0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH 0.2mol/L NaH2 PO4 (ml) 0.2mol/L Na2 HPO4 (ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 ......阅读全文
非放射性Dig-dUTP
[原理]DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验
步骤一 偶联寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步骤二 核酸亲和层析 实验方法原理 DNA 偶联至溴化氰活化的 Sepharcse 4
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连接APAAP复合物,再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断
阿米卡星的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含2.5mg的溶液对照品溶液取阿米卡星对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1m中约含阿米卡星2.5mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂( Spursil柱,4.6mm
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠的鉴别检查方法
鉴别(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品1瓶,加水5ml振摇使溶解,再用75%乙醇稀释制成每1ml中约含舒巴坦10mg的溶液。对照品溶液取舒巴坦对照品和头孢哌酮对照品各适量,加磷酸盐缓冲液(取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液39.0ml与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液61.0ml,
因用磷酸盐缓冲液,液相色谱柱堵了怎么办
看你使用的是什么牌子的色谱柱了,有的色谱柱是可以使用纯水冲去掉磷酸盐的。普通色谱柱是不能冲的,主要是由于水会溶解硅胶,导致相坍塌。还有的色谱柱是可以反冲。但是如果使用磷酸盐堵了,久了不用,磷酸盐结晶了,会导致硅胶颗粒受破坏,影响分离效果。一般而言,色谱柱堵了,可以用10~30的甲醇水走柱子。但是,不
微生物培养基的原理、制作和现象:磷酸盐缓冲液
储存液 磷酸二氢钾 34g 1mol/L氢氧化钠溶液 175mL 蒸馏水 825mL pH7.2 制法 先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL。稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释
改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)
成分 磷酸氢二钠(Na2HPO4 8.23g 磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O) 1.2g 氯化钠(NaCl) 5.0g 三号胆盐 1.5g 山梨醇 20g制法 将磷酸盐及氯化
配体与活化介质的偶联实验
配体与活化介质的偶联实验 试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 Affi-Gel 10 磷
配体与活化介质的偶联实验
试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液Affi-Gel 10磷酸钠(50 mmul L)乙醇胺实验步骤材料磷酸盐缓冲液(50 mmol/L;PH7.5~8,0)Affi-Gel 10(Bio-Rad Laboratories)磷酸钠(50 mmul/L),含 NaCl(1mol/L)(PBS)乙醇胺(100 mm
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽
红霉素的检查和鉴别方法
鉴别(1)在红霉素组分项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与标准品溶液主峰的保留时间一致。2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集167图)一致。如不一致,取本品与标准品适量,加少量三氯甲烷溶解后,水浴蒸干,置五氧化二磷干燥器中减压干燥后测定,除1980cm2至2050cm1波长范围
检测猪流行性腹泻病毒抗体
实验概要本实验用ELISA对猪流行性腹泻病毒抗体进行了检测。主要试剂1. 聚苯乙烯塑料微量组织培养板:4×10孔。2. 包被液(pH9.6):NaHCO3 29.3g、Na2CO3 19.5g,蒸馏水加至1000ml,置4℃保存。3. 洗涤液(0.01mol/L、pH7.4PBS):NaCl 8.0
检测猪流行性腹泻病毒抗体
实验概要本实验用ELISA对猪流行性腹泻病毒抗体进行了检测。主要试剂1. 聚苯乙烯塑料微量组织培养板:4×10孔。2. 包被液(pH9.6):NaHCO3 29.3g、Na2CO3 19.5g,蒸馏水加至1000ml,置4℃保存。3. 洗涤液(0.01mol/L、pH7.4PBS):NaCl 8.0
利用寡核苷酸延伸法进行纯化DNA片段的放射性标记
随机引物法:利用寡核苷酸延伸法进行纯化DNA片段的放射性标记1. 在一个0.5ml的微量离心管中加入溶于30μl水的模板DNA(25ng)及1μl随机脱氧核苷酸引物(约125ng)。盖紧微量离心管,置于沸水浴中2min。2. 将微量离心管移至冰上放置1min,4℃下离心10
核酸的纯化主要方法和分离纯化核酸时的注意事项(二)
核酸的纯化主要方法:超离心(提纯和分离最常用的方法,又分为①沉降速度超离心②沉降平衡超离心ρ=1.660+(G+C)%,相似条件下核酸密度ssRNA>dsRNA>ssDNA>dsDNA>tRNA和蛋白质环状DNA>线状DNA,DNA分子密度与构想有关,加入重金属AgHg)核酸提取的一般步骤:1、破碎
0.05moI/L-pH8.6-巴比妥缓冲液的配制
0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
0.05moI/L-pH8.6-巴比妥缓冲液的配制
巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g叠氮纳 0.2g加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠的性状鉴别检查方法
性状本品为白色或类白色的粉末。鉴别(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品1瓶,加水5ml振摇使溶解,再用75%乙醇稀释制成每1ml中约含舒巴坦10mg的溶液。对照品溶液取舒巴坦对照品和头孢哌酮对照品各适量,加磷酸盐缓冲液(取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液39.0ml与0.2mol/
红霉素肠溶片的检查方法
溶出度照溶出度与释放度测定法(通则0931法方法2)测定。酸中溶出量溶出条件以盐酸溶液(9-1000900ml溶出介质,转速为每分钟100转,依法操作,经2小时时,立将转篮升出液面。限度每片肠膜均不得有裂缝。缓冲液中溶出量溶出条件取酸中溶出量项下2小时的转篮,随即以磷酸盐缓冲液(pH6.8)(取0.
硫酸阿米卡星的含量测定方法
含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含阿米卡星2.5mg的溶液对照品溶液取阿米卡星对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1m1中约含阿米卡星2.5mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂( Spursi
丙硫氧嘧啶肠溶片的检查方法
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品的细粉适量(约相当于丙硫氧嘧啶50mg),置100m量瓶中,加甲醇5ml,振摇10分钟,加水50ml,振摇20分钟,使丙硫氧嘧啶溶解,用水稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密
毕赤酵母表达(pichia-pastoris-expression-)实验手册(2)
一.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制1.1 各种母液的配制10*YNB (含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基) 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基(无硫酸铵)+100g硫酸铵,溶于1000ml水中,过滤除菌。500*B (0.02%生物素 Biotin) 4℃保存 保存期为1年。2
核酸亲和层析法纯化蛋白质实验1
核酸亲和柱的应用极大地促进了核酸结合调节蛋白特性的研究,这些蛋白质涉及基因表达、染色体修复和复制、基因重组等的调控。核酸结合蛋白可以结合单链 DNA、双链 DNA 或 RNA。DNA 结合蛋白结合 DNA 可以是序列特异的,也可以是非特异的。此外,含有特异寡核苷酸的亲和树脂能用于某些酶的分离,这些酶
微生物培养基的原理、制作和现象:明胶磷酸盐缓冲液
成分 明胶 2g 磷酸氢二钠 4g 蒸馏水 1000mL pH6.2制法 加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min。
微生物培养基的原理、制作和现象:改良磷酸盐缓冲液
改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)成分 磷酸氢二钠(Na2HPO4 8.23g 磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O) 1.2g 氯化钠(NaCl) 5.0g 三号胆盐 1.5g 山梨醇
测定氨基糖苷类抗生素的残留量实验
实验材料 动物组织试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液乙酸 甲醇仪器、耗材 SPE柱离心管实验步骤 1. 前处理 称取2 g样品于50 mL聚丙烯离心管,加入3 mL磷酸盐缓冲液(10 mmol/L KH2PO4含0.4 mmol/LEDTA和2%三氯乙酸),均质(30~60 s)。塞紧,激烈振荡l
胰酶的检查方法
胰蛋白酶照紫外-可见分光光度法(通则401)测定。氯化钙溶液取氯化钙1.47g,加水500ml使溶解,用0.lmol/L盐酸溶液或0.lmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0~6.2硼酸盐缓冲液取硼砂2.85g、硼酸10.5g与氯化钠2.50g,加水使溶解并制成1000ml,调节pH值至7.5±0
多克隆抗体提取实验
实验材料 血清试剂、试剂盒 DEAE纤维素磷酸盐缓冲液仪器、耗材 烧杯布氏滤斗滤纸实验步骤 1. 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡