毛细管电色谱仪分析技术(一)

毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微之处的分辨能力得到极大提高,既能分离带电组分,又能分析中性分子,对复杂的混合样品显示出强大的分离潜力,代表微分离分析的趋势。一、发展历史:1974年,CEC出现,将电场施加到填充毛细管柱上,分离了数种溶质,显示出以电渗流作为驱动力的优越性。但当时并没有引起足够的关注。1981年,将10μm ODS填料填入170μm内径的毛细管柱中,在电场作用下成功分离了数种多环芳烃,获得了31000TP/m的柱效,*次展示了CEC的巨大潜力。二、工作原理:CEC采用HPLC固定相,通过高压输液泵产生的液压和在毛细管柱两端加上高压直流电场所产生的电场力,......阅读全文

毛细管电色谱仪分析技术(一)

毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微之

毛细管电色谱仪分析技术

效毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微

毛细管电色谱仪分析技术(二)

②电动填充法:电动填充是利用电泳原理,使固定相在一定pH下带电荷,在电场中定向移动而把固定相填充到毛细管中。与高压匀浆填充法相比,电动填充法可有选择地把荷质比相同的固定相填入毛细管中,柱床均匀。③超临界CO2法:超临界CO2法是在毛细管柱一端制作临时柱塞后,另一端与贮液罐相连,将预填充的填料放入贮液

毛细管电色谱仪电色谱柱技术

毛细管电色谱仪(CEC)是在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以电渗流或电渗流与压力共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。电色谱柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分为填充毛细管柱、开管毛细管柱和整体毛细管柱。一、填充

毛细管等电聚焦电泳色谱仪分析技术

毛细管等电聚焦电泳色谱仪(CIEF)是以载体两性电解质为介质,根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。一、载体两性电解质应具备的条件:载体两性电解质是两性分子,使其在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可作为载体,但两性电解质不能用于等电聚焦。只有载体两性电解质,即具有好的电导和缓冲

高效毛细管电色谱仪电色谱柱技术

    高效毛细管电色谱仪(CEC)是在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以电渗流或电渗流与压力共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。电色谱柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分为填充毛细管柱、开管毛细管柱和整体毛细管

高效毛细管等电聚焦电泳色谱仪分析技术

高效毛细管等电聚焦电泳色谱仪(CIEF)是以载体两性电解质为介质,根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术。一、载体两性电解质应具备的条件:        载体两性电解质是两性分子,使其在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可作为载体,但两性电解质不能用于等电聚焦。只有载体两性电解质,即

毛细管电色谱仪整体柱技术

毛细管电色谱仪整体毛细管柱是采用有机和无机方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应或固化,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。整体毛细管柱按基质不同可分为无机基质整体毛细

毛细管电色谱仪开管柱技术

毛细管电色谱仪是在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以电渗流或电渗流与压力共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。开管毛细管柱是将固定相键合或涂敷在毛细管壁上,引入色谱分配机理。一、制备方法:开管毛细管柱制备的关键是增大比表

毛细管电色谱仪电色谱柱的制备

毛细管电色谱仪(CEC)是在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以电渗流或电渗流与压力共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。电色谱柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分为填充毛细管柱、开管毛细管柱和整体毛细管柱。一、填充

高效毛细管电色谱仪电色谱柱的制备

    高效毛细管电色谱仪(CEC)是在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以电渗流或电渗流与压力共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。电色谱柱是CEC的核心部件,按固定相形式不同可分为填充毛细管柱、开管毛细管柱和整体毛细管

毛细管胶束电泳色谱仪分析技术

毛细管胶束电泳色谱仪(MECC)是在缓冲液中加入浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂,胶束相在分离中起到准固定相的作用,是电泳技术与色谱技术相结合的产物。一、工作原理: MECC中,把离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)加入缓冲液,当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负电的胶束。虽然胶束带负

毛细管等速电泳色谱仪分析技术

毛细管等速电泳色谱仪(CITP)是采用先导电解质和尾随电解质,利用待测离子淌度的不同进行分离。一、CITP条件:1、特殊的电解质系统:(1)前导电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力的离子。(2)尾随电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都小并具有一定缓冲能力的离子。(3)对离子:以

毛细管凝胶电泳色谱仪分析技术

毛细管凝胶电泳色谱仪(CGE)是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合,是当今分离度极高的一种分离技术。一、载体特性:采用聚丙烯酰胺凝胶作为载体的目是防止CGE电泳过程中分子的对流和扩散,使待测组分得到更

毛细管电色谱及其在药物分析中的应用(一)

毛细管电色谱[1~3](Capillary Electrochromatography,CEC)是近10年来综合了现代最新分离技术高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)和毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,C

等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍(一)

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。按pH梯度的形成原理不同可分为载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳和固相pH梯度等电聚焦电泳。一、载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳:1、理想的载体两性电解质应具备的条件:载体两性电解质是两性分子

​毛细管电色谱的技术优势

毛细管电色谱(CEC)在中草药分析中显示出一些独特的优势,如:CEC流动相相对简单、用量少、峰容量大、更易与质谱(MS)联用。特别是植物提取物中活性成分复杂,需要对色谱峰进行精确的指认并控制峰纯度;采用CEC—MS方法可在线提供中药中各种化合物的质谱图。

毛细管区带电泳色谱仪分析技术

 一、工作原理:  CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管中,由于电渗流的存在,所有粒子都随电渗流一起向负极迁移,电渗流速度约是一般离子电泳速度的5~7倍。各种电性粒子在毛细管中的迁移速度分别为:  1、阳离子:vap

毛细管区带电泳色谱仪分析技术

毛细管区带电泳色谱仪(CZE)又称自由溶液区带电泳仪,整个系统采用同一种缓冲液充满,以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异进行分离。一、工作原理: CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管

毛细管区带电泳色谱仪与毛细管等电聚焦电泳色谱仪比较

毛细管区带电泳色谱仪是利用溶质分子在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个个独立的溶质带而达到分离,毛细管等电聚焦电泳色谱仪是利用不同等电点的溶质分子分别聚集在毛细管内不同的位置上不作迁移而达到分离。两者比较如下:一、分离原理:  1、毛细管区带电泳色谱仪:电泳淌度不同  2、毛细管等电

毛细管电泳色谱仪分析的在线样品富集技术

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的

毛细管电泳色谱仪毛细管技术指标详解

毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,毛细管是分离的关键。毛细管技术指标包括材质、内径、外径、壁厚和长度等。一、材质:理想的毛细管必须是化学和电惰性,能透过紫外和可见光,有一定的韧性,富有弹性,易于弯曲,耐用而且便宜。目前使

毛细管电泳色谱仪检测技术

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE的毛细管极细,

毛细管电泳和毛细管电色谱

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE):以高压电场为驱动力,以电解质为电泳介质,以毛细管为分离通道,样品组分依据淌度和分配行为的差异而实现分离的一种色谱方法。它有多种分离模式,可以采用液相色谱中的各种检测方法。CE既可以分离带电荷的溶质,也可以通过毛细管胶束电动色谱

毛细管电泳色谱仪的检测技术

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的

毛细管电泳色谱仪填充柱技术

毛细管电色谱仪(CEC)填充毛细管柱是将固定相填充到毛细管中,通过两端烧结柱塞将固定相保持在毛细管中而成。其zui大优点是可利用众多的HPLC固定相,根据化合物与固定相的作用不同实现分离,在CEC中应用zui广泛。一、固定相:固定相是影响填充毛细管柱分离选择性、柱效和分离速度的重要因素,是发展新型C

毛细管等电聚焦电泳色谱仪分离蛋白质的原理

蛋白质是一种两性电解质分子,当它在大于其等电点的pH环境中时,会解离成带负电的离子,在电场中向正极泳动;当它在小于其等电点的pH环境中时,会解离成带正电荷的离子,在电场中向负极泳动。这种泳动作用到达它的等电点的pH环境中,即它的净电荷为零时才会停止,此时蛋白质在电场作用下的迁移运动与扩散运动达到平衡

色谱仪毛细管柱的制备(一)

色谱仪毛细管柱的制备包括毛细管柱材质的选择、毛细管柱的拉制、毛细管柱内表面的改性、毛细管柱固定液的涂渍和毛细管柱的老化等。一、毛细管柱材质的选择:色谱仪毛细管柱的材料应具有化学惰性、热稳定性好、内表面光滑易润湿和操作方便等性能。自毛细管柱发明以来,对塑料、铜、镍和不锈钢等多种材料进行过研究,目前普遍

毛细管电色谱及其在药物分析中的应用(二)

4 研究进展4.1 柱制备 在CEC中,柱制备是很重要的环节,因为柱性能,如柱重复性、柱寿命、柱效等,是实际应用时最关键、最基础的指标。常用方法是柱内填充固定相颗粒,即填充电色谱柱,主要方式有匀浆填充制备法、拉伸填充制备法、电动填充法。填充柱的柱容量大,但塞子效应、气泡、填充均匀度也是无法回避的问题

毛细管电泳色谱仪分离分析模式

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳、毛细管胶束电