细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案

细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案 培养基pH值变化迅速 培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压 细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4圈 碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足---加入HEPES缓冲液,使其终浓度为10-25mM 培养基中盐含量不正确---CO2平衡环境中使用以Earle平衡盐为基础的培养基,大气条件下使用以Hanks平衡盐为基础的培养基 细菌、酵母或真菌污染---将细胞和培养基灭菌处理后丢弃 细胞无法在培养器皿上贴壁生长 细胞胰酶消化过度---缩短胰酶消化时间或减少胰酶用量 支原体污染---隔离细胞,检测是否感染支原体;清洗通风厨和培养箱,如细胞被污染,灭菌处理后丢弃 培养基中无附着因子---如果......阅读全文

细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案

培养基pH值变化迅速培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4圈碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足---加入HEPES缓冲液,使其终浓度为1

细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案

  细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案   培养基pH值变化迅速   培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压   细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4

牛胚气管细胞培养常见问题及解决方案

牛胚气管细胞培养基及培养冻存条件准备:1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用

液相色谱仪图谱常见问题原因及解决方案

液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。 A、峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱  b、更换进口筛板  c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3

细胞培养常见问题的原因及其解决的办法

001.问:要怎么样复苏细胞?答:细胞复苏需要准备一个37℃水浴锅、手套、镊子,以及防护眼镜。戴上手套,用镊子夹住液氮罐中拿出的冻存管,然后快速在37℃水浴锅里融解细胞。防护眼镜可以防止液氮罐里刚刚拿出来的管子液氮爆炸…… 002.问:培养基不够用,我能不能换一下细胞培养基啊?答:千万别这么做,细胞

荧光定量pcr常见问题的原因与解决方案

1.扩增产物大小不合适:实时荧光定量PCR扩增片段的长度通常在80-150 bp之间,如果调整反应的时间有可能扩增500bp的片段。    2.PCR反应过程中退火及延伸的时间过短或过长:应根据扩增片段的大小予与调整。    3.MgCl,浓度不合适:按0. 5mm的间距调整MgCI2的浓度。   

PCR实验常见问题、原因分析及其解决方案

PCR产物的电泳检测时间,一般为48h以内,有些最好于当日进行检查,大于48h后带型不规则甚至消失。但有时仍会与到这样那样的问题,影响检测结果的判断,具体归类为以下常见的4点,描述如下:问题一:无扩增产物现象:正对照有条带,而样品则无。原因:1、模板:含有抑制物,含量低。2、Buffer对样品不合适

ELISA常见问题及解决方案

 一.背景高或者非特异性染色 原因解决方案抗体的非特异性结合更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。未充分清洗酶标板确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步骤之间清洗3~5次,不要增加清洗次数。清洗完成后,将

ICP常见问题及解决方案

1、Q射频发生器的频率有40.68和27.12MHz两种哪中更好?A单就两种频率本身来说,都可以满足作为热源的需要,但是由于所谓趋肤效应的存在,频率越高趋肤效应越大,这样有两个好处:等离子体厚度小,光强会更大;中心孔道大,样品对等离子体的影响小(等离子体也是电导体),不容易导致灭火,尤其切换到高盐、

ELISA常见问题及解决方案

  一.背景高或者非特异性染色   原因   解决方案   抗体的非特异性结合   更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。   未充分清洗酶标板   确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步

PCR常见问题及解决方案

PCR常见问题及解决方案   1没有扩展条带   可能的原因及对应的解决方案如下:   酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。   模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR

ELISA常见问题及解决方案

  一.背景高或者非特异性染色   原因   解决方案   抗体的非特异性结合   更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。   未充分清洗酶标板   确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步

pH计的常见问题及解决方案

  1 同一样品,两次测量的 pH值不一样?  温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。  2 同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?  由于两台 pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲

pH计常见问题及解决方案

1  同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2  同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一时间

Western-Blotting常见问题及解决方案

Western Blotting常见问题及解决方案问题原因解决方案胶不平玻璃板不干净胶板洗刷干净;催化剂或加速剂的量不合适加入过硫酸铵和TEMED的量要合适;试剂未混均,致使部分胶块聚合不均匀加入试剂后摇匀,使其充分混合;受热不均匀导致胶聚合不均匀温度合适凝胶漏液玻璃板未对齐两块玻璃板底部要对齐条带

pH计常见问题及解决方案

常见问题及解决方案1  同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2  同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同

pH计常见问题及解决方案

  1.同一样品,两次测量的pH值不一样?  温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。  2.同一样品,同时在两台pH计上测量,读数不一致?  由于两台pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一

ELISA实验常见问题及解决方案

指南。以下是影响ELISA检测的关键因素,也是众多ELISA 用户在实验中经常遇到的问题及解决方案,希望能对您的ELISA检测有帮助:为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作?  温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包

氘灯常见问题及解决方案

光源问题Q&AQ1:什么时候应该更换氘灯? A1:氘灯质保寿命都在1000小时或2000小时使用时间;当您发现仪器系统计时器氘灯使用时间达到质保时间后就应当更换氘灯;从经济的角度考虑,如果氘灯能量信噪比符合实际使用需求,便无须更换。Q2:购买氘灯应该提供哪些信息?A2:提供使用氘灯的仪器品牌和型号以

PCR常见问题及解决方案(二)

问题可能原因解决方法无产物或产量低模板浓度偏低或偏高电泳检测模板浓度,调整模板用量模板降解重新制备;基因组DNA、cDNA应小量分装后低温保存模板中含有抑制反应的杂质纯化模板引物浓度不足调整引物浓度,特别是针对长片段PCR引物存在二级结构重新设计引物,避免二级结构;优化退火温度引物降解引物应高浓度小

PH计常见问题及解决方案

1.同一样品,两次测量的 pH值不一样?  温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。  2.同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?  由于两台 pH计的校正条件不一样(如,不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液

ICP常见问题及解决方案(二)

13、Q ICP-OES和ICP-AES有何区别?A ICP-OES和ICP-AES是电感耦合等离子体发射光谱法不同时期的叫法,ICP-OES即Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry--电感耦合等离子体发射光谱法,旧称

PH计常见问题及解决方案

常见问题及解决方案1.同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2.同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如,不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一

核酸电泳常见问题及解决方案

核酸电泳常见问题及解决方案

ICP常见问题及解决方案(一)

ICP-OES Frequently Asked Questions1、Q射频发生器的频率有40.68和27.12MHz两种哪中更好?A单就两种频率本身来说,都可以满足作为热源的需要,但是由于所谓趋肤效应的存在,频率越高趋肤效应越大,这样有两个好处:等离子体厚度小,光强会更大;中心孔道大,样品对等离

TA克隆常见问题及解决方案

TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突

液相色谱仪图谱常见问题原因和解决方案

1、峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱  b、更换进口筛板  c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱  b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误a、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值b、更有利于得到对称峰。5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离

免疫印迹(Western-Blot)常见问题及建议

          问题                            可能原因                      建议电泳条带成笑脸状胶不均匀冷切,中间冷却不好,电泳系统温度偏高减少电压减慢电泳速度,在冷室或者冰浴中进行电泳电泳条带成皱眉状可能是由于装置不合适,特别可能是凝胶和玻璃

旋转蒸发仪的常见问题及解决方案

  旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏,也就是在减压情况下,当溶剂蒸馏时,蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶,通过一高度回流蛇形冷凝管与减压泵相连,回流冷凝管另一开口与带有磨口的接收烧瓶相连,用于接收被蒸发的有机溶剂。  旋转蒸发仪常见问题有以下几种;  一、电

量热仪的常见问题及解决方案

  1、充氧头放气阀孔口处漏气:密封块上密封圈占有污物或密封圈老化,清除污物或更换密封圈。   2、氧弹盖白色绝缘套处漏气:绝缘套表面占有污物或老化破损,清除污物或更换绝缘套。   3、氧弹盖处漏气:弹头密封圈处沾有污物或密封圈老化,清除污物或更换密封圈。   4、氧弹内气体放不出:放气阀内顶