华东理工杨弋教授发文:这种合成方法实现活细胞RNA成像

2019年11月5日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技术》)杂志上发表了封面学术论文,题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”。该论文报道他们利用系列高性能荧光RNA,实现不同种类RNA在动物细胞内活体的荧光标记与无背景成像。 迄今为止,在自然界尚未发现天然存在的荧光RNA。目前人工合成的少数几种荧光RNA荧光强度弱,性能不稳定,难以实用。针对这一亟需解决的技术挑战,杨弋教授等组建了化学生物学与合成生物学联合攻关团队,利用全新的分子设计及分子共同定向进化技术,首次获得了系列高亮、稳定、低背景的荧光RNA。这些荧光RNA分子结构紧凑,特异结合创新染料分子后产生强烈荧光,可呈现蓝、绿、黄、橙、红等不同颜色,与五颜六色的辣椒相似,因......阅读全文

免疫荧光实验TIRF成像

  Kindlin-2和talin共同作用于桩蛋白激活整合素的表达  整合素是一种跨膜蛋白,在介导细胞黏附到细胞外基质(ECM)过程中发挥重要的作用。整合素在和配位体结合并发挥作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血细胞中介入激活整合素这一过程的原理并不十分清晰。美国的科研人员发现

活体荧光成像系统介绍(二)

五、生产厂家1.美国KODAKImage Station In-Vivo FX多功能活体成像系统1.1简介:该系统采用了Kodak公司科研级的超高灵敏度4百万象素冷CCD,高安全标准的X-光模块,以及ZL的放射性同位素磷屏等技术,实现了化学发光、全波长范围荧光、放射性同位素以及X-光等的多功能检测功

植物荧光成像仪——选型

  光源  可选激光光源和发光二极管光源;激光光源为单波长非连续光,分辨率和灵敏度高;二极管光源相对激光光源结构更紧凑简洁,激发光带宽较宽,能量输出相对较低,可以直接整合到图像扫描设备内,也比较经济,轻便;  荧光信号收集系统  主要包括振镜式的扫描系统和摆头式扫描系统。振镜式的扫描系统通过快速摆动

植物荧光成像仪概述

  移动式植物荧光成像系统是一种用于农学、水利工程领域的分析仪器,于2015年3月24日启用。  单幅成像面积最大的叶绿素荧光成像系统不小于35×35cm,可对整株植物甚至多株植物进行实验成像分析; (2)可在野外自由移动,非损伤原位对植物进行叶绿素荧光成像研究; (3)高灵敏度CCD镜头,时间分辨

STELLARIS的荧光寿命成像应用

上一期介绍了Leica的科学家们利用新一代Power HyD S检测器与二代白激光,挣脱金字塔的束缚。然而,仅在这四个顶点上的不断探索,似乎并不能完全复刻真实。于是科学家们提出了一个新的方向——功能成像。为了实现功能成像,我们在之前的成像基础上引入一个崭新的维度——荧光寿命成像。以往,提到荧光寿命成

显微荧光成像相机选购必备

众所周知,显微荧光成像是一种相对特殊的成像研究,如果说一般的显微成像拍摄还可以用普通的相机,那荧光成像确是一定要用专业的冷CCD相机才可以的。鉴于荧光成像光源一般较弱,要想的到良好的显微图片,还真不是一件容易的事。对于需要用到显微荧光成像的用户,建议是一定要买一款制冷的CCD相机,相对于不制冷的CC

化学发光荧光成像系统

  化学发光荧光成像系统是一种用于生物学、基础医学、临床医学、药学领域的分析仪器,于2017年6月27日启用。  技术指标  1.检测模式:荧光成像、数字化和化学发光成像; 2.激光波长:LD488、SHG532、LD635; 3.成像面积:40×46cm; 4.像素:10、25、50、100、20

活体荧光成像系统介绍(一)

一、  技术简介活体生物荧光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项分子、基因表达的分析检测系统。它由敏感的CCD及其分析软件和作为报告子的荧光素酶(luciferase)以及荧光素(luciferin)组成。利用灵敏的检测方法,让研究人员

我国科学家在RNA成像工具研发方面取得突破性进展

  在生物大分子中,核糖核酸(RNA)具有重要的生物学功能,也与人类重大疾病的发生和发展密切相关。人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质,实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。与蛋白质相比,大部分种类的RNA结构和功能尚未被鉴定,被称为基因组中的“暗物质”。科学家们一直试图发展人工合成的荧光RNA,

活体成像中荧光染料的选择与成像

Cy5.5(Ex/Em:678/701 nm)和Cy7(Ex/Em:749/776 nm)是对分子标记的最优选择之一;DiD(Ex/Em:644/663 nm)、DiR(Ex/Em:748/780)染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。  一、Cy5.5 、Cy7 Cy5.5 、Cy7避开了可见

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...2

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗体的方法 2P3(2)Chadwick氏法 试剂和材料:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸盐缓冲盐水、1%硫柳汞、离心机及离心管、三角烧瓶(25 ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500 ml

概述荧光标记物种类及荧光免疫层析技术应用

  荧光免疫层析分析方法具有灵敏度高、稳定性好、受自然荧光干扰低等优点,成为食品质量安全快速检测分析研究的热点。用于荧光免疫分析的标记物主要包括荧光素、量子点、上转换纳米粒子等。

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...1

制备荧光抗体是免疫荧光组织化学的重要技术之一,制备特异性强和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高效价的抗体。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光,停止能量供给,发光也瞬时停止。可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光素。目前主要常用于标记抗体的荧光素如下: 1、异硫氰酸

非荧光标记的遗传标记分析技术

近年来,美国GENTEON公司采用激光致导的动态荧光检测技术(Dynamic fluorescence),结合多通道毛细管电泳技术,研制出Capella 400型全自动基因分析系统。该仪器采用动态荧光检测技术,彻底消除了传统荧光DNA标记检测的高成本和复杂性,可精确有效到检测未经标记的单链或双链核苷

中国学者发文探讨荧光RNA技术应用前景

近日,华东理工大学教授杨弋、陈显军团队在《细胞生物学趋势》上发表观点文章,系统总结了荧光RNA在活细胞RNA动态可视化研究中的最新进展、面临挑战及未来发展方向。荧光RNA是一类由RNA适配体与荧光染料组成的成像工具,能够在无需依赖蛋白质标记的情况下,实现活细胞中RNA动态的高时空分辨成像。近年来,随

RNA标记

RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求: 1.  操作简单,灵敏度高 2.  不影响碱基配对的特异性 3.  不影响RN

RNA标记

RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes  32P-pCp 3' End-labeling

如何在拉曼光谱中抑制荧光背景

改变激发光波长,选择一个荧光效应最小的

TUNEL检测出现荧光背景很高的原因

a. 支原体污染。请使用支原体染色检测试剂盒检测是否为支原体污染。b. 高速分裂和增殖的细胞,有时也会出现细胞核中的DNA断裂。c. TUNEL反应过强。可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。稀释后的TdT酶需当日使用。d. 红细胞中血红蛋白导致的自发荧光产生严重干

如何在拉曼光谱中抑制荧光背景

1、表面增强技术,现在又表面增强的芯片或者溶液,这个不能算抑制,只是提高信号的强度2、主要是选用荧光效应小的激光器,比如1056nm的。

机制“协同”提高荧光蛋白和荧光染料细胞成像性能

近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员徐兆超、副研究员苗露团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移,提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编码荧光,解决了荧光染料因非特异性标记而产生背景荧光信号的问题,协同提高了荧光蛋白和染料在活细胞成像中对靶蛋白标记和成像

研究实现活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像

  近期,中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所智能微纳器件研究室研究员张忠平和王振洋领导的团队在生物体核酸结构的同步原位影像分析方面取得新进展,合成了一种具有高效生物膜穿透能力的阳离子碳量子点,实现了对活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像。相关研究成果发表在国际化学期刊《德国应用化学》

RNA“缓冲荧光探针”用于细胞核核仁成像和核仁应激试剂筛选

近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合,在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲荧光探针”Nu-AN,实现了对核仁动态轮廓的成像,并通过活细胞内药物诱导下核仁特定形态的可视化,为核仁应激试剂的筛选提供可视化的工具。

细胞RNA实时成像或将“成为可能”?!

  结合并激活荧光染料的适体荧光 RNA(FR)已用于对丰富的细胞 RNA 种类进行成像。然而,诸如低亮度和具有不同光谱特性的染料 / 适体组合的有限可用性的局限性,限制了这些工具在活的哺乳动物细胞和体内的使用。  2019 年 9 月 23 日,华东理工大学朱麟勇及杨弋共同通讯在 Nature B

标记抗体、配体等常用的荧光探针

 标记抗体、配体等常用的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜不仅可用免疫荧光分析固定的细胞或组织切片,还可用于分析活细胞,得到特异性抗体或其他荧光免疫探针识别靶分子的表达、定位、分布变化等信息。标记抗体、配体或蛋白质等较通用的有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

无需荧光标记也能检测基因

美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料,开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法,有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。  科学家称,他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症,还能探测出在组织中存在的病毒,同时可用于法医

无需荧光标记也能检测基因

  据物理学家组织网近日报道,美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料,开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法,有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。   科学家称,他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症,还能探测出

荧光标记杂交信号的检测方法

由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在