牛胚气管细胞培养常见问题及解决方案
牛胚气管细胞培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按......阅读全文
牛胚气管细胞培养常见问题及解决方案
牛胚气管细胞培养基及培养冻存条件准备：1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案 培养基pH值变化迅速 培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压，NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时，应相应地使用5%-10%的CO2分压 细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案
培养基pH值变化迅速培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压，NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时，应相应地使用5%-10%的CO2分压细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4圈碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足---加入HEPES缓冲液，使其终浓度为1
PCR常见问题及解决方案
PCR常见问题及解决方案 1没有扩展条带 可能的原因及对应的解决方案如下： 酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR
ELISA常见问题及解决方案
一．背景高或者非特异性染色 原因 解决方案 抗体的非特异性结合 更换封闭液（例如，使用酪蛋白替代BSA）；封闭结束后不要清洗；倒出封闭液，吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。 未充分清洗酶标板 确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步
ELISA常见问题及解决方案
一．背景高或者非特异性染色 原因解决方案抗体的非特异性结合更换封闭液（例如，使用酪蛋白替代BSA）；封闭结束后不要清洗；倒出封闭液，吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。未充分清洗酶标板确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步骤之间清洗3~5次，不要增加清洗次数。清洗完成后，将
ICP常见问题及解决方案
1、Q射频发生器的频率有40.68和27.12MHz两种哪中更好？A单就两种频率本身来说，都可以满足作为热源的需要，但是由于所谓趋肤效应的存在，频率越高趋肤效应越大，这样有两个好处：等离子体厚度小，光强会更大；中心孔道大，样品对等离子体的影响小（等离子体也是电导体），不容易导致灭火，尤其切换到高盐、
ELISA常见问题及解决方案
一．背景高或者非特异性染色 原因 解决方案 抗体的非特异性结合 更换封闭液（例如，使用酪蛋白替代BSA）；封闭结束后不要清洗；倒出封闭液，吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。 未充分清洗酶标板 确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步
PH计常见问题及解决方案
常见问题及解决方案1.同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2.同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如，不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一
pH计常见问题及解决方案
1 同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2 同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一时间
Western－Blotting常见问题及解决方案
Western Blotting常见问题及解决方案问题原因解决方案胶不平玻璃板不干净胶板洗刷干净；催化剂或加速剂的量不合适加入过硫酸铵和TEMED的量要合适；试剂未混均，致使部分胶块聚合不均匀加入试剂后摇匀，使其充分混合；受热不均匀导致胶聚合不均匀温度合适凝胶漏液玻璃板未对齐两块玻璃板底部要对齐条带
pH计常见问题及解决方案
常见问题及解决方案1 同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2 同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同
pH计常见问题及解决方案
1.同一样品，两次测量的pH值不一样？ 温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。 2.同一样品，同时在两台pH计上测量，读数不一致？ 由于两台pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一
ELISA实验常见问题及解决方案
指南。以下是影响ELISA检测的关键因素，也是众多ELISA 用户在实验中经常遇到的问题及解决方案，希望能对您的ELISA检测有帮助：为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作？ 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应，实验前务必将所有试剂平衡至室温，包
氘灯常见问题及解决方案
光源问题Q&AQ1：什么时候应该更换氘灯？ A1：氘灯质保寿命都在1000小时或2000小时使用时间；当您发现仪器系统计时器氘灯使用时间达到质保时间后就应当更换氘灯；从经济的角度考虑，如果氘灯能量信噪比符合实际使用需求，便无须更换。Q2：购买氘灯应该提供哪些信息？A2：提供使用氘灯的仪器品牌和型号以
PCR常见问题及解决方案（二）
问题可能原因解决方法无产物或产量低模板浓度偏低或偏高电泳检测模板浓度，调整模板用量模板降解重新制备；基因组DNA、cDNA应小量分装后低温保存模板中含有抑制反应的杂质纯化模板引物浓度不足调整引物浓度，特别是针对长片段PCR引物存在二级结构重新设计引物，避免二级结构；优化退火温度引物降解引物应高浓度小
PH计常见问题及解决方案
1.同一样品，两次测量的 pH值不一样? 温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。 2.同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致? 由于两台 pH计的校正条件不一样(如，不同时间做的校正)，造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液
ICP常见问题及解决方案（二）
13、Q ICP-OES和ICP-AES有何区别？A ICP-OES和ICP-AES是电感耦合等离子体发射光谱法不同时期的叫法，ICP-OES即Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry--电感耦合等离子体发射光谱法，旧称
ICP常见问题及解决方案（一）
ICP-OES Frequently Asked Questions1、Q射频发生器的频率有40.68和27.12MHz两种哪中更好？A单就两种频率本身来说，都可以满足作为热源的需要，但是由于所谓趋肤效应的存在，频率越高趋肤效应越大，这样有两个好处：等离子体厚度小，光强会更大；中心孔道大，样品对等离
TA克隆常见问题及解决方案
TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3加上A。例如：Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突
核酸电泳常见问题及解决方案
核酸电泳常见问题及解决方案
细胞培养要用胎牛血清
养细胞的人都知道选择高品质的血清对试验成功的意义尤其是干细胞的培养更是如此，而正因为市场的需求造成了市面上种类繁多的血清层次不齐，采购无从下手。我们就来看下优质的血清它都应该具备哪些条件。1. 内毒素低，内毒素选取小于3Eu/ml，可以使细胞更健康。对于客户做实验更加顺利。如果选取内毒素较高的血清，
pH计的常见问题及解决方案
1 同一样品，两次测量的 pH值不一样？ 温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。 2 同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？ 由于两台 pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲
COD测定中常见问题及解决方案
一、采不到试剂或水样报警 （1）采样管堵塞造成无法提到试剂，检查堵塞位置，清洗或更换堵塞管路。 （2）如果九通阀堵塞在外部无法清除堵塞物的情况下方可拆开九通阀进行清洗。 （3）采样管漏气，检查采样管和九通阀相连的各个螺丝，是否压紧，有无漏气现象，如有请从新连接管路并压紧。 （4）高低位信号未
水浴振荡摇床常见问题及解决方案
问题一，显示正常、设定正常、无法加热。解决方案：（1）接通电源，打开电源开关，调整设定温度高于实际测量温度，检查温控仪有无输出指示，有则测量加热管是否有电压输入，有则加热管坏，更换即可，没有电压输入加热管，多为继电器发生故障。若温控仪没有电压输出指示，建议更换温控仪。（2）温控仪显示LLL或999（
RTPCR常见问题及解决方案
RT-PCR常见问题及解决方案
水浴振荡摇床常见问题及解决方案
水浴摇床是最常见的振荡器，使用中遇到的问题也比较多，仪器无忧网工程师根据多年维修水浴摇床经验，总结出常见的问题及解决方案。 问题一，显示正常、设定正常、无法加热。解决方案：（1）接通电源，打开电源开关，调整设定温度高于实际测量温度，检查温控仪有无输出指示，有则测量加热管是否有电压输入，有则加热管坏，
细胞培养：胎牛血清如何选择？
对于细胞培养而言，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）的重要性不言而喻。尽管近年来无血清培养基和非动物来源的培养基越来越受到关注，但目前大部分细胞还无法适用这些培养基，并且存在费用较高和细胞生长较缓慢的缺点，因此，含有FBS的完全培养基仍然是目前主流的细胞培养体系。 把细胞
梯度PCR仪常见问题及现场解决方案
梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下： 1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误，这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多，这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶，同时降低循环数。此外，四种dNTP的浓度不同也会出现该问题，此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。 2、PCR跑胶，目的条
梯度PCR仪常见问题及现场解决方案
梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下： 1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误，这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多，这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶，同时降低循环数。此外，四种dNTP的浓度不同也会出现该问题，此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。 2、PCR跑胶，目