化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法

化学法测定DNA含量可以用于:(1)转化、转染之前的质粒浓度估测;(2)对获取的DNA含量进行检测。实验方法原理DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质,在595nm 波长处有最大吸收。DNA 在40-400μg 范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应灵敏度。实验材料DNA样品试剂、试剂盒DNA 钠盐 NaOH 溶液二苯胺冰乙酸过氯酸乙醛仪器、耗材分光光度计水浴锅实验步骤1. 制作DNA 标准曲线:取12 支洁净干燥试管加入DNA标准溶液,加完各试剂后,充分混匀。于60℃水浴中保温1h,冷却后于595nm 波长处以1,2 管为空白调零,测定各管光密度(OD595nm)。取两管的平均值,以DNA 的含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。......阅读全文

化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法

(一)原理DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质,在595nm 波长处有最大吸收。DNA 在40-400μg 范围内,光吸收与DNA的浓度

化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法

化学法测定DNA含量可以用于:(1)转化、转染之前的质粒浓度估测;(2)对获取的DNA含量进行检测。实验方法原理DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质

化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法

            实验方法原理 DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质,在595nm 波长处有最大吸收

二苯胺法测定DNA含量

二苯胺法测定DNA含量【实验目的】 掌握二苯胺法测定DNA含量的原理和方法 【实验原理】 DNA分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解,产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊酸,后者与二苯胺试剂反应产生蓝色化合物,其反应如下图。蓝色化合物在595nm处有最大吸收,且DNA在40µg ~400

二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒使用说明

主要用途二苯胺DNA比色法定量测定试剂是一种旨在通过二苯胺与DNA的特异性结合反应,借助可见光波长的吸光峰值的变化,比色测定样品中DNA的绝对含量或浓度的技术方法。其适用于各种原核生物和真核生物的细胞或组织DNA以及环境中DNA含量分析。产品即到即用,性能稳定,简易方便,无需样品纯化,定量准确。技术

二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒使用说明

  二苯胺DNA比色法定量测定试剂盒产品说明书   主要用途   二苯胺DNA比色法定量测定试剂是一种旨在通过二苯胺与DNA的特异性结合反应,借助可见光波长的吸光峰值的变化,比色测定样品中DNA的绝对含量或浓度的技术方法。其适用于各种原核生物和真核生物的细胞或组织DNA以及环境中DNA含量分析。

比色法测定磷含量

钼精矿中钼的1删定,部颁标准[ 推荐用氧化性酸溶解样品,氨水分离铁的氧化物沉淀,滤液中钼用钼酸铅重量法测定.然后,碱熔酸不溶残渣.水浸熔块,用比色法测滤液中钼.两次测定之和为钼精矿中钼的含量.如此操作,手续较繁锁.本工作所改进的方法是用碳酸钠-硼酸钠于高温熔解,酸化熔块,加氨水除杂,用钼酸铅重量j击

地衣酚显色法测定RNA含量

原理 核糖核酸与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变为糠醛,后者与3,5-二羟基甲苯(地衣酚)反应呈鲜绿色,该反应需用三氯化铁或氯化铜作催化剂,反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20~250μ g范围内,光吸收与RNA的浓度成正比。地衣酚反应特异性较差,凡戊糖均有此反应,DNA和其他

比色法测定物质含量的原理

原理:由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱与测得的光谱作比较进行定性分析。再根据Lambert-Beer定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量

比色法测定磷含量的方法

  本法系将有机磷转变为无机磷后进行磷含量测定。磷酸根在酸性溶液中与钼酸铵生成磷钼酸铵,遇还原剂即生成蓝色物质(三氧化钼和五氧化钼的混合物),称之为“钼蓝”,用比色法测定供试品中磷含量。  测定法  精密量取供试品适量(含磷4~20μg)置试管中,加4滴硫酸(约0.08ml)加热至炭化,再加2滴高氯

砷钼酸比色法测定还原糖含量

一、目的 植物体内的还原糖主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的分布,不仅反映植物体内碳水化合物的运转情况,而且也是合成其它成分碳架来源和呼吸作用的基质。此外,水果、蔬菜中含糖量的多少,也是鉴定其品质的重要指标。其它碳水化合物,如淀粉、蔗糖等,经水解也生成还原糖。因此,测定还原

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应,在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法...1

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA 与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液

比色法测定柿叶中总黄酮的含量

利用黄酮类化合物可与金属离子形成有色螯合物的原理,建立柿叶中总黄酮含量测定方法,并且对供试品制备方法进行选择。通过正交试验设计选取供试品制备条件,采用分光光度法,KAc-AlCl3体系与供试品中黄酮提取物反应,选择最大吸收波长,以芦丁为对照品制作标准曲线,并做方法学考察。供试品制备:提取液70%乙醇

重铬酸钾比色法测定乙醇含量的方法介绍

.重铬酸钾比色法重铬酸钾能将乙醇氧化为乙酸,同时6价铬被还原为3价铬,可用比色法进行测定。化学反应式如下:标准系列管配制:在10mL比色管中加入各溶液,如下表所示:编号012345体积分数0.1%的标准乙醇溶液(mL)012345水(mL)543210各管中加1 mL 2%重铬酸钾溶液,5 mL浓硫

比色法测定供试品中间甲酚含量

  本法系依据4-氨基安替比林、铁氰化钾在碱性条件下与间甲酚反应生成一种红色物质,用比色法测定供试品中间甲酚含量。  测定法  精密量取一定体积的供试品,置试管中,定量稀释50倍,即为供试品溶液。量取供试品溶液1.0ml,加水5.0ml,混匀,依次加pH 9.8缓冲液(称取无水碳酸钠6.36g、碳酸

茚三酮显色法测定壳聚糖含量介绍

  壳聚糖是甲壳素的脱乙酰基衍生物,是一种分子量较大的碱性多糖。由于分子间和分子内强烈的氢键作用,壳聚糖在水及大多数溶剂中的溶解性较差,可溶于醋酸等无机酸的稀溶液中。壳聚糖及其衍生物具有较强的生物活性,具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂和增强免疫力等功能。壳聚糖还具有良好的生物降解性和生物相容性,被

茚三酮显色法测定壳聚糖含量介绍

壳聚糖是甲壳素的脱乙酰基衍生物,是一种分子量较大的碱性多糖。由于分子间和分子内强烈的氢键作用,壳聚糖在水及大多数溶剂中的溶解性较差,可溶于醋酸等无机酸的稀溶液中。壳聚糖及其衍生物具有较强的生物活性,具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂和增强免疫力等功能。壳聚糖还具有良好的生物降解性和生物相容性,被广泛

如何用紫外吸收法测定DNA含量

首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。

碘兰比色法测定精米中淀粉含量的步骤

  测定精米直链淀粉含量有多种方法,经我们的多年实践,认为简易碘兰比色法具有简便、快速、准确性较高的优点。  一、原理  碘与直链淀粉和支链淀粉所形成的碘复合物具有不同的吸光特性。在pH为理。5一理。了的条件下,碘一直链淀粉复合物吸收600毫微米附近的红橙光。反射490毫微米附近的兰绿光。在光电比色

地衣酚显色法测定RNA含量实验原理和操作步骤

【实验原理】 RNA与浓盐酸共热时发生降解,产生的戊糖又可转变为糠醛,在FeCl3或CuCl2催化下,糠醛与地衣酚(3,5—二羟基甲苯)反应形成绿色复合物,该产物在670nm处有最大吸收。当RNA浓度为20μg/m1~250μg/m1时,吸光度与 RNA浓度成正比。 【实验材料】

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定1

原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白质仍处于溶解状态。(3)以去污剂如十二烷基硫

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:   学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:   DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理 实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。 实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚

DNA的Feulgen染色法

1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有

比色法测定COD

比色法测定COD您也可以通过COD水质检测仪查看样品吸光度的变化来了解重铬酸盐的消耗量。由于三价铬(Cr 3+)和六价铬(Cr 6+)的颜色样品吸收特定波长。通过在光度计或分光光度计中测量样品在600nm波长处的吸光度,可以量化消化后样品中三价铬的量。或者,可以使用420nm六价铬的吸光度来确定消化

关于氯硫二苯胺的简介

  氯硫二苯胺是一种化学物质,别名为氯普马嗪、冬眠灵、可乐静、可平静、氯丙嗪。  一、氯硫二苯胺的分类:神经系统药物 > 抗精神、抗抑郁、抗焦虑症药物 > 吩噻嗪类药  二、氯硫二苯胺的剂型:  1.12.5mg,25mg,50mg;  2.注射剂(粉):10mg,25mg,50mg;  3.复方制

比色法测定食品中的二氧化硫

比色法国标 GB/T5009.34-2003 中规定用盐酸副玫瑰苯胺法检测食品中二氧化硫含量,其主要原理是利用亚硫酸盐与四氯汞的反应生成稳定的络合物, 再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物,在波长550 nm处测定溶液吸光度,与标准系列比较定量。滴定法作为测定食品中微量二氧化硫的主要方法,具

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗3

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓S