活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)
如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消除背景荧光对成像的影响。即不能实时在底物与SNAP-tag结合的过程中,跟踪SNAP-tag融合蛋白的动态变化。YasuteruU等科学家基于SNAP-tag研发了一种荧光偶联性激活标记方法(fluorescenceactivation-coupled protein labeling, FAPL),通过改造SNAP-tag的底物来解决这一问题,从而能够实时的记录细胞内一些动态的生命过程,如蛋白表达、定位、转运及降解等过程[13-15]。在Snap-tag底物BG鸟嘌呤的C-8位置引入一个淬灭基团,可以有效的通过荧光共振能量转......阅读全文
全自动活细胞实时荧光成像系统概述
全自动活细胞实时荧光成像系统是一种用于生物学领域的分析仪器,于2018年12月11日启用。 1、显微镜采用全封闭箱式设计,并可通过机身TFT触摸屏进行自动进样,调用预设实验程序自动进行成像实验。 2、全自动成像方式,无需任何手动调节即可实现普通明场、斜照明和高衬度浮雕效果PGC成像,并可在荧
快速活细胞成像系统
快速活细胞成像系统是一种用于材料科学领域的大气探测仪器,于2019年7月13日启用。 技术指标 有效像素数量512×512,单位像素面积16μm×16μm,最大读出速率70-1000 fps,光电转换量子效率90%(峰值),模/数转换器16 bit(全频率),冷却温度-65℃至-100℃;固
活细胞成像技术活细胞工作站介绍
我们知道以往的固定组织揭示了非常多的自然秘密,给了我们很大的启示,现在的科学研究则向在最真实的条件下观察自然发展。纵观显微镜的历史,直到15年前,科学家主要还是处理死细胞。现在,活细胞的应用已经非常普及了。 加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M.Brown表示,要达到这个研究目的,我
活细胞成像显微镜
活细胞成像显微镜是一种用于生物学领域的分析仪器,于2012年3月15日启用。 技术指标 固态光源SSI(含7条激发谱线),高精度电动载物台(X、Y:20nm,Z:5nm),CalSnapHQ2 CCD.EMCCD.湿控及CO2系统装置,自动对焦装置(焦距时间100ms,精度25nm)。10×
活细胞成像工作站
活细胞成像工作站是一种用于生物学领域的分析仪器,于2015年5月13日启用。 技术指标 1.三维液压微调控制系统:X-,Y-,Z-轴,移动范围最大10mm;操纵杆移动(X-,Y-轴):最大2mm;控制手移动:250um;规格:驱动单元、控制单元、万向节、磁性金属板等。2.显微操纵器粗调系统:
活细胞成像实验总结,必看!
近年来,活细胞成像活跃于生物学的各个领域。在它的加持下,研究者们可以实时或者在一段时间内观察细胞内部结构和细胞生理过程,从而加深对细胞运作过程的认识。但在各种实验操作和成像条件下,想要成功做好活细胞成像实验并不容易。1、实验前我们先了解一下,什么是活细胞成像,它有哪些作用?通常,我们把使用延时成像技
研究人员合成高性能荧光RNA实现活细胞RNA成像
2019年11月5日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技术》)杂志上发表了封面学术论文,题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
全自动活细胞实时荧光成像系统的主要功能
实验课题需要解决大量样本在活细胞状态下进行观察和成像的问题,并对细胞的图像进行深度分析,并对细胞现象进行背后的分子机理的解读和阐释。活细胞系统需要长时间观察下,光毒性要求最小,自动化程度高,同时具有一定的软件学习能力。
什么是活细胞荧光
没有听说过这个术语,不过应该很好猜测,就是用荧光技术标记活细胞,可以是只有活细胞才能吸收的荧光物质,该物质被活细胞吸收后,该活细胞就发出荧光可用于观测了。而死细胞不吸收就观测不到荧光,可以区分细胞死活。
活细胞RNA成像技术获突破
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509263.shtm
浅谈DeltaVision-Elite活细胞成像系统
我们知道以往的固定组织或固定细胞成像揭示了非常多的自然秘密,给了我们很大的启示,但现在的科学研究则希望在最真实的条件下观察细胞。纵观显微镜的发展历史,直到15年前,科学家主要还是处理死细胞。现在,活细胞研究的重要性已经越来越被意识到。加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M. B
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)
细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)
如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消
研究实现活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像
近期,中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所智能微纳器件研究室研究员张忠平和王振洋领导的团队在生物体核酸结构的同步原位影像分析方面取得新进展,合成了一种具有高效生物膜穿透能力的阳离子碳量子点,实现了对活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像。相关研究成果发表在国际化学期刊《德国应用化学》
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(四)
荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达,然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(二)
图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。(a)示意图,用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。(b)COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记(绿色),溶酶体用lysosometracker(红色)标记。(c)对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)
SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射
浙江大学250万采购多通道活细胞单分子荧光成像系统
近日浙江大学发布2022年7月采购意向,预计花费250万元采购多通道活细胞单分子荧光成像系统。多通道活细胞单分子荧光成像系统项目所在采购意向:浙江大学2022年7月政府采购意向采购单位:浙江大学采购项目名称:多通道活细胞单分子荧光成像系统预算金额:250.000000万元(人民币)采购品目:A021
实时动态活细胞成像分析仪
实时动态活细胞成像分析仪是一种用于药学领域的医学科研仪器,于2019年9月25日启用。 技术指标 IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源,有高灵敏度CCD成像系统及高清晰度光学元件,10倍物镜的成像分辨率为1.22µm/像素,像素1392×1040,输出
活细胞成像用哪种显微镜
活细胞成像可以选择共聚焦显微镜,共聚焦与传统显微镜的原理差别在于照明方式不同:传统显微镜是一次性照明整个视野中的样品,因此可以用眼睛直接观察或者用CCD获取图像,没有时间延迟;而共聚焦显微镜是逐点成像,无法用CCD获取图像,只能用探测器收集每个象素点的信号,再通过软件重构图像,有一定的时间延迟。共聚
活细胞成像和数据分析系统
活细胞成像和数据分析系统是一种用于生物学领域的分析仪器,于2018年11月26日启用。 技术指标 光源:IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源。 物镜倍数:IncuCyte Zoom HD/2CLR的物镜倍数是4倍或10倍或20倍,可由用户自行更换。 成
活细胞成像要求在成像过程中的知识
活细胞成像要求在成像过程中始终保持镜台上细胞的存活.应注愈使用zui小强度的激光,因为激光束造成的光损伤在多次扫描时可以录加起来。抗氧化剂(如维生素C)加人培养液可减少来自激发的荧光分子产生的权.因为级可引起自由基形成并杀死细胞。对于一些荧光标记实验.需评价光基礴对标本的影响.一般应进行成像后组织活
PNAS:新型荧光cAMP指示器有助于神经元活细胞成像
环磷酸腺苷(cAMP)是一种胞内信使分子,负责包括神经元在内的许多细胞的功能,促进轴突的生长,维持神经元间的通信。cAMP的分子途径已得到充分研究,已知它在调节突触功能中发挥重要作用;然而,能够精确监测其细胞内活动的指标还有待开发。现在,Naoto Saitoh带领的研究团队通过开发一种新型绿色荧光
突破!研究团队攻克荧光蛋白和染料在活细胞成像中的局限
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员、苗露副研究员团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编
我所发展细胞膜缓冲荧光探针实现活细胞质膜形态动力学的超分辨荧光成像
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了组装介导的细胞膜缓冲荧光探针,实现了对细胞质膜的长时间稳定标记和超分辨动态荧光成像,观察到了质膜丝状伪足的动态运动和细胞外囊泡的分泌过程,发现了两种细胞外囊泡的融合模式,为细胞质膜的超分辨动态成像提供
活细胞间接免疫荧光法
一.实验器材:1. 器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2. 试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1. 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强
显微镜对于活细胞成像有什么作用
使用现在已开发的各种荧光蛋白和多色探针几乎可以标记任何分子。 对囊泡、细胞器、细胞和组织中的蛋白质动力学成像的能力为了解细胞在健康和疾病状态下如何工作提供了新的洞察力。 这些包括有丝分裂、胚胎发育和细胞骨架变化等过程的时空动态。研究活细胞时,常见的障碍包括光毒性和光损伤。 要捕捉快速的生物过程,关键
zenCELL-owl活细胞动态成像及分析系统介绍
研究背景诸多科研院所的医学院、药学院,药企研发部门、CRO企业每天进行大量的药化实验、细胞增殖抑制实验等,筛选匹配细胞株、检测或验证药化效果、各种药化浓度组、细胞实验组、对比组等造成工作量巨大。现有的实验方法多为终点法,包含有LDH乳酸脱氢酶释放、Caspase酶法、代谢活性检测、胞内ATP浓度检测