植物组织中几种酶的组化定位鉴定
原理 在植物生理学的研究中,可利用组织化学的方法,来说明植物体内的生理活动问题。例如,当需要检定某种物质性质和在植物体内分布时,用组织化学的方法,可以达到定位和定性的目的,而且有时比用剥离的官或组织,作生化测定更能说明问题。植物组织中酶的组化鉴定的基本原理,是以某物质为底物在专一酶作用下,产生一种有颜色的化合物来表明有某种酶的存在。 过氧化物酶:在过氧化氢存在下,联苯胺经酶作用脱氢而生成蓝色的络合物,反应式如下:多酚氧化酶:邻苯二酚或邻苯三酚在多酚氧化酶的作用下,产生茶褐色化合物或棕色络合物,反应式如下: 三磷酸腺苷酶:三磷酸腺苷(ATP)经酶作用分解为二磷酸腺苷(ADP),并释放出无机磷酸,与铅离子结合产生磷酸铅,遇硫则生成硫化铅黑色沉淀,可用下列简式表示: 脱氢酶:在脱氢酶作用下,氯化三苯基四氮唑(TTC)被还原为三苯基甲(TTF),溶液从无色变成红色,反应式如下: 本实验学......阅读全文
鉴定植物细胞的死活
【实验目的】学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活 【实验原理】活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是通透性的变化最为明显。活细胞的原生质具有选择透过性;而死细胞则为全透性。选择透过性是质壁分离的先决条件。因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的细胞则说明是死的。 死活细胞
基因工程中主要的工具酶有哪几种
基因工程工具酶主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类,具体解释如下:1、DNA限制性内切酶生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息;2
脂质组-LC/MS自动化鉴定及相对定量(二)
第 1 步 数据分析模块 — 峰提取 • 原始数据文件读取• 智能峰提取 整合于 LipidSearch 软件中的峰提取引擎能够处理不同 MS 实验和仪器平台采集的数据。综合独特的峰提取算法、区分不同实验和仪器类型、整合先进的谱图处理功能,最终确保精确的谱峰提取。 第 2 步 鉴定模块 — 脂质鉴定
脂质组-LC/MS自动化鉴定及相对定量(三)
搜索和对齐结果的 LipidSearch 状态窗口视图 第 2 步鉴定 总结出每份 MS2 谱图中的检索结果,同时给出与数据库中预测的碎裂模式相匹配的得分。若找到的是多种脂类的混合物,则展示丰度最高的脂质结果。当结果被选中时,用于参与鉴定的碎片离子峰会被以红色强调显示。 ID of PE 16:
脂质组-LC/MS自动化鉴定及相对定量(一)
脂质组学的前景 脂质组学作为一门新兴的研究学科,其成果对于科学家深入理解细胞生理和病理过程十分重要。脂质轮廓分析在疾病表型研究中的应用正成为转化医学中蓬勃发展的一个方向。通过特异性脂质生物标记物的鉴定,我们有希望区分健康人群与患病风险人群,进行疾病早期诊断、并推动个性化医疗的建立。 液质联用(LC/
构建癌症基因组学的非组织特异标签的药物重定位新方法
10月9日,国际学术期刊《细胞通讯》(Cell Reports)在线发表了中国科学院上海生命科学研究院(营养与健康研究院)计算生物学研究所韩敬东研究组的论文“Accurate Drug Reposition through Non-Tissue Specific Core Signatures
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连接APAAP复合物,再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断
利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验
实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂NaCl氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen),4°C预冷NaCl,5mol/L(无RNA酶)氯仿异丙醇乙醇,75%,用DEPC处理过的水
利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验
以下概述的是 ConcertPlant 试剂(Invitrogen) 所附带的方案。该方案不是以酚为基础的,但需要加氯仿。该试剂用于多种植物的组织中分离 RNA, 包括蓝叶云杉针、马铃薯块茎、玉米种子和棉花叶。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒
原位杂交中植物组织要用faa固定多久
石蜡切片法——固定与包埋 一、实验目的 掌握石蜡切片法中固定、透明与包埋的基本操作步骤及要点。 二、实验材料 党参、秦艽或其它药材的根 三、实验用具及试剂 福尔马林-酒精-醋酸混合固定液(简称FAA)、各级酒精溶液
免疫组化方法免疫酶标方法简介
免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。该方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准
免疫组化实验中DAB显色的原理
DAB是过氧化物酶重要的显色底物之一,能被催化生成水不溶性的棕黄色产物,能直观地观察到,适用于各种斑点检测和免疫组化中的染色步骤。建议可以直接选用absin品牌的DAB试剂盒,试剂盒里的选色液都是配置好直接用的,可以根据实验需要选择不同的颜色
植物组织的培养方法
1、非试管微组织快繁 非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。 2、试管组织培养 试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培
植物组织的观察实验
[目的要求] 1.掌握植物细胞有丝分裂和减数分裂各时期的特征。 2.掌握植物分生组织和各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。 3.学习简单地离析组织的方法。 [材料用品] 材料:蚕豆叶、烟草叶、玉米叶、小麦叶、水稻叶、椴树茎横切片
植物组织水势的测定
植物水势的测定先用折射仪法再用小液流法。折射仪测定法会因为植物的细胞壁而产生一定的误差,只能得到一个不准确的值。根据这个值,就可以缩小蔗糖浓度梯度的阈值范围,从而更快速准确的测得水势。《植物生理学实验》分7个部分,有28个实验,涉及植物生理学相关实验的基本原理、基础知识、基本实验技能和拓展应用,内容
植物组织水势的测定
植物水势的测定先用折射仪法再用小液流法。折射仪测定法会因为植物的细胞壁而产生一定的误差,只能得到一个不准确的值。根据这个值,就可以缩小蔗糖浓度梯度的阈值范围,从而更快速准确的测得水势。《植物生理学实验》分7个部分,有28个实验,涉及植物生理学相关实验的基本原理、基础知识、基本实验技能和拓展应用,内容
特殊组织DNA的提取及鉴定
1、提取DNA的简易方法:1)、从全血中提取DNA:取20μl抗凝血于0.5ml无菌管中,加500μl左右的ddH2O混匀后,12000rpm离心2分钟,弃上清,(若沉淀中仍 有红细胞,需重复此操作1-2次)加入样品提取液20μl,混匀,100℃煮10分钟(可在扩增仪上进行)后12000rpm离心5
蕨类植物鉴定实验
实验方法原理 实验材料 石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏抱子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材 显微镜解剖镜放大镜镊子解剖针载玻片盖玻片培养皿滴瓶实验步骤 (一)石松亚
植物抗旱性鉴定
水分亏缺是一种最普遍的影响植物生产力的环境胁迫,尽管蔬菜作物一般都在水源充足的地区栽培,但是通常蔬菜需水量大,而且几乎整个生育期对水分的要求都比较多;而果树大多栽培于丘陵、土地,更易受到水分亏缺的影响。因此深入研究植物的抗旱性,进行抗旱育种显得特别重要。抗旱育种的成败在很大程度上取决于拥有抗性资源的
植物抗寒性鉴定
我国植物种类繁多,分布区域广,在晚秋和早春时期发生的冻害和冷害两种低温危害,常常给越冬作物和果木造成严重伤害。冻害由0℃以下低温造成,冷害由0℃以上低温引起,冷害对植物的伤害程度,除取决于低温外,还取决于低温维持时间的长短。植物抗寒性的强弱决定其生长季节,因此蔬菜作物利用抗寒品种,可以将露地栽培提前
蕨类植物鉴定实验
实验材料:石松标本 卷柏(或中华卷柏)腊叶标本
植物吸收水分的方式有几种?
植物吸收水分的方式有两种:吸胀作用(未形成液泡)和渗透作用(形成液泡后)。
蛋白组与代谢组在猪肉品质鉴定中的话语权
对食物是否鲜香判断的重要依据是其口感,决定口感好坏的因素有新鲜度、烹调方式、食物本身所含的风味物质等,但起决定性作用的应该是风味物质。风味物质在生物学上叫内源性代谢物。肌肉组织是肉的主要成分,利用蛋白组学技术对屠宰后猪的肌肉进行研究后发现与猪肉品质特征相关的重要蛋白标志物:与系水力和色泽相关的蛋白主
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7];马铃薯块
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内;马铃薯块茎中几乎所
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7];马铃薯块茎中
植物组织中自由水和束缚水含量的测定
植物 组织中的水分以自由水和束缚水两种不同的状态存在。自由水与束缚水含量的高低与植物的生长及抗性有密切关系。自由水/束缚水比值高时,植物组织或器官的代谢活动旺盛,生长也较快,抗逆性较弱;反之,则生长较缓慢,但抗性较强。因此,自由水和束缚水的相对含量可以作为植物组织代谢活动及抗逆性强弱的重要指标。
植物组织中自由水与束缚水含量的测定
自由水和束缚水含量常与植物 生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官,代谢活动较旺盛,生长也较快;反之则生长较缓慢,但抗性较强。因此,自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。 【原理】 束缚水被细胞胶体颗粒所吸附,水势较低,故不易移动
植物组织中自由水与束缚水含量的测定
自由水和束缚水含量常与植物生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官,代谢活动较旺盛,生长也较快;反之则生长较缓慢,但抗性较强。因此,自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。 一、 原理 束缚水被细胞胶体颗粒所吸附,水势较低,故不易移动、蒸发和结
植物组织中过氧化氢含量的测定
实验概要植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性