毛细管电色谱仪分析技术(一)

毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微之处的分辨能力得到极大提高,既能分离带电组分,又能分析中性分子,对复杂的混合样品显示出强大的分离潜力,代表微分离分析的趋势。一、发展历史:1974年,CEC出现,将电场施加到填充毛细管柱上,分离了数种溶质,显示出以电渗流作为驱动力的优越性。但当时并没有引起足够的关注。1981年,将10μm ODS填料填入170μm内径的毛细管柱中,在电场作用下成功分离了数种多环芳烃,获得了31000TP/m的柱效,*次展示了CEC的巨大潜力。二、工作原理:CEC采用HPLC固定相,通过高压输液泵产生的液压和在毛细管柱两端加上高压直流电场所产生的电场力,......阅读全文

毛细管等电聚焦的概念

中文名称毛细管等电聚焦英文名称capillary isoelectric focusing;CIEF定  义在毛细管内进行的等电聚焦。毛细管内壁经涂层处理使电渗流减到最小,再将样品和两性电解质混合进样,两个电极槽中分别为酸和碱,加高电压后,在毛细管内产生pH梯度,样品的各成分在毛细管中迁移至各自的等

毛细管电泳色谱仪扩散进样技术

毛细管电泳色谱仪扩散进样是利用浓度差扩散原理,当将毛细管浸入样品溶液时,样品分子因在毛细管管口界面存在浓度差而向管内扩散。一、进样质量:扩散进样时,在时间t内,进入毛细管的样品质量Q为:Q = 400CS(2Dt)1/2式中:D为样品分子的扩散系数,C为样品浓度。扩散进样动力是不可控制参数,进样量

毛细管电泳色谱仪电动进样技术

毛细管电泳色谱仪电动进样是当在毛细管的进样端浸入样品溶液并加上电场E时,组分因电泳和电渗作用而进入毛细管内。由于毛细管内径很小,对进样技术要求很高,进样区带宽度约是毛细管柱长的1%~2%,不能引入显著的区带扩张,以确保系统的;样品量必须<100nL,否则易造成过载。一、进样方法:毛细管洗净后,用微量

毛细管气相色谱仪的技术优势

 毛细管气相色谱仪的气密性检查非常重要,无论是刚开始安装亦或者后期维护,这都是必须可少的工作,只要保证气路不漏气才能保证气相色谱仪稳定工作,保证气相色谱仪的灵敏度。   毛细管气相色谱仪分流/不分流进样口是常用的进样口,它既可用作分流进样,也可用作不分流进样口如图是典型的分流/不分流进样器原理图。从

毛细管电泳色谱仪压力进样技术

毛细管电泳色谱仪压力进样要求毛细管内的填充介质具有流动性,当毛细管两端置于不同的压力环境中时,管内溶液流动,将样品引入。一、进样动力:进样动力有进样端加压(正压)、出口端抽真空(负压)和虹吸(重力)。1、进样端加压:采用压缩空气(钢瓶气)可实现正压进样,并可与毛细管清洗系统共用。多采用。2、出口端抽

气象色谱仪毛细管柱使用知识(一)

  气相色谱毛细管柱因其高分离能力、高灵敏度、高分析速度等独特优点而得到迅速发展。随着弹性石英交联毛细管柱技术的日益成熟和性能的不断完善,已成为分离复杂多组分混合物、及多项目分析的主要手段,在各领域应用中大有取代填充柱的趋势。现在新型气相色谱仪、气相色谱-质谱联用仪基本上都是采用毛细管色谱柱进行分离

等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍(二)

8、载体两性电解质pH值梯度不稳定的原因:阴极漂移是指在等电聚焦电泳中pH梯度的碱性端逐渐消失的过程。反之,如果其酸性端逐渐消失则称为阳极漂移。为了阐明等电聚焦电泳中pH值梯度不稳定的机制,提出了各种假说:(1)载体两性电解质向阴、阳极的等速电泳迁移。(2)在阴极因CO2的吸附而引起阴极液组分和浓度

新型PCR分析方法毛细管PCR技术

常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器,对于100~1样品,样品温度要比槽板温度滞后20—30s,加上槽板升降温度较慢(1’C/s),因此30个循环反应通常需要2~6h,循环时间多浪费在加热和冷却样品过程中,不能满足临床快速诊断的需要。毛细管PCR由于采用导热性远强于塑料管的毛细管作为反应

新型PCR分析方法毛细管PCR技术

新型PCR分析方法毛细管PCR技术 常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器,对于100~1样品,样品温度要比槽板温度滞后2030s,加上槽板升降温度较慢(1C/s),因此30个循环反应通常需要2~6h,循环时间多浪费在常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器,对于100~1样品,样

毛细管电泳色谱仪分析的理想目标

21世纪是生命科学大发展的世纪,人类基因组计划基本完成后,后基因组时代的基因组学和蛋白组学将快速发展,功能基因和蛋白质的分离检测对毛细管电泳色谱仪(HPCE)提出更高的期望。将所有的化学反应集成在一块很小的芯片(Chip)上,建立有一个实验室功能的芯片是HPCE发展的前景。Chip是以晶体硅、石英玻

毛细管电泳色谱仪分离分析模式详解

分析模式详解。毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳

电色谱仪分类

 电色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室电色谱仪和工业电色谱仪。2、按分离装置可分:毛细管电色谱仪和芯片电色谱仪等。3、按分离对象的荷电性质可分:阴离子电色谱仪、阳离子电色谱仪和中性分子电色谱仪。4、按分离对象的离子属性可分:无机离子电色谱仪和有机离子电色谱仪。5、按分离特征可分:高选择性电

毛细管电色谱的应用及发展

毛细管电色谱是在毛细管中填充或在管壁涂布、键合液相色谱的固定相,然后在毛细管的两端施加高压直流电,在电场作用下产生电渗流,流动相在电渗流的驱动下通过色谱柱。对中性化合物,其分离过程和HPLC类似,即通过溶质在固定相和流动相之间的分配差异而获得分离;当被分析的物质在流动相中带电荷时,除了和中性化合物一

毛细管电色谱的应用及发展

毛细管电色谱的应用及发展毛细管电色谱(Capillary electrochromatography, 简称 CEC)是在毛细管中填充或在管壁涂布、键合液相色谱的固定相,然后在毛细管的两端施加高压直流电,在电场作用下产生电渗流(Electroosmotic flow ,简称EOF),流动相在电渗流的

高效毛细管电泳色谱仪扩散进样技术

高效毛细管电泳色谱仪扩散进样是利用浓度差扩散原理,当将毛细管浸入样品溶液时,样品分子因在毛细管管口界面存在浓度差而向管内扩散。一、进样质量:        扩散进样时,在时间t内,进入毛细管的样品质量Q为:        Q = 400CS(2Dt)1/2        式中:D为样品分子的扩散系数

毛细管电泳色谱仪与质谱仪的联用技术

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,具有、分辨率高、重复性好、速度快和易于自动化等优点。质谱仪(MS)是通过对样品离子的质量和强度的测定进行定量和结构分析,具有灵敏度高和速度快等优点。CE与MS联用综合了两者的优点,

色谱仪毛细管柱内表面的改性(一)

普通玻璃和石英玻璃表面存在的硅醇基吸附电子密度高的化合物,硅氧桥的离子特征作为质子接受体形成氢键而吸附易给质子的化合物,普通玻璃表面存在的金属离子造成更严重的吸附和催化作用,会使高温下的固定液分解而流失,因此,在色谱仪毛细管柱涂渍固定液前必须对毛细管柱内表面进行处理,以改变化学和物理性能提高表面对固

毛细管电泳色谱仪毛细管概述

毛细管电泳色谱仪毛细管是电泳分离的关键。一、尺寸:毛细管尺寸的选择与分离模式和样品有关。自由溶液电泳多选用50或75μm内径的毛细管,分离的有效长度常为40~100cm之间。如进行大颗粒如红细胞分离,则需要内径大于300mμm的毛细管。CGE和CEC的有效长度一般控制在20cm左右。二、涂层:毛细管

毛细管电泳色谱仪毛细管简介

毛细管电泳色谱仪分离的关键部件是毛细管。一、毛细管材质:理想的毛细管必须是电绝缘、紫外可见光透明和富有弹性。目前使用的有塑料毛细管、玻璃毛细管和石英毛细管等,其中使用最多的是石英毛细管。熔融石英拉制的毛细管脆而易断,外涂聚酰亚胺后会变得很有弹性。二、毛细管检测窗口制作:毛细管的聚酰亚胺涂层不透明,检

凝胶色谱仪分析技术

凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用,是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。一、工作原理:小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。大分子被排斥在外,出峰最快。二、固定相:1、半刚性凝胶:为高交联度的聚苯乙烯,孔径范围较宽。常以有机溶剂作流动相。2

色谱仪分析方法(一)

第一节 色谱仪定性分析方法 本节主要阐述气相色谱仪定性分析方法。气相色谱仪定性分析就是要确定各色谱峰所代表的化合物。由于各种物质在一定色谱条件下均有确定的保留值,保留值可作为一种定性指标,目前各种色谱定性方法都是基于保留值定性的。但不同物质在同一色谱条件下,可能具有相似或相同的保留值,即保留值并非专

毛细管色谱仪分类

毛细管色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室毛细管色谱仪和工业毛细管色谱仪。2、按流动相物理状态可分:毛细管气相色谱仪和毛细管液相色谱仪。3、按功能可分:分析型毛细管色谱仪和制备型毛细管色谱仪。4、按分离原理可分:毛细管吸附色谱仪和毛细管分配色谱仪。5、按用途可分:毛细管生物色谱仪、毛细管制药

毛细管电泳分析技术的展望

  CE技术的研究和应用,给药物分析领域和药品检验工作带来了生机与活力,无疑将对该专业技术的发展及提高起着重要的推动和促进作用。尤其以对基因工程药物、中成药复方制剂的分析和中药材种属的鉴定,令人瞩目。但任何事物都有两面性,它也有弱点和不足,如有的药物用CE分析精确度还不够高;有的灵敏度很高,但专属性

毛细管电泳技术应用中药分析

中药品种繁多、药材产地各异、成分复杂,无论是药材还是成药的分析,都是一项非常艰难的任务。中药分析工作用现代化仪器设备和科技手段(如薄层色谱、HPLC等)虽取得巨大进展和成就,但往往只是对药材和成药成百上千个成分中的一个或几个成分的分析,实际只是一种象征性的代表式分析,与之起化学和药理效应的实际组合成

毛细管电泳色谱仪分析的关键问题

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带

毛细管电泳色谱仪分析中的Zeta电位

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。电渗流是CE的主要驱动力

毛细管电泳色谱仪分析中的电泳现象

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。一、电泳:电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。二、电泳技术:电

毛细管电泳色谱仪分析中的电渗现象

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,电渗流在CE中起着极其重要的作用。一、电渗:电渗是指在电场作用下,毛细管中液体沿毛细管内表面或或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。毛细管一般采用石英管,管内表面为硅胶,当内充缓冲液

毛细管电泳仪故障分析一

无电泳峰1、检查结果:没有电流。可能原因:毛细管堵塞或断裂。解决方案:用水冲洗毛细管,观察是否有水流出。若无水流出,拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂,可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤,将样品过滤或离心去除其中的颗粒。2、检查结果:电流波动很大,甚至几乎消失。可能原因:缓冲液中有气

毛细管电泳芯片等电聚焦分离

芯片等电聚焦分离芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同,都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3