华东理工杨弋教授发文：这种合成方法实现活细胞RNA成像
2019年11月5日，华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology（《自然—生物技术》）杂志上发表了封面学术论文，题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”。该论文报道他们利用系列高性能荧光RNA，实现不同种类RNA在动物细胞内活体的荧光标记与无背景成像。 迄今为止，在自然界尚未发现天然存在的荧光RNA。目前人工合成的少数几种荧光RNA荧光强度弱，性能不稳定，难以实用。针对这一亟需解决的技术挑战，杨弋教授等组建了化学生物学与合成生物学联合攻关团队，利用全新的分子设计及分子共同定向进化技术，首次获得了系列高亮、稳定、低背景的荧光RNA。这些荧光RNA分子结构紧凑，特异结合创新染料分子后产生强烈荧光，可呈现蓝、绿、黄、橙、红等不同颜色，与五颜六色的辣椒相似，因......阅读全文
荧光原位杂交技术的背景
对于利用rRNA的荧光原位杂交来说,如下原因可导致较低的荧光信号强度： 较低的细胞核糖体含量 较低的细胞周边的通透性 较低的目标序列可接触性（由于rRNA的折叠产生的构象,有些位置与rRNA分子内其他链或其他rRNA或蛋白紧密接触,从而使探针无法和目标序列杂交） 为检验细胞中的目标序列是
荧光成像与高光成像区别
荧光成像与高光成像区别如下：1、原理：荧光成像是利用荧光标记的分子在激发后发出特定波长的光来成像，而高光成像是基于样本的反射或透射光强度的差异来成像。2、样本处理：荧光成像需要在样本中引入荧光标记物，通常是通过染色或基因工程技术来实现，而高光成像则不需要对样本进行特殊处理，直接观察样本的自然反射或透
RNA荧光原位杂交
原位杂交：在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，能过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点，应带有标记的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA
荧光标记物质的波长
荧光标记物质的波长做荧光标记用得着。已搜索，无重复。前一个数字是激发波长，后一个是发射波长Fluorochrome--Excitation Wavelength--Emission WavelengthAcid Fuchsin 540 630Acridine Orange(Bound to DNA)
什么是荧光标记法
荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。目前用于神经元标定的荧光物质有十多种。可以根据实验的要求进行单荧光物、双标
共聚焦荧光探针标记方法
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、M
荧光标记肽技术常用的多肽修饰荧光物质
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简
美开发出无需荧光标记的新型DNA和RNA检测方法
据物理学家组织网近日报道，美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料，开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法，有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。科学家称，他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症，还能探测出在组织中存在
华东理工杨弋教授发文：这种合成方法实现活细胞RNA成像
2019年11月5日，华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology（《自然—生物技术》）杂志上发表了封面学术论文，题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
植物多光谱荧光成像系统多激发光、多光谱荧光成像技术
多激发光、多光谱荧光成像技术：通过光学滤波器技术，仅使特定波长的光（激发光）到达样品以激发荧光，同时仅使特定波长的激发荧光到达检测器。不同的荧光发色团（如叶绿素或GFP绿色荧光蛋白等）对不同波长的激发光“敏感”并吸收后激发出不同波长的荧光，根据此原理可以选配2个或2个以上的激发光源、滤波轮及相应
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（三）
细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide，即形成SiR-tubulin和SiR-actin，实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（二）
图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。（a）示意图，用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。（b）COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记（绿色），溶酶体用lysosometracker（红色）标记。（c）对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（一）
如何免除活细胞标记中的清洗（washout）步骤？SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化，也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞，才能将未结合的BG去除从而消
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（五）
SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中，显微成像技术得到了飞跃的发展，填补光学显微镜（~200 nm）到电子显微镜（~0.1 nm）分辨率缺口，打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中，德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（四）
荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达，然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集
原子荧光无信号问题
一．原子荧光无信号问题1. 进液不完全，未正常反应。（仅限手动进样方式）观察进样方式是否正确，进样量是否满足定量环要求。2. 标液失效可以配置无机形态的单标，从载流针位置进标液试下是否有信号，如果信号正常，在从六通进样阀位置进样看看。如果没有信号，检查流动相配置是否正确，柱压是否正常
Lightgate在荧光成像中去除叶绿体自发荧光的影响
Lightgate在荧光成像中去除叶绿体自发荧光的影响为了检测Lightgate在荧光成像中去除叶绿体自发荧光的影响，Kodama Y.使用配备白激光和HyD检测器的Leica TCS SP8 X对M. polymorpha植株中的荧光标记进行了对比鉴定。Lightgate能很好地去除叶绿素在黄色和
研究发展RNA“缓冲荧光探针”
近日，中国科学院大连化学物理研究所副研究员乔庆龙和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合，在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲荧光探针”Nu-AN，实现了对核仁动态轮廓的成像，并通过活细胞内药物诱导下核仁特定形态的可视化，为核仁应激试剂的筛选提供可视化的工具。相关成果发表在《先进科学》。
研究发展RNA“缓冲荧光探针”
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519783.shtm
生物荧光标记法是什么
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简
生物荧光标记法是什么
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简
免疫荧光标记的应用
半个多世纪以来，经过许多学者不断改进和发展，使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用，使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。
生物荧光标记法是什么
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简
多肽FRET荧光标记技术
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染，操作简
免疫荧光标记技术
．原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法：将标记
荧光素FITC标记抗体的方法
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般zui多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FI
荧光和化学发光标记
连接于二抗的标记物是为了检测抗体的结合，选择标记物依赖于几个参数：检测方法：荧光或着色沉淀，荧光标记物用特殊波长的光激发时发射出可见光封片介质（仅免疫组化）：AEC, Fast Red, INT 或其它水性发光基团是可以醇溶的并要求水性封片. 除上述之外的发光基团是有机的所以最好使用有机性封片介质。
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
荧光标记mRNA差异显示技术
mRNA差异显示技术（differential display，DD）是用于研究基因的差异表达的新方法。该技术自1992年被首次报道后，即以其不可替代的优势被广泛应用于生物医学领域。在应用过程中不断得到改进，并产生了诸多衍生技术如RPA（RNA finger printing by arbitrar
活体GFP绿色荧光成像系统
系统提供动物活体绿色荧光蛋白的实时观察与成像等一系列的荧光检测。能够应用在像深度肿瘤，大动物等活体肿瘤追踪观察成像研究。 该设备是一个高灵敏度的图像成像工作系统，主要利用特定波长的激光进行激发后，通过高灵敏度的致冷CCD进行实时检测后，获得所需的各类 特性的图像，有利于进一步的分析作用 。