高效液相色谱法中硅胶键合柱的清洁和再生

再生被污染 HPLC 柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的,利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候,经过多次操作以后的色谱柱用 90~100%的溶剂 B(双溶剂反相系统中较强的溶剂)冲洗 20 个体积可以清除污染物。 例如,柱子中残留的脂质就能用非水溶剂如甲醇、乙晴、四氢 呋喃。 如果你使用的是缓冲液系统,不要直接切换到强溶剂,突然转换到高浓度有机溶剂可能会使 HPLC 流动体系中的缓冲液沉淀,这样会导致更大的问题如柱头 堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲流动相(即把缓冲液换成水)。冲洗 5~10 个体积以后才更换强溶剂。 有时候,强溶剂也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么更强的溶剂或者是一系列溶剂就有必要用来清洗柱子......阅读全文

高效液相色谱法中硅胶键合柱的清洁和再生

  再生被污染 HPLC 柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的,利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候,经过多次操作以后的色谱柱用 90~100%的溶剂 B(双溶剂反相系统中较强的溶剂)冲洗 20 个体积可以清除污

苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗

这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是

苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗

这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是

苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗

这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是

苯基键合硅胶与苯基硅烷键合硅胶柱一样吗

甲基苯基乙烯基硅橡胶甲基苯基乙烯基硅橡胶是在甲基乙烯基硅橡胶的分子链中引入甲基苯基硅氧链节或二苯基硅氧链节而得的产品。在聚硅氧烷的侧基上引入苯基,由于破坏了二甲基硅氧烷结构的规整性,大大降低了聚合物的结晶温度,扩大了该聚合物材料的低温应用范围。因此,甲基苯基乙烯基硅橡胶除了具有甲基乙烯基硅橡胶所有的

清洗键合硅胶反相色谱柱的方法,你知道吗?

清洗键合硅胶反相色谱柱时,有时使用有机溶剂是不能去除色谱柱上的污染物的。如果金属离子被硅胶吸附或与键合,这种情况就特别明显了。这时,可以使用螯合试剂如0.05M的乙二胺四乙酸(EDTA)来冲洗色谱柱。EDTA会同许多金属形成络合物,并把他们进行溶解。在使用过了EDTA后,你可以用水彻底冲洗色谱柱。如

色谱柱键合基团有哪些

常规的键合基团有C8、C18、苯基、氨基、五氟苯基、氰基、裸硅胶等。

键合硅胶高效液相色谱柱使用中应注意哪些基本问题

这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是

液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。    在检测

键合硅胶高效液相色谱柱使用中应注意哪些基本问题

首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa

键合相色谱仪色谱柱的维护

键合相色谱仪色谱柱的维护:一、对硅胶基键合相,水溶液流动相的pH值不得超出2~8.5,温度不宜过高。二、色谱柱在酸性或碱性条件下使用后,应依次用水和甲醇清洗。三、防止色谱柱被振动或撞击,否则柱内填料床层产生裂缝和空隙,会出现驼峰或对峰。四、防止流动相逆向流动,否则会使固定相层位移,柱效下降。五、除去

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余?

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质如血

色谱柱——硅胶基质填料

1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动

液相色谱柱的色谱柱再生

 液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降,需要定期进行彻底清洗和再生。  1、反相柱  分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。  2、正相柱  

液相色谱柱的色谱柱再生

液相色谱柱的色谱柱再生   液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降,需要定期进行彻底清洗和再生。  1、反相柱  分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:满足不同的分离要求。由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形良好:满足定量精度、灵敏度和分离度要求。

固相萃取、柱色谱和化学键合色谱的区别

  最老的是柱色谱,也叫柱层析,当初分离叶绿素的时候,就是用碳酸钙等粉末填在柱子里做的.后来又简化出薄层色谱.  化学键合色谱,是对固定相而言,用什么碳酸钙、硅藻土做固定相虽然经典,但适用面不够广.后来利用化学反应通过共价键将有机分子键合在载体(硅胶)表面,形成均一、牢固的单分子薄层而构成的固定相.

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

  反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:        满足不同的分离要求。        由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形

色谱柱的再生

•反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),纯甲醇,二氯甲烷等溶剂作流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱的量为20一30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。•正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20

色谱柱的再生

高效液相柱是消耗品,会随使用时间或进样的次数增加,出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰,柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生。1、反相柱分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。2、正相柱分别用正己烷、

Silica硅胶色谱柱使用方法

Silica硅胶色谱柱使用方法1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用

Silica硅胶色谱柱使用方法

  1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。   2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌。   

色谱柱的如何再生

你的问题太笼统了,你是问什么固定相的色谱柱呢?不同的固定相再生方法不一样。C18柱子清洗再生用下列10倍柱体积的溶剂清洗:(正向冲洗时流速:0.5ml/min)95%水:5%乙腈(或甲醇)(去除缓冲盐)如系统没有梯度功能中间增加5倍柱体积50%水:50%乙腈(或甲醇)冲洗步骤。95% 乙腈(或甲醇)

色谱柱的再生问题

  在色谱仪实验中,色谱柱起着相当中的角色,色谱柱是由柱管和固定相组成,按照拄管的粗细和固定相的填充方式分为填充柱和毛细管柱。测试色谱柱的重要指标一般就是分离度、理论塔板数、峰宽、峰形等,其中分离度和理论塔板数应该更为重要。因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现记录器上出现的一个个

液相色谱柱再生

1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易

液相色谱柱再生

1、色谱柱的使用说明: (1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容

色谱柱的再生方法

(1 )反相柱的再生,采用以甲醇:水=90: 10(V/V),纯甲醇,异丙醇,二氯甲烷等溶剂作流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱的量为20~30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。(2)正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱。每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒。每种

什么叫色谱柱再生

就是因为分析过程中在色谱柱内有残留物,影响下次分析 要用GM0415的说法去做,是色谱柱恢复样品分析能力的一种过程

反相键合相色谱中,C18柱的分离原理

针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水