细菌细胞壁的染色法和细胞质膜的观察
一、目的要求 1.学习掌握细菌 细胞壁的染色法。 2.利用质壁分离法观察细菌的细胞壁和细胞质膜。 二、基本原理 细菌细胞壁很薄,革兰氏阳性菌的细胞壁为20—30nm,革兰氏阴性菌的细胞壁为10—13nm。组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖,它与染料结合的能力差,不易着色,在细菌的染色过程中,一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞,细胞壁本身并未染色,因此,欲通过染色来观察细胞壁,必须设法使细胞壁能着色,而细胞质则不易着色,常用的方法有单宁酸法和磷钼酸法。单宁酸和磷钼酸都是起媒染作用,它们使细胞壁形成可着色的复合物,而使细胞质不易被着色,经结晶紫或甲基绿染色后,便可在普通光学显微镜下观察到细胞壁。 根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙醚蒸气处理后,会产生质壁分离这一现象,经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。 三、器材 巨大芽孢杆菌(Bacillus megat......阅读全文
细菌形态学染色之革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
细菌中革兰氏染色法的过程是怎样的
微生物的染色方法很多,各种方法应用的染料也不尽相同,但是一般染色都要通过制片及一套染色操作程序.1、制片在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,挑取培养物少许,置载玻片的水滴中,与水混合做成悬液并涂成直径约1厘米的薄层,为避免因菌数过多聚成集团,不利观察个体形态,可在载玻片之一侧再加一
鞭毛染色法及活细菌运动性的观察
实验概要学习并掌握细菌鞭毛染色的基本方法及观察细菌鞭毛的着生情况;学习用压滴法和悬滴法观察细菌的运动性。实验原理鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01—0.02μm,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作
细菌芽孢染色实验_Schaeffer-Fulton-氏染色法
实验方法原理用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料蜡样芽孢杆菌(约2d 营
鞭毛染色法及活细菌运动性的观察
实验原理鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01—0.02μm,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色,在普通光学显微镜下能够看到。在显微镜下观察细菌
细菌形态学检查实验——荚膜染色法
实验方法原理细菌的荚膜(Capsule)具有保护细菌抵抗吞噬和消化的作用,可增加细菌的侵袭力。荚膜不易被普通染色法染色,需经特殊染色法染色后才能着色,易于观察。实验材料小白鼠试剂、试剂盒结晶紫染液硫酸铜溶液仪器、耗材滤纸片解剖器材实验步骤一、材料 经腹腔接种肺炎链球菌(Streptococcus
细菌形态学检查实验——鞭毛染色法
实验方法原理鞭毛(Flagella)是细菌的运动器官。细菌的鞭毛很纤细,直径仅20 nm,不能用普通显微镜观察,不易被普通染色法染色,只有经特殊染色处理,增加鞭毛直径,才能在光学显微镜下观察。实验材料伤寒杆菌试剂、试剂盒户田氏染色液蒸馏水清洁液仪器、耗材载物玻片实验步骤一、材料 伤寒杆菌(Bacil
细菌形态学检查实验——革兰氏染色法
实验方法原理细菌经结晶紫初染染成蓝色。革兰氏染色阳性菌(G+)细胞壁肽聚糖层数多,且肽聚糖为空间网状结构,再经乙醇脱水,网状结构更为致密,染料复合物不易从细胞内漏出,仍为蓝色。而革兰氏染色阴性菌(G-)细胞壁脂类含量多,肽聚糖层数少,且肽聚糖为平面片层结构,易被乙醇溶解,使细胞壁通透性增高,结合的染
革兰氏染色技巧
何为革兰氏染色: 革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的,染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌,是鉴定细菌最重要的分类依据之一。 染色有4种试剂: 初染剂:结晶紫,步骤中最先使用的试剂,把细菌染成蓝紫色。 媒染剂:革兰氏碘液,可与初染剂结合,形成结晶紫及碘复合物(CV-I),加强染料颜
“重口味”的副溶血性弧菌,我们这样检测和预防!
何为革兰氏染色: 革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的,染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌,是鉴定细菌最重要的分类依据之一。 染色有4种试剂: 初染剂:结晶紫,步骤中最先使用的试剂,把细菌染成蓝紫色。 媒染剂:革兰氏碘液,可与初染剂结合,形成结晶紫及碘复合物(C
革兰氏染色与细菌抗酸染色技术的操作技巧
兰氏染色和抗酸染色都属于细菌形态学检查法,提到革兰氏染色大家肯定都非常熟悉,但是说到抗酸染色你不一定了解。今天我们进入细菌的花花世界,聊一聊细菌界的这两大染色法: 革兰氏染色(Gram stain) 用途:由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立,直到现今,革兰氏染色法仍是细菌学
影响革兰氏染色正确性的因素有哪些
一、影响因素1、在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。2、假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改
影响革兰氏染色的因素有哪些
革兰氏染色是用来鉴辨细菌的一种方法,细菌细胞壁上的主要成份不同,利用这种染色法,可将细菌分成两大类。这种染色法是由一位丹麦医生汉斯。在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死
细菌的革兰氏染色和特殊形态观察
实验概要1. 学习细菌的革兰氏染色原理和方法2. 了解细菌的特殊形态结构:芽孢、荚膜、鞭毛实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙
细菌的革兰氏染色和特殊形态观察
实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱色,
细菌的革兰氏染色和特殊形态观察
实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中zui广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱
细菌的革兰氏染色和特殊形态观察
革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。近年来由于对细菌细胞壁的结构有了较深入的了解,对革兰染色的机制提出不同的看法。一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革
微生物学技术:细菌抗酸染色法
1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。3、方法(1)取洁净的
细菌形态学检查实验——芽胞染色法
实验方法原理芽胞(Spore)是细菌的休眠状态,对各种理化因素有强大的抵抗力,能耐受恶劣环境的影响。芽胞折光性很强,可经特殊染色法染色后,在光学显微镜下观察。本实验要求学生了解两种特殊染色法并认识这种细菌特殊构造。实验材料破伤风杆菌试剂、试剂盒孔雀绿水溶液花红水溶液铬酸水溶液石碳酸复红染硫酸美蓝染液
细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(1)
一、实验目的1.熟悉薄层层析的操作步骤。2.掌握薄层层析法分析细菌细胞壁糖的原理和方法。二、实验原理簿层层析是一种微量而快速的层析方法。该方法是把吸附剂或支持剂(例如硅胶或硅藻土)涂在玻璃板上成为一簿层,将要分析的样品滴加到薄层上,然后用合适的溶剂进行展开,使样品中各个成分分离,最后进行定性鉴定和定
细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(2)
四、操作步骤(一)菌体培养及样品的准备1.菌体培养:以枯草芽孢杆菌为例。培养基成分为:1%蛋白胨,0.5%氯化纳,1%牛肉汁,调pH 至7.2。将培养基装入500mL 三角瓶内,每瓶100mL,灭菌,5.52×10Pa,30分钟。灭菌后的培养基冷至约30℃,用接种环取菌株一环,接种于培养基内。摇床培
简单染色法与革兰氏染色法
(一)细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物 涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识
微生物的形态观察
一.实验目的1. 学习在油镜下观察微生物 的个体形态2. 了解革兰氏染色法的原理,并熟练掌握其操作步 二.实验原理微生物的细胞小且透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。因此,微生物染色技术是观察微生物形态结
革兰氏染色法的概念
革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后,阳性菌呈紫色,
微生物的染色技术及显微镜观察(二)
二、革兰氏染色法 1 目的 1.1 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 1.2 学习掌握革兰氏染色技术,巩固学习光学显微镜油镜的使用方法。2 原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain Gram氏创立的,革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰
细菌的简单染色和革兰氏染色及其注意事项(一)
革兰氏染色法(一)原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。酸性染料的离子带负电荷,能
什么是细胞壁?细胞壁分为几层?
细胞壁(cell wall),细胞外围的厚壁。是植物细胞特有的结构,具有保护和支持作用,并与植物细胞的吸收,蒸腾和物质的运输有关。细胞壁之厚薄常因组织、功能不同而异。植物、真菌、藻类和原核生物都具有细胞壁,而动物细胞不具有细胞壁。细胞壁分为3层,即胞间层(中层)、初生壁和次生壁。胞间层把相邻细胞粘在
细菌形态学检查之革兰氏染色
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。步骤 革兰氏染色法一般包
什么是抗酸细菌,其细胞壁成分和构造有何独特之处
抗酸杆菌又名分枝杆菌,是一类细长的杆菌,因繁殖时有分枝生长趋势而得名。本属细菌一般不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后,即能对抗盐酸酒精的脱色作用,故称抗酸性杆菌。其不产生内毒素或外毒素,既不具荚膜又不分泌侵袭性酶,致病性和菌体成分有关。本属细菌可分为:结核杆菌、非典型分枝杆菌、腐物寄生性分枝杆