百思不得其解之“色谱双峰”

峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰:未出峰、几个峰是负峰、出现双峰或肩峰、前伸峰、拖尾峰、平头峰、鬼峰等,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。 今天,小编主要针对其中的双峰情况和大家做下交流。色谱双峰指的是明明是同一种物质,但在色谱图中却呈现出双峰,让人误认为是含有二种物质。 在HPLC分析中,色谱柱正常,样品灵敏度足够,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下(不包括梯度),峰型应对称而尖锐。但是,在对样品了解程度不够,方法不妥,样品处理方法及进样方式不合理时,会出现各种意想不到的问题,而对色谱峰难以作出合理的解释,尤其对于新手更是如此。比如说色谱双峰的问题,这种情况大致可分为四种原因: 1 .色谱柱 如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现(出峰越快,双峰的可能性会减少),尤其采用单一纯物质时,可以......阅读全文

色谱异常峰之“色谱双峰”

色谱双峰产生的原因及处理    液相色谱分析中,在色谱柱正常,样品灵敏度足够,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下(不包括梯度),峰型应对称而尖锐。但是,在对样品了解程度不够,方法不妥,样品处理方法及进样方式不合理下,会出现各种意想不到的问题,而对色谱峰难以作出合理的解释。色谱双峰指的是不

关于高效液相色谱仪色谱峰的双峰问题

  长期使用后的色谱柱,如果有杂质进入,就会使色谱柱入口处的固定相“板结”并在流动相所产生的高压作用下,形成柱头的塌陷,被分析的样品组分的正常色谱峰就变成了双峰,这时可按下述方法来修复色谱柱。首先将柱头的紧固螺母旋下,这时就会发现柱头内的固定相已被压缩进去了,严重时可缩进10mm以上。在这种情况下,

色谱双峰产生的可能及判断和处理

HPLC分析中,在色谱柱正常,样品灵敏度足够,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下(不包括梯度),峰型应对称而尖锐。但是,在对样品了解程度不够,方法不妥,样品处理方法及进样方式不合理下,会出现各种意想不到的问题,而对色谱峰难以作出合理的解释,尤其对于新手更是如此。下面根据本人几年工作的体会,提

液相色谱“双峰”的5大原因,轻松get

  色谱双峰指的是明明是同一种物质,但在色谱图中却呈现双峰,让实验人员误认为含有两种物质。那么,出现双峰的原因主要有哪些呢?今天小编就和大家聊一聊,液相色谱出现“双峰”的原因。  在HPLC分析中,在色谱柱正常,样品浓度适宜,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下,峰型应对称而尖锐。但在实际操作

百思不得其解之“色谱双峰”

  峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰:未出峰、几个峰是负峰、出现双峰或肩峰、前伸峰、拖尾峰、平头峰、鬼峰等,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。   今天,小编主要针对其中的双峰情况和大家做下交流。色谱双峰指的是明

溶解曲线出现双峰

  溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下

高效液相色谱系统色谱分析中出现双峰的原因

高效液相色谱系统色谱分析中出现双峰的原因;色谱柱 在样品分析过程中,如果发现每个色谱峰有两个峰,特别是使用单一纯物质时,可以确定色谱柱存在问题,这通常是由于柱头损坏或柱头固定相污染所致。 如果进样量较小,原始色谱柱正常,色谱峰的形状大多是具有小的峰的大的峰,而不是某个尾部,一般情况下,色谱峰都是正确

液相色谱一个组分出现双峰怎样处理

"问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?答: 1. 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2. 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子"色谱柱塌陷,或者是含酸的水溶液在疏水的色谱柱上走的时间过长。进样量过大、进样技术差或者是pH不对也会

液相色谱一个组分出现双峰怎样处理

"问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?答: 1. 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2. 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子"色谱柱塌陷,或者是含酸的水溶液在疏水的色谱柱上走的时间过长。进样量过大、进样技术差或者是pH不对也会

液相色谱仪分析中色谱峰的双峰问题解决办法

长期使用后的色谱柱,如果有杂质进入就会使色谱柱入口处的固定相“板结”并在流动相所产生的高压作用下,形成柱头的塌陷被分析的样品组分的正常色谱峰就变成了双峰,这时可按下述方法来修复色谱柱,首先将柱头的紧固螺母旋下,这时就会发现柱头内的固定相已被压缩进去了,严重时可缩进10mm以上,在这种情况下,我们可用

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因

原因:①筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子; ②存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子; ③可能柱超载,减少进样量

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

溶解曲线为什么出现双峰

溶解曲线的意思是:当温度高于扩增产物的TM值时,双链产物变单链,荧光值因为这样的变化而产生变化,根据这一原理,你推算你的体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化,比如你用的是TAQMAN探针,taqman探针产生荧光变化的原理是探针被外切酶活性的TAQ酶剪切断而产生的,那么在只有温度变化的情况下,是

高效液相色谱仪分析中出现双峰是什么原因造成的

如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现(出峰越快,双峰的可能性会减少),尤其采用单一纯物质时,可以肯定色谱柱出问题-柱头受损或柱头固定相变脏或流失。如果进样量少,原来色谱柱正常,色谱峰的形状多为一大峰带一小峰,不一定拖尾,这一般应是柱头受堵,将色谱柱反过来接,用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂,将堵在柱

溶解曲线双峰可以用吗

如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。扩

溶解曲线双峰可以用吗

如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?

1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么

拖尾可能的原因很多,建议您换一个简单的标准品及流动相,看是否是仪器和柱子的问题。如不是,则在您的流动相条件或近似条件下分析一简单标准品。若仍不拖尾,则拖尾原因可能有2个,一是柱子跟样品不合适,建议您换合适的柱子,二是流动相跟样品不合适,您需要调整流动相条件样品溶液等等~~~另外,在进行上述鉴别前,您

实验室分析仪器液相色谱出现“双峰”的原因分析

色谱双峰指的是明明是同一种物质,但在色谱图中却呈现双峰,让实验人员误认为含有两种物质。那么,出现双峰的原因主要有哪些呢?今天就和大家聊一聊,液相色谱出现“双峰”的原因。在HPLC分析中,在色谱柱正常,样品浓度适宜,分析方法合适,色谱峰在出峰时间较短的条件下,峰型应对称而尖锐。但在实际操作中,如果对样

荧光定量PCR结果溶解曲线有双峰

根据曲线初步判断,整个实验设计还可以!你做相对定量吗,将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了! 如果绝对定量,需要进一步实验吧!

溶解曲线有双峰则ct值是否可信

如果有标准曲线,按照标准曲线计算。 一般都是相对量。则用delta delta CT方法来计算。举例如下: 对照组基因A的CT值为20, 内参(比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18,内参CT值14。 首先算加样量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说。

蛋白质洗脱曲线为什么有双峰

原因可能有很多种。有可能是你在洗脱时,当出现第一个洗脱峰后,洗脱液已经接近柱床表面,没有及时加入洗脱液曹成蛋白被洗脱下来的较少;然后补加洗脱液,大量蛋白又继续被洗脱下来;或者层析柱发生倾斜、移动等;如果粗心把样品的顺序搞错也不是没有可能哈……

粒度分析中的双峰与单峰的区别

粒度分析中,所谓双峰,就是频度分布有两个峰,单峰的就一个峰。例如,附图为双峰的。有些激光粒度仪,可以事先定分布是单峰,还是多峰的。

PCR样本小片段前双峰可能的原因

定量引物是NCBI上设计,特异性没问题,并且跑普通PCR条带特异也很好。跑定量时内参的溶解曲线峰没问题,重复性也好。就是自己的引物跑出了双峰,重复性差,达到了2。

颗粒粒径分布出现双峰-是什么分布

海盐粒子、燃烧烟尘等等颗粒物,又称尘。大气中的固体或液体颗粒状物质、碳氢化合物等)之间。一次颗粒物是由天然污染源和人为污染源释放到大气中直接造成污染的颗粒物,例如土壤粒子。二次颗粒物是由大气中某些污染气体组分(如二氧化硫、氮氧化物。颗粒物可分为一次颗粒物和二次颗粒物