如何判断高效液相色谱仪何时应更换新柱?
如何判断高效液相色谱仪何时应更换新柱?色谱工作者经常遇到这样的问题。应该何时更改列?列中的列数是否可以反映列的状态?根据经验确定色谱柱应“退役”的标准,当色谱柱中的色板数减少到新色谱柱的百分比时,您可以认为该色谱柱不能再使用。您如何判断您的实验室中不再使用色谱柱?什么?据信,每个色谱工作者都关心分辨率。分辨率是色谱柱分离特定样品的指标。色谱的核心任务是分离每个峰。在实践中,我们需要获得具有合理峰宽的窄峰以获得较低的检测限(这不再是问题,现在该柱可以满足该要求)。更好的方法是使用压力 分辨率和峰形的混合索引来检查列的状态。压力测量是最简单的,通常我们确定色谱方法以满足以下要求:使用新色谱柱时,色谱柱压力不高于2500 psi,并且在任何情况下压力都不超过3000 psi。虽然现代液相色谱系统可以在更高的压力下使用,但由于高压导致的系统损失和泄漏问题可能非常严重。当压力超过3000 psi时,请考虑更换进样器和色谱柱之间......阅读全文
高效液相色谱填料应如何选择(3)
三、其它无机填料
高效液相色谱填料应如何选择(1.1)
高效液相色谱是 目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流 动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体
高效液相色谱填料应如何选择(1.2)
2、反相色谱 反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。 样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。 常用的反相填料有:C18(ODS)、C8
高效液相色谱仪分离柱,柱压高是由哪些原因引起的?
如果高效液相色谱仪系统压力过高,首先判断压力产生的位置,然后采用分段拆卸的方法进行判断一般从后向前拆,首先断开色谱柱与检测器的连接,压力不会明显下降或下降,检测器不会被堵塞,检测器也不会被堵塞;然后拆色谱柱,压力会明显下降,色谱柱会有问题,否则泵的出口会堵塞,柱没有问题。当确定该列存在问题时,有以下
高效液相色谱仪的柱温箱有什么作用
用来保温的。如果色谱柱温度大于常温就得用柱温箱!
高效液相色谱仪柱压问题及解决办法
高效液相常见的就是柱压问题及解决办法柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法: 1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。 2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
色谱柱堵塞的话会造成峰宽展。其实色谱柱被堵塞的最典型标志是柱压升高。
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是
高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决
1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是
高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项
高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项:一、每天用足够的时间平衡色谱柱。二、尽量使用预柱保护分析柱。三、色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。四、避免使用高粘度的溶剂作流动相。五、避免流动相组成和极性的剧烈变化。六、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。七、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2.5~7
高效液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点
一、硅胶特点: 大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。 1、机械强度高,使柱反压较低。 2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。 3、更换溶剂时填料大小不会变化。 4、在高pH值时会溶解。 5、表面呈酸性。 6、纯度不高的酸性硅胶(A型硅胶)可分离中性
高效液相色谱仪的柱温箱有什么作用
用来保温的。如果色谱柱温度大于常温就得用柱温箱!
高效液相色谱仪的柱温箱有什么作用
使进入到柱子的流动相保持在一个温度上,否则检测图谱容易发生基线漂移
【干货】如何判断一只色谱柱的“退休”时间?
色谱工作者常会碰到这样的问题,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?如何确定一支色谱柱是否应该“退休”?新的色谱柱在使用前都要做什么?如何对柱子进行清洗?好的色谱柱应具备哪些性能?等等一系列问题,都是今天小萃要和您探讨的。 新色谱柱开启和安装推荐步骤 1.使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,
高效液相色谱仪理想检测器应具备的特性
高效液相色谱仪理想检测器应具备的特性:1、具有高灵敏度和可预测的响应。2、对样品所有组分都有响应,或具有可预测的特性,适用范围广。3、温度和洗脱剂流速的变化对响应没有影响。4、响应与洗脱剂组成无关,可作梯度洗脱。5、死体积小,不会造成柱外谱带展宽。6、使用方便、可靠、耐用,易清洗和检修。7、响应值随
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意什么
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意:1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。4、流动相应满足检
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意什么
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意:1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。4、流动相应满足检
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小,填
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
液相色谱仪色谱柱如何安装和清洗?
一、液相色谱仪色谱柱的安装 标准操作规程(SOP)应为:取A管路放入流动相瓶中→ 拧松泵头 → 流速由0ml/min逐渐升至10ml/min,观察尾液是否呈瀑布状流出(持续10秒) → 拧紧泵头 → 流动相呈抛射状从安装色谱柱的一端喷出(观测是否呈抛物线状,持续5秒) → 流速逐步降至1.
如何分析高效液相色谱仪的色谱图?
事实上高效液相色谱仪色谱图,以简单的方式,是以时间为横坐标,电信号为纵坐标的二维图谱。在高效液相色谱法中,可以简单地想象固定相是一种多孔的、海绵状的、圆柱形的结构,样品在其中进出。因为每种物质的吸附能力不同,所以该距离将在色谱图中绘制。分析高效液相色谱仪色谱图方法:在手动采样步骤中,配置流动相,将针
高效液相色谱仪,跑梯度,如何平衡基线
首先做梯度时基线漂移是正常的,但可以通过以下措施来改善基线漂移的严重程度。1、做梯度前最好,把色谱柱用纯的有机溶剂冲洗一下或是用新的色谱柱,防止柱内残留物引起基线的漂移。2、试剂纯度最好都是正规的色谱纯试剂,如何纯度不够,在梯度时,也会出现基线的漂移。3、控制好室温或柱温,防止有较在的温度波动。4、
高效液相色谱仪如何用水冲系统
根据你使用的色谱柱和用过的流动相来决定用什么样的溶剂来冲洗系统。 如果用过盐或者酸,必须用9比1的水和合适的有机溶剂先冲洗一段时间,将其中的盐分冲洗干净,防止结晶,然后逐渐提高有机相的比例来冲洗,冲洗时间可以根据柱子的死体积来计算,最后用纯有机相来冲洗,最好是乙腈,因乙腈不容易挥发,柱子不容易干,