昆虫细胞的保存培养实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细胞培养基 TNM-FH 加入到一个 60 mm 组织培养皿或 25 cm2 培养瓶中。2. 取出一支冻存 Sf 9 细胞的安瓿,迅速置于 37℃ 水浴,用手前后摇动融化。当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安瓿浸入 70% 乙醇,消毒外壁。3. 打碎安瓿颈部,将内容物转移至步骤 1 的 60 组织培养皿或 25 cm2 培养瓶。用手轻轻摇动,使细胞分散均匀,置 27℃ 温育 2~3 h 直到细胞贴壁。4. 除去旧培养液,换 3 ml 新鲜培养液 TNM-FH/10%FBS,继续温育。每 3 天换液一次(除去旧培养液换新鲜的),直到细胞生长汇......阅读全文

昆虫细胞的保存培养实验

实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒 70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材 无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤 1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细

昆虫细胞的保存培养实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞

昆虫细胞的保存培养实验

基本方案实验方法原理实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞                                                          试剂、试剂盒70%乙醇                                                      

昆虫细胞的保存培养实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞试剂、试剂盒70%乙醇0.4%(m V)台盼蓝仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基60 mm 培养皿或 25 cm2 培养瓶 27℃ 培养箱旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台离心机带螺口盖的冻存管液氮罐实验步骤1. 将 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆虫细胞培养基 TNM-FH

昆虫细胞的保存和培养实验

实验材料 昆虫试剂、试剂盒 胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材 培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤 1.  将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安

昆虫细胞的保存和培养实验

实验材料昆虫试剂、试剂盒胎牛血清台盼蓝乙醇仪器、耗材培养瓶培养箱细胞计数器搅拌台转子离心机实验步骤1.  将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后剧烈摇动融化之,当安瓿的内容物几乎完全融化时,将安瓿浸入7

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

昆虫细胞转染实验

实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1.  接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40 ul 无菌

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

昆虫细胞转染实验

实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1.  接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40

昆虫细胞共转染实验

基本方案 用线性化杆状病毒DNA             实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞

昆虫细胞共转染实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T

昆虫细胞共转染实验

实验方法原理 实验材料 草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒 ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材 含 10% 胎牛

细胞培养标本的采集及保存

细胞培养标本的采集及保存:1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放

如何使昆虫细胞适应新的培养液

市场上供应的大多数培养液的配方非常接近,这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法,这个方法是保守的,在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中,观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞,不过也很容易扩展到贴壁细胞。细

微藻助力,让昆虫化石完整保存

 来自法国普罗旺斯艾克斯组的蜘蛛化石。图片来自Alison Olcott一项研究发现,法国南部出土的2250万年前的蜘蛛化石之所以保存得异常完好,或许要得益于硅藻这种微藻的分泌物。化石记录中很少能看到体型小而脆弱的动物被完整地保存下来,比如蜘蛛、昆虫、两栖动物。最新描述的这种由硅藻协助的过程,或对人

关于昆虫细胞培养的发展和关键点介绍

随着生命科学的迅速发展,细胞工程愈来愈受到人们的重视。以昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值,已经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。昆虫细胞是农业生物应用方面的高新技术,主要是提取来自昆虫的一类真核细胞。通过培养制造宿主的病毒,这些病毒可以引起昆虫流行病,但对人畜和植

常规培养细胞计数、保存、运输等法

 细胞悬液制备后,要计算所含的细胞数量。一般以细胞数/毫升表示。用品:细胞悬液 培养液 计数板程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过盖片或出现

常规培养细胞计数、保存、运输等法

程序用酒精冲洗计数板后 擦净,将盖片覆在计算板上,微微移向一侧,以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶,轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液,使其充满计数板和盖片间的空隙中注意:勿使液体漫过盖片或出现气泡。镜下观察计数 计算计数板的四角大格内的细胞数,压线者只计算左侧和上方的,右和下的不计算在

昆虫细胞的扩增

            实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜

昆虫细胞的扩增

实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料 Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤 常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CR

昆虫细胞的扩增

实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CRL-171

细胞培养基的保存应该注意什么

细胞培养基的保存1.干粉,买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。2.配好的无血清培养基一定保存在4度,保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。3.加入血清的培养基,最好保存在4度不要超过1个月,从时间太长,活性下降。当然稍微长点也不一

一些细胞培养用液的保存事项

(1)双抗:200倍,(1ml/支)其终浓度为青霉素100U/ml;链霉素100ug/ml,-24 oC保存。 (2)L-谷氨酰胺:100倍,(1ml/支), 终浓度2mM,-24 oC保存。 (3)丙酮酸钠:配制浓度50mM,4ml/支,终浓度为1mM/ml, -24 oC保存。 (4)Hepes

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

简介流式细胞术实验样本的保存

  样本的保存:理想状态下,样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温(16-25);EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温(16-25);ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温(16-25);对于只作胞内染色的样本,可固定细胞以长期保存。但

上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验

实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养;肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每