高效液相色谱仪硅胶色谱柱的清洗方法

在液相色谱的检测和分析过程中,当硅胶色谱柱上吸附的样品成分积累到一定程度时,就开始形成新的固定相 新的检测物质可以与残留杂质形成一定的分离机制,从而导致保留时间波动和拖尾现象。随着时间的积累,高效液相色谱仪柱体的反压将超过泵体所能承受的最大压力,使柱体无法工作,在堵塞处产生空容积。再生受污染液体柱的关键是了解污染物的性质,寻找合适的溶剂去除污染物。如果污染是由反复注射过程中积聚的强残留物质引起的,可以用90-100%的强溶剂冲洗20倍体积以去除污染。例如,非水溶剂如甲醇、乙二醇和四氢呋喃可用于柱中残留的脂质。 如果使用缓冲系统,不要直接切换到强溶剂。突然切换到高浓度有机溶剂可能会沉淀高效液相色谱仪流动系统中的缓冲液,从而导致更大的问题,如柱头堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损坏或进样阀轴故障。用非缓冲流动相洗涤5——10倍体积后,应更换强溶解剂(即用水更换缓冲溶液)有时,强溶剂洗不掉高效液相色谱仪色谱柱上残留的......阅读全文

凝胶色谱柱清洗方法

亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。     这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况还

凝胶色谱柱清洗方法

   亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。   这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况

色谱柱——硅胶基质填料

1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动

填充柱高效液相色谱仪分类

填充柱高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:填充柱高效液相化验室色谱仪和填充柱高效液相工业色谱仪。2、按功能可分:分析型填充柱高效液相色谱仪和生产型填充柱高效液相色谱仪。3、按操作压力可分:填充柱高效液相中压色谱仪和填充柱高效液相高压色谱仪。4、按分离规模可分:小型填充柱高效液相色谱仪和大型

如何清洁高效液相色谱仪中的色谱柱

  高效液相色谱仪维护保养规程  一、检测器的维护和保养  1. 检测器是高效液相色谱仪器的数据收集部分,由很多的电子和光学元件组成。禁止拆卸更动仪器内部元件防止损坏或影响准确度。  2. 仪器内部的流通池是流动相流过的元件,样品的干净程度和微生物的生长都可能污染流通池,导致无法检测或检测结果不准,

高效液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理

高效液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理:1、酸处理的目的:(1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。(2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如 Na+、Ca2+、Al3+和 Fe3+等。(3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于

离子色谱柱污染的清洗方法

离子色谱柱的再生一般的情况下效果不是很好.应该根据情况确定再生方法;一般键合硅石基质的离子色谱柱可100%兼容有机溶剂,高聚物基质的离子色谱柱交连度大于50%的也可100%兼容有机溶剂,可用纯的有机溶剂(如氯仿等)来冲洗柱子以消除有机物的污染,但是应注意一点有机溶剂冲洗以前先用甲醇/水混合物冲洗,再

离子色谱柱污染的清洗方法

离子色谱柱的再生一般的情况下效果不是很好.应该根据情况确定再生方法;一般键合硅石基质的离子色谱柱可100%兼容有机溶剂,高聚物基质的离子色谱柱交连度大于50%的也可100%兼容有机溶剂,可用纯的有机溶剂(如氯仿等)来冲洗柱子以消除有机物的污染,但是应注意一点有机溶剂冲洗以前先用甲醇/水混合物冲洗,再

色谱柱的清洗和再生方法

除非特殊说明,在所有情况下,所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40~60倍。应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等,比较色谱柱性能的改善,以确定清洗的效果。确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液,清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶。应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶。

离子色谱柱污染的清洗方法

离子色谱柱的再生一般的情况下效果不是很好.应该根据情况确定再生方法;一般键合硅石基质的离子色谱柱可100%兼容有机溶剂,高聚物基质的离子色谱柱交连度大于50%的也可100%兼容有机溶剂,可用纯的有机溶剂(如氯仿等)来冲洗柱子以消除有机物的污染,但是应注意一点有机溶剂冲洗以前先用甲醇/水混合物冲洗,再

高效液相色谱仪柱温箱的作用

柱温箱是高效液相色谱仪分析中用来控制液相色谱柱温度的温度控制仪器。能准确、稳定地控制液相色谱柱的稳定性。有利于提高液相色谱柱的灵敏度,提高光谱峰的分辨率,加快分离速度,缩短分析时间,保证分析结果。准确度和再现性。对于高效液相色谱仪而言,柱温的升高可以加快分离过程,但样品的不稳定保留时间会增加检测的难

实验室分析方法高效液相色谱仪液相色谱柱保护柱选择

在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样

高效液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点

一、硅胶特点:        大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。  1、机械强度高,使柱反压较低。  2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。  3、更换溶剂时填料大小不会变化。  4、在高pH值时会溶解。  5、表面呈酸性。  6、纯度不高的酸性硅胶(A型硅胶)可分离中性

高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项

高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养事项:一、每天用足够的时间平衡色谱柱。二、尽量使用预柱保护分析柱。三、色谱柱在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。四、避免使用高粘度的溶剂作流动相。五、避免流动相组成和极性的剧烈变化。六、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。七、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2.5~7

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

色谱柱堵塞的话会造成峰宽展。其实色谱柱被堵塞的最典型标志是柱压升高。

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是

高效液相色谱仪的色谱柱堵塞了怎么解决

1、色谱柱“堵”的表现“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。2、色谱柱“堵”的原因分析原因1:配制流动相时细菌污染首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是

高效液相色谱法中硅胶键合柱的清洁和再生

  再生被污染 HPLC 柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的,利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候,经过多次操作以后的色谱柱用 90~100%的溶剂 B(双溶剂反相系统中较强的溶剂)冲洗 20 个体积可以清除污

液相色谱仪色谱柱的填充方法

如果实验室具备一定条件,可以自行填充液相色谱仪色谱柱,填充方法主要有干法和匀浆填充法。一、干法:原则上粒径大于20um的固定相可采用此法装柱。具体方法是将固定相通过漏斗加入到垂直放置的色谱柱管中,同时敲打或振动柱管,以得到填充紧密而均匀的色谱柱。二、匀浆填充法:匀浆填充法装柱又称湿法装柱,无论大粒

高效液相色谱柱的洗柱方法

1、色谱柱清洗要看你的色谱柱是孔径是多少微米,适合的流速是多少。2、以4.6微米的为例,先用纯水清洗2小时,再用甲醇清洗1小时。用的时候直接换上流动相。3、高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流

硅胶基质液相色谱柱的选择方法及条件

  硅胶基质液相色谱柱的选择方法及条件:   填料基质   1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。   2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定,机械强度小。

硅胶基质液相色谱柱的选择方法及条件

填料基质1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定,机械强度小。 颗粒外形大多现代HPLC填料都是球形颗粒,但有时是不规则的颗粒。球形颗粒

硅胶基质液相色谱柱的选择方法及条件

硅胶基质液相色谱柱的选择方法及条件:填料基质1.硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定,机械强度小。 颗粒外形大多现代HPLC填料都是球形

色谱柱、保护柱再生(清洗)以及保存方法

当保护柱或色谱柱的压力渐升时,可通过以下方法对问题配件进行清洗再生。注意:清洗色谱柱时需要将保护柱和抑制器、电导池取下,连接顺序是泵→六通阀→色谱柱(需要反接)→废液管;清洗保护柱时需要将色谱柱和抑制器、电导池取下,连接顺序是泵→六通阀→保护柱(需要反接)→废液管 亲水性离子污染按以下步骤冲洗(流量

色谱柱、保护柱再生(清洗)以及保存方法

亲水性离子污染按以下步骤冲洗(流量 0.5 mL/min)1、反接柱子(保护柱或色谱柱)注意:一定要将抑制器从流路中断开,避免损坏抑制器。2、100分钟:10倍淋洗液浓度的溶液(起清洗作用的主要是Na2CO3)3、100分钟:正常浓度淋洗液4、正接 油性物质污染(如:有机物)按以下步骤冲洗(流量 0

超高效液相色谱柱-可以在高效液相色谱仪使用吗

完全可以,我们实验室就是用的超高惰性的色谱柱用在安捷伦1200上,只是压力会变得比较大,只要不超过仪器的压力上限就可以了。

影响高效液相色谱仪色谱柱寿命的三大因素

在使用液相色谱柱期间,固体颗粒污染、pH值和强保留材料污染是影响色谱柱寿命经常遇到的因素。一、固体颗粒物质固体颗粒:空气中的粉尘、流动相中的固体颗粒、样品中的固体颗粒、泵和密封圈的磨损、管道的老化都是固体颗粒的来源。很多来源是压倒性的,特别是泵和密封圈的磨损,这使得人们无处逃脱。高效液相色谱仪制造商