0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)

pH 0.2mol/L NaH2 PO4 (ml) 0.2mol/L Na2 HPO4 (ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 ......阅读全文

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截留分子量

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验             试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)

钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验

试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截

免疫细胞化学常用试剂

一、固定剂 1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3) 2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 3、Bouin's液及改良Bouin’s液 4、Zamboni’s(Stefanini‘s)液 5、PLP液 6、Karnovsky's液(pH7.3) 7、0

53种缓冲液配制(一)

乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6

杂交瘤技术基本程序与方法5

下面简要介绍几种常用的抗体检测方法 (1)免疫酶技术 免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性和酶对底物显色反应的高效催化作用有机结合而成的免疫学技术。由于它特异性强,灵敏度高,现已广泛用于筛选和鉴定单抗。 ①器材和试剂 a、包被缓冲液: 碳酸盐缓冲液:取0.2mol/L Na2CO3 8ml,0.2mo

纸层析鉴定转氨基作用实验的关键步骤

  (一)实验目的:1、学习氨基酸纸层析的基本原理.2、掌握氨基酸纸层析的操作原理.(二)实验原理:转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应,在转氨酶的催化下,氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用.转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中,是体内氨基酸代谢的重要途径.氨基酸反应时均由专

甲芬那酸片的检查方法

溶出度照溶出度与释放度测定法(通则093第二法)测定。溶出条件以乙醇40ml,加磷酸盐缓冲液(pH8.0)至800ml为溶出介质,转速为每分钟75转,依法操作,经45分钟时取样。供试品溶液取溶岀液滤过,精密量取续滤液3π,置100ml量瓶中,用磷酸盐缓冲液(pH8.0)稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取

甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

            试剂、试剂盒 10XMOPS 电泳缓冲液 甲醛 甲酰胺 10X 加样缓冲液 溴化乙锭 琼脂糖

5.2.1-甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

试剂、试剂盒10XMOPS 电泳缓冲液甲醛甲酰胺10X 加样缓冲液溴化乙锭琼脂糖DEPC 处理的水仪器、耗材水平电泳装置水浴实验步骤(一)材料与设备1) 水平电泳装置2) 水浴3)10XMOPS 电泳缓冲液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸钠,10 mmol/LEDT

甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

试剂、试剂盒 10XMOPS 电泳缓冲液 甲醛 甲酰胺 10X 加样缓冲液 溴化乙锭 琼脂糖 DEPC 处理的水仪器、耗材 水平电泳装置 水浴实验步骤 (一)材料与设备1) 水平电泳装置2) 水浴3)10XMOPS 电泳缓冲液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸钠,10

配体与活化介质的偶联实验

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液Affi-Gel 10 磷酸钠(50 mmul L)乙醇胺实验步骤 材料磷酸盐缓冲液(50 mmol/L;PH7.5~8,0)Affi-Gel 10(Bio-Rad Laboratories)磷酸钠(50 mmul/L),含 NaCl(1mol/L)(PBS)乙醇胺(100

40mmol/l乙酸铵缓冲液怎么配

乙酸-乙酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml,即得。两者不可能配制成PH=3.2的缓冲溶液,因为PH=PKa-lg(c1/c2) 这里的PH直必须在PH=PKa+±1之间,这里的PKa=4.757,那么两者之间所配制成的缓冲溶液的PH

40mmol/l乙酸铵缓冲液怎么配

乙酸-乙酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml,即得。两者不可能配制成PH=3.2的缓冲溶液,因为PH=PKa-lg(c1/c2) 这里的PH直必须在PH=PKa+±1之间,这里的PKa=4.757,那么两者之间所配制成的缓冲溶液的PH

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直...2

三、器材与试剂: 1.器材: ①夹心式垂直板电泳槽,凝胶模(135×100×1.5mm)(北京六一仪器厂) ②直流稳压电源(电压300—600V,电流50—100mA) ③吸量管(1,5,10 ml) ④烧杯(25,50,100 ml) ⑤ 细长头的滴管 ⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器(1

红霉素眼膏的含量测定方法

取本品适量,精密称定(约相当于红霉素l0mg),置分液漏斗中,加石油醚20ml,缓缓振摇,使基质溶解,用磷酸盐缓冲液(pH7.8~8.0)提取4次,每次约25ml,合并提取液,置100m量瓶中,用磷酸盐缓冲液(pH7.8~8.0)稀释至刻度,摇匀,照红霉素项下的方法测定,即得

羧甲司坦口服溶液介绍

性状本品为棕黄色至浅棕色的黏稠液体;气香。鉴别(1)取本品约1ml,加水5ml,加茚三酮试液数滴,加热,溶液即显紫色(2)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,用0.2mol/L盐酸溶液稀释成每1ml中含羧甲司坦1mg的溶液。对照品溶液取羧甲司坦对照品10mg,加0.2mol/L盐

羧甲司坦口服溶液

性状本品为棕黄色至浅棕色的黏稠液体;气香。鉴别(1)取本品约1ml,加水5ml,加茚三酮试液数滴,加热,溶液即显紫色(2)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,用0.2mol/L盐酸溶液稀释成每1ml中含羧甲司坦1mg的溶液。对照品溶液取羧甲司坦对照品10mg,加0.2mol/L盐

甲芬那酸片的检查及鉴别方法

鉴别(1)取本品的细粉适量(约相当于甲芬那酸25mg),加三氯甲烷15ml,振摇使甲芬那酸溶解,溶液照甲芬那酸项下的鉴别(1)项试验,显相同的结果(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)取本品的细粉适量(约相当于甲芬那酸20mg),加lmo

DTT溶液怎么配

1、1mol/lDDT溶液配制方法:用20ml0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09gDTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。  注意:DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。2、SDS-样品缓冲液:SDS100mg,巯基乙醇0.1ml,甘油1ml,溴酚蓝2mg,加入0.

注射用门冬酰胺酶(埃希)的效价测定方法

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5支,分别加适量磷酸盐缓冲液(取0.1mol/L磷酸氢二钠溶液适量,用0.1mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至8.0)溶解,并全量转移至同一量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液稀释至刻度,摇匀。精密量取适量,用上述磷酸盐缓冲液定量稀释制成每1ml中约

实验室常见的缓冲液的介绍

一.常见缓冲体系本节列举各种酸碱缓冲溶液的性质和配置方法,其中表1仅列举了各缓冲溶液的名称、组成(A液+B液)、基本浓度及适用的范围。表1 缓冲溶液一览表名称A液①B液①pH值范围pH值测定标准缓冲溶液指示剂pH变色域测定缓冲溶液(1)0.1mol / L盐酸0.2mol/L氯化钾(14.90g K

关于血清脂蛋白α检查测定的试剂介绍

  (1)包被缓冲液:0.02mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.5。  (2)包被抗体与酶抗体:用McAb混合液,以硫酸铵沉淀法制备抗人apo(a)-IgG,部分作包被用,部分以过碘酸盐法交联辣根过氧化物酶(RZ≥3)得酶标抗体,-20℃保存可稳定数月。  (3)稀释/封闭液:pH7.4缓冲液含磷酸盐

如何配制磷酸缓冲液和硼酸缓冲液

硼酸缓冲液一般PH6.77~9.24 A液:0.2mol/L硼酸 0.05mol/L NACL 配方:硼酸:1.2368g,NACL 0.2925g, 加蒸馏水至100ml B液:0.05mol/L硼酸钠 配方:硼酸钠1.907g,加蒸馏水至100ml 不同的PH值配方如下: PH A(ml) B(

注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠的性状及鉴别方法

性状本品为白色或类白色的粉末。鉴别(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品1瓶,加水5ml振摇使溶解,再用75%乙醇稀释制成每1ml中约含舒巴坦10mg的溶液。对照品溶液取舒巴坦对照品和头孢哌酮对照品各适量,加磷酸盐缓冲液(取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液39.0ml与0.2mol/

注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠的鉴别方法

鉴别(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品1瓶,加水5ml振摇使溶解,再用75%乙醇稀释制成每1ml中约含舒巴坦10mg的溶液。对照品溶液取舒巴坦对照品和头孢哌酮对照品各适量,加磷酸盐缓冲液(取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液39.0ml与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液61.0ml,

红霉素的检查方法

碱度取本品0.10g,加水150m1,振摇,依法测定(通则0631),pH值应为8.0~10.5。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定pH8.0磷酸盐溶液取磷酸氢二钾11.5g,加水900ml使溶解,用10%磷酸溶液调节pH值至8.0,用水稀释成1000ml 供试品溶液取本品约40mg,置1

亲和层析(affinity-chromatography)实验方法:溴化氰活化

亲和层析的实验操作和一般柱层析类似,都包括:装柱、上样、洗脱、样品收集、结果处理等步骤。溴化氰活化琼脂糖用于配体固相化是实验室亲和层析最常用的技术之一,该方法简便廉价,并广泛应用于蛋白质、核酸、凝集素等。下面以此为例介绍亲和层析的实验方法:试剂与配制1.Sepharose 4B2.CNBr(剧毒)3

核酸亲和层析法纯化蛋白质实验

实验方法原理 DNA 偶联至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通过它们本身的碱基实现的。从理论上讲,该方法也许干扰最佳结合序列的接近路径,但是这样一个简单的方法一直被广泛地成功应用。偶联效率的定量检测可经 A260 值测定评估,或者更精确地从偶联介质上水解核酸和进行磷酸盐测定。实

非放射性Dig-dUTP

[原理]DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶