DAPI染DNA的原理及使用方法

DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式为C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ,分子量457.48。DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。另外,因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。单独DAPI的最大吸收波长为340nm,最大发射波长为488nm;当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为364nm,最大发射波长为454nm(10 mM Tris pH7.0,100 mM NaCl,10 mM EDTA),其发散光的波长范围含盖了......阅读全文

痘苗DNA检测实验

实验方法原理 实验材料 贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒 PBS胰酶/EDTA干冰/乙醇DNA 提取缓冲液乙酸钠乙醇PCR 扩增缓冲液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培养基完全 MEM-10/BrdU 培养基筛选试剂4

ELECTROPHORESIS-OF-DNA-IN-POLYACRYLAMIDE-GELS

ELECTROPHORESIS OF DNA IN POLYACRYLAMIDE GELSGel SizesSmall:             165 x 130 mmMedium:         165 x 200 mmLarge:            165 x 260 mm5% Anal

λ噬菌体DNA提取

   λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径,其一是裂解生长,环状DNA分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体D

无用DNA的概念

中文名称无用DNA英文名称junk DNA定  义基因组中不表达的因而功能不明的DNA。但已有证据表明这些无用DNA是有其各种不同功能的。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA杂交的基础

  具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,通过超声或者其他物理方法,将DNA剪切成片段,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链

闭环DNA的结构

由于具有螺旋结构的双链各自闭合,结果使整个DNA分子进一步旋曲而形成三级结构。自然界中主要是负超螺旋.另外如果一条或二条链的不同部位上产生一个断口,就会成为无旋曲的开环DNA分子。从细胞中提取出来的质粒或病毒DNA都含有闭环和开环这二种分子。可根据两者与色素结合能力的不同,而将两者分离开来。

胸腺DNA的制备

实验概要本实验介绍了浓盐法小牛胸腺DNA制备的原理及操作步骤。实验原理DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物(DNP)后,必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺,鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA,可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖核蛋

线粒体DNA的特性

线粒体DNA是线粒体中的遗传物质,线粒体能为细胞产生能量(ATP),是在细胞线粒体内发现的脱氧核糖核酸特殊形态。线粒体是为细胞提供能量(ATP)的细胞器。一个线粒体中一般有多个DNA分子。

重组-DNA-技术介绍

中文名称重组 DNA 技术英文名称recombinant DNA technique定  义在体外将两个或多个不同的DNA片段全部或部分构建成一个DNA分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

真菌DNA的提取

  1.实验试剂  (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS  (2)3M NaAc  (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA  (4)酚(pH8.0):氯仿:异戊醇(25:

结合DNA的酶

核酸酶和连接酶:核酸酶是能够切割DNA链的酶,因为它们催化磷酸二酯键的水解。从位于DNA链末端的核苷酸开始水解DNA的核酸酶称为核酸外切酶。另一方面,直接切入DNA链的那些是内切核酸酶。分子生物学中使用最广泛的核酸酶,称为限制性内切酶,以切割特定序列的DNA。在自然界中,这种酶通过在进入细菌细胞时消

什么是变性DNA?

中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定  义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA修饰的概念

中文名称DNA修饰英文名称DNA modification定  义DNA合成后,通过一系列化学加工使其结构发生某些改变。如DNA的甲基化等。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA-labeling-by-nick-translation

DNA labeling by nick translationreagents: DNA for labeling (concentration c > 150 ng/µl) modified nucleotides: Biotin-16-dUTP, Digoxigenin-11-dUTP, co

Preparation-of-Sonicated-Human-DNA

Purpose:To break up high molecular weight human placental DNA into fragment sizes of 500 bp or less which can be used as competitor DNA in Southern an

荧光测DNA浓度

Steve HahnLast updated 9/30/98This Dye measures DNA concentration using a fluorescent dye which binds only double stranded DNA. The fluorescence of th

DNA杂交的意义

  分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人

卫星DNA的分类

卫星DNA按其浮力密度的大小可以分成I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四类,其浮力密度分别是1.687,1.693,1.697和1.700g/cm3。各类卫星DNA都是由各种不同的重复序列家族所组成。卫星DNA通常是串联重复序列。卫星DNA按其重复单元的核苷酸的多少,可以分为两类。一类是小卫星DNA(minisatel

Plasmid-or-Cosmid-DNA-Miniprep

This protocol can be used to isolate sufficient amount DNA from 1.5ml o/n culture or 3ml 6hr culture to do several enzyme digestions.Spin 1.5ml o/n cu

Organelle-DNA-Library-Construction

Organelle DNA Library Construction(version MAY-1998)I. NEBULIZATION of DNA      1. 0.5 - 5 ug DNA in TE (10mM/1mM), 25% glycerol, final volume 500 ul

DNA复制主要阶段

DNA复制主要包括引发、延伸、终止三个阶段  。

DNA的提取实验

实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水,从而溶解一部分poly-(A)RNA。将酚与氯仿联合使用

大型海豚DNA研究

弗林德斯大学的综合研究呼吁更多的保护和政策努力来保存适应性DNA多样性,并协助这些海豚群体之间的连接。这将支持长期的基因流动和适应不断变化的栖息地——包括受气候变化和人类企业影响的海洋条件。弗林德斯大学的研究人员安Andrea Barceló——该研究的第一作者,刚刚发表在BMC Ecology a

DNA定点突变实验

实验方法原理 定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。单点突变的原理是从常规E.coli中经纯化试剂盒(Miniprep)或者氯化铯纯化抽提得到质粒。设计一对包含突变位点的

变性DNA的定义

中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定  义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

植物DNA提取实验

实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一

DNA合成仪简介

  设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,最广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。

DNA提取方法介绍

DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。

互补-DNA的定义

中文名称互补 DNA英文名称complementary DNA;cDNA定  义利用反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞化学(二级学科)

卫星DNA的概念

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在