方案27.7昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜 Pluronic F68 试剂、试剂盒 生长培养液 仪器、耗材 培养瓶 旋转培养瓶和磁力搅拌器 27°C培养箱 实验步骤 常规维持培养1. 通过刮......阅读全文
昆虫细胞的扩增
实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CRL-171
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料 Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤 常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CR
昆虫细胞转染实验
实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1. 接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿,吸取40
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜
昆虫细胞转染实验
实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1. 接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿,吸取40 ul 无菌
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
昆虫细胞的保存培养实验
实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细胞培养基 TNM-FH
昆虫细胞共转染实验
实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T
昆虫细胞的保存培养实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞
昆虫细胞共转染实验
基本方案 用线性化杆状病毒DNA 实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞
昆虫细胞的保存培养实验
基本方案实验方法原理实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞 试剂、试剂盒70%乙醇
昆虫细胞共转染实验
实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒 ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材 含 10% 胎牛
昆虫细胞的保存培养实验
实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒 70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材 无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤 1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细
方案27.7-昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜
昆虫细胞的保存和培养实验
实验材料 昆虫试剂、试剂盒 胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材 培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤 1. 将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安
昆虫细胞的保存和培养实验
实验材料昆虫试剂、试剂盒胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤1. 将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安瓿浸入7
杆状病毒昆虫细胞表达系统
实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中
杆状病毒昆虫细胞表达系统
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成
昆虫细胞高MOI杆病毒感染
高MOI( Multiplicity Of Infection,等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值)感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP(Defective Interfering Particles,即只包装入部分基因组的病毒颗粒)的形成,因为关心的是细胞或者培养液中的蛋
杆状病毒昆虫细胞表达系统2
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒
杆状病毒昆虫细胞表达系统3
七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新
昆虫细胞的低MOI杆病毒感染
感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys
昆虫sf9细胞的直径为多少
17nm左右。sf9是一种生物学实验常用的昆虫细胞,通常作为昆虫平台用来生产各种蛋白、病毒,或用于基础研究。sf9 是Spodoptera frugiperda cell 的缩写,即草地贪夜蛾细胞,草地贪夜蛾也称草地夜蛾。这些细胞系绝大多数来自于鳞翅目和双翅目的农业害虫,其来源组织包括卵巢、精巢、胚
如何使昆虫细胞适应新的培养液
市场上供应的大多数培养液的配方非常接近,这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法,这个方法是保守的,在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中,观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞,不过也很容易扩展到贴壁细胞。细
昆虫SF9细胞是由什么得来的
通常认为 SF9自身不含有病毒污染,更多信息你可以多多搜索一下。PS,2014年新闻报道显示,“美国食品药物监督局FDA的研究人员发现,这种被认为无病毒污染的细胞系,实际上潜伏着一种之前并未发现过的病毒,研究人员将其命名为Sf弹状病毒(Sf-rhabdovirus)。”SF9 或者 SF21细胞。
关于昆虫细胞培养的发展和关键点介绍
随着生命科学的迅速发展,细胞工程愈来愈受到人们的重视。以昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值,已经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。昆虫细胞是农业生物应用方面的高新技术,主要是提取来自昆虫的一类真核细胞。通过培养制造宿主的病毒,这些病毒可以引起昆虫流行病,但对人畜和植
昆虫求偶也“送礼”
两性冲突普遍存在于昆虫的繁殖行为中,蝎蛉也不例外。海南大学、首都师范大学团队依据已知化石和现生样本中雄性蝎蛉形态比对,针对腹部生殖和非生殖结构差异,推测其交配模式的演化存在献礼、强制交配两个明显趋势。4月6日,研究成果《性冲突:成功交配的新途径》发表在国际期刊eLife上。 长翅目昆虫俗称蝎蛉,
昆虫卵巢解剖
实验概要本实验拟在掌握昆虫卵巢解剖的方法。昆虫的生殖系统是繁衍种族所必需的。由于雌雄生殖腺的发育特点不同,在许多昆虫成虫期只有雌虫仍继续发育,因而一般也只有雌的生殖腺发育被广泛应用。通过对昆虫的生殖生物学的研究,剖析雌性生殖系统的发育进度,对害虫预报具有一定的意义,并且是了解和研究其发生规律的重要的
中国昆虫学会专家共商深圳昆虫科技馆建设
近日,中国农科院、中国昆虫学会联合召开专家咨询会,对中国农业科学院农业基因组研究所(简称“基因组所”)深圳昆虫科技馆建设方案进行论证,中国昆虫学会副理事长、中国农业科学院副院长吴孔明院士主持会议,来自中科院动物所、中科院上海植生所、南京农业大学等单位的昆虫研究领域知名专家及学会理事共16人参加了