现血小板缺乏。 2、血液灌流的并发症—血液灌流对其他血液有形
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定1
重组DNA是在体外用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异地切割，获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接，从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，在宿主细胞中进行无性增殖，获得大量的目的基因或DNA片段，此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体3
在作为载体时，这些噬菌体有一个很大的优点，即克隆到M13mp载体的外源DNA片段（双链），在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆，可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板：①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板；②制备仅有一条
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定2
（1）CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子（如Ca2+、Mg2+等）低渗溶液中时，细菌细胞膨胀成球形，处于感受态；此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面，在丰富培养基中生长数小时后，球状细胞恢复原
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定3
当多克隆位点有外源DNA片段插入时，破坏此酶的N端阅读框架，产生无α互补功能的N端片段，因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色，见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短，不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框，有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体1
载体（vector）是携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型，亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体2
二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体，大多数具有编码多种蛋白质的基因，能利用宿主细胞的蛋白质合成体系，进行生长和增殖。构建的噬菌体载体，以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA，全部序列已知，共编码50多个基因。其中约一半基因参与
血液的化学检验项目血液分析仪检查介绍
血液分析仪检查介绍： 现在各大医院普遍使用自动血液分析仪，它能快速检测多份标本，且一次能提供多项检测指标。血液分析仪检查正常值： 白细胞计数（WBC）：（4-10）×10^9／L； 红细胞计数（RBC）：（3.8-5.5）×10^12／L； 血红蛋白量（Hb）：（110-170）×g／L；
双氧水遇到血液为什么血液会变成无色
如果是未经稀释的双氧水，其含H2O2为30%，是一种强氧化剂，遇到还原性较强的物质，包括蛋白质，都会发生强烈的化学反应，但无论是反应过程有多复杂，都会有氧气产生，所以，这一过程就会有气泡产生，产生泡沫是正常的现象。
血液分析对血液系统疾病筛查的意义
三分群五分群血细胞分析仪的广泛应用，大大提高了临床血液学检验的质量和速度。然而，它们仅作为血液学分析的过筛手段，遇到问题时还必须用显微镜复查血片，方能发出报告。根据朱晓辉等的观点，笔者采用血细胞分析仪筛查，形态学复查，查出血液系统疾病162例，现报道如下。 1．资料与方法