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实时荧光Taqman探针设计的几个要点

实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子信标Molecular Beacon。广泛使用的TaqMan探针法是指PCR扩增时在加入一对引物 的同时另外加入一个特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。探针的5′端标记有荧光报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等,3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher, Q),如TAMRA等。当探针完整的时候,5′端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团......阅读全文

原子荧光荧光值偏低

如果稳定性差,那你的线性就不在继续了。建议 看看是否是管路堵塞了。(平时500~600的只有几十的样子)如果是这样的 我很怀疑的火焰是否点着了还有你的电流用多少,伏高压又是多少?只是你上面的描述很难再继续判断了

荧光显微镜检测荧光

生物显微镜是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。左图所示为生产的倒置生物显微镜型,该生物显微镜也是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的必备检验设备。生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生

荧光检测器的荧光生产

  从电子跃迁的角度来讲,荧光是指某些物质吸收了与它本身特征频率相同的光线以后,原子中的某些电子从基态中的最低振动能级跃迁到较高的某些振动能级。电子在同类分子或其他分子中撞击,消耗了相当的能量,从而下降到第一电子激发态中的最低振动能级,能量的这种转移形式称为无辐射跃迁。由最低振动能级下降到基态中的某

单分子荧光染料——ATTO荧光染料

单分子荧光检测技术是近十年来迅速发展起来的一种超灵敏的检测技术,其检测尺度可以精确到纳米量级,是单分子检测的首选方法。该检测技术利用荧光标记来显示和追踪单个分子的构象变化、动力学、单分子之间的相互作用以及进行单分子操纵。而荧光染料作为重要的标记物在单分子检测中起到了举足轻重的作用。荧光染料,指吸收某

单分子荧光染料——ATTO荧光染料

单分子荧光检测技术是近十年来迅速发展起来的一种超灵敏的检测技术,其检测尺度可以精确到纳米量级,是单分子检测的首选方法。该检测技术利用荧光标记来显示和追踪单个分子的构象变化、动力学、单分子之间的相互作用以及进行单分子操纵。而荧光染料作为重要的标记物在单分子检测中起到了举足轻重的作用。荧光染料,指吸收某

荧光测量

荧光测量   荧光测量对许多生物学(叶绿素和类胡萝卜素)、生物医学(病变的荧光诊断)和环境监测是必要的测量手段。荧光测量通常需要高灵敏度的光谱仪(推荐使用AvaSpec-2048TEC,积分时间大于 5秒)。对于大多数荧光应用来说,产生的荧光能量只相当于激发光能量的3%左右。荧光的光子能量比

荧光测量

荧光测量对许多生物学(叶绿素和类胡萝卜素)、生物医学(病变的荧光诊断)和环境监测是必要的测量手段。荧光测量通常需要高灵敏度的光谱仪(推荐使用AvaSpec-2048TEC,积分时间大于 5秒)。对于大多数荧光应用来说,产生的荧光能量只相当于激发光能量的3%左右。荧光的光子能量比激发光的光子能

荧光染料

中文名荧光染料外文名fluorescent dye定义:荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。

自发荧光

自发荧光(对甲醛固定的组织样品尤为显著)产生的问题在表现上与串色类似。有自发荧光的样品激发后经常会在其他通道检测出荧光发射,使得到的照片看起来有共定位荧光团。如用抗体和合成荧光团对背景过度染色,也会在两个荧光团非特异性标记明显的地方产生看起来像共定位的图像。这个假象可以通过认真地制备样品、用合适的

原子荧光测砷荧光度低

如果样品很多,建议还是高配标准系列浓度比较好.这样的好处是可以减少稀释带来的误差.